細胞實(shí)驗的方法(生物的實(shí)驗方法)
1.生物的實(shí)驗方法有哪些
(1)顯微觀(guān)察法，如觀(guān)察植物細胞有絲分裂、觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)、觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原實(shí)驗等.
(2)觀(guān)色法，如觀(guān)察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳等.
(3)原子示綜法，如噬菌體浸染細菌的實(shí)驗，用18O2和14CO2追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉移途徑的實(shí)驗等.
(4)等組實(shí)驗法，如小麥淀粉酶催化淀粉水解的實(shí)驗，發(fā)現生長(cháng)素的燕麥胚芽鞘實(shí)驗等.
(5)加法創(chuàng )意法，如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長(cháng)激素，用移植法研究性激素等.
(6)減法創(chuàng )意法，如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素和生長(cháng)激素的實(shí)驗，雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著(zhù)的種子等.
(7)雜交實(shí)驗法，如孟德?tīng)柊l(fā)現遺傳定律的植物雜交、測交的實(shí)驗，小麥的雜交等.
(8)化學(xué)分析法，如番茄和水稻對Ca和Si選擇性吸收，葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗等.
(9)理論分析法，如大、小兩種草履蟲(chóng)競爭的實(shí)驗，植物根向地生長(cháng)、莖背地生長(cháng)的實(shí)驗，植物向光性實(shí)驗等.
(10)模擬實(shí)驗法，如滲透作用的實(shí)驗裝置，分離定律的模擬實(shí)驗等
2.生物實(shí)驗有多少種實(shí)驗方法
1.顯微觀(guān)察法：如“觀(guān)察細胞有絲分裂”“觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)”“用顯微鏡觀(guān)察多種多樣的細胞”等.
2.觀(guān)色法：如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”“觀(guān)察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳”“DNA和RNA的分布”等.
3.同位素標記法（元素示蹤法）：如“噬菌體浸染細菌的實(shí)驗”“恩格爾曼實(shí)驗”等.
4.補充法：如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長(cháng)激素，用移植法研究性激素等.
5.摘除法：如用“閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素或生長(cháng)激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著(zhù)的種子”等.
6.雜交法：如植物的雜交、測交實(shí)驗等.
7.化學(xué)分析法：如“番茄對Ca和Si的選擇吸收”“葉綠體中色素的提取和分離”等.
8.理論分析法：如“大、小兩種草履蟲(chóng)的競爭實(shí)驗”“植物向性動(dòng)物的研究”等.
9.模擬實(shí)驗法：如“滲透作用的實(shí)驗裝置”“分離定律的模擬實(shí)驗”等.
10.引流法：臨時(shí)裝片中液體的更換，用吸水紙在一側吸引，于另一側滴加換進(jìn)的液體.
3.高中生物常用的實(shí)驗方法有哪些
1.實(shí)驗方法
實(shí)驗方法是整個(gè)實(shí)驗設計的精髓，是做好實(shí)驗設計的關(guān)鍵所在。現將與中學(xué)實(shí)驗有關(guān)的一些最常見(jiàn)的經(jīng)典的實(shí)驗方法匯總如下：
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法：
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復燃
⑥無(wú)O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實(shí)驗結果的顯示方法：
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動(dòng)物耗氧量，發(fā)育速度等
⑦生長(cháng)激素作用——生長(cháng)速度（體重變化，身高變化）
⑧胰島素作用——動(dòng)物活動(dòng)狀態(tài)
⑨菌量——菌落數或亞甲基藍溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養基
(3)實(shí)驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線(xiàn)粒體提取——細胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個(gè)接種過(guò)程都在實(shí)驗室無(wú)菌區進(jìn)行。
4.初中生物實(shí)驗方法有哪些
實(shí)驗方法是整個(gè)實(shí)驗設計的精髓，是做好實(shí)驗設計的關(guān)鍵所在.現將與中學(xué)實(shí)驗有關(guān)的一些最常見(jiàn)的經(jīng)典的實(shí)驗方法匯總如下：
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法：
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復燃
⑥無(wú)O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實(shí)驗結果的顯示方法：
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動(dòng)物耗氧量，發(fā)育速度等
⑦生長(cháng)激素作用——生長(cháng)速度（體重變化，身高變化）
⑧胰島素作用——動(dòng)物活動(dòng)狀態(tài)
⑨菌量——菌落數或亞甲基藍溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養基
(3)實(shí)驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線(xiàn)粒體提取——細胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個(gè)接種過(guò)程都在實(shí)驗室無(wú)菌區進(jìn)行.
(4)實(shí)驗中控制溫度的方法：
①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱
②酶促反應：水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱
⑤細胞和組織培養以及微生物培養：恒溫培養
5.細胞生物學(xué)實(shí)驗中常用來(lái)固定細胞或細胞器的方法有哪些
細胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價(jià)結合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。下面對這幾種做具體介紹。
一、吸附法
1，原理
利用載體和細胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡(jiǎn)單，固定化過(guò)程對細胞活性影響小。
2，載體的材料
采用吸附法固定細胞，所用的載體主要有：硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、
多孔陶瓷、離子交換樹(shù)脂和等。塑料
3，影響吸附固定化的因素
(1)Z-電位
(2)細胞的性質(zhì)和細胞壁的組成
(3)載體的性質(zhì)
(4)pH
二、共價(jià)結合法
利用細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無(wú)機或有機載體反應，形成共價(jià)鍵將細胞固定。用該法制備的固定化細胞一般為死細胞。
三、交聯(lián)法
利用雙功能或多功能試劑與細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應，從而使細胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。
由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。
四、包埋法
包埋法是細胞固定化最常用的方法。包埋法可以分為：
1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細胞包裹起來(lái)，形成微型膠囊；
2，凝膠包埋法：是在無(wú)菌條件下，將生物細胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過(guò)相應的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。
常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。
五、固定化方法的比較
吸附法：條件溫和、方法簡(jiǎn)便、載體可再生。但操作穩定性差。
共價(jià)法：操作穩定性高。但由于試劑的毒性，易引起細胞的破壞。
交聯(lián)法：可得到高細胞濃度，但機械強度低，無(wú)法再生，不適于實(shí)際應用。
包埋法：細胞和載體間沒(méi)有束縛，固定化后，細胞仍保持較高活力。但這類(lèi)方法只適用于小分子底物。
6.細胞活力測定的方法有哪些
根據每個(gè)細胞有一定的重量而設計的。
它可以用于單細胞、多細胞以及絲狀體微生物生長(cháng)的測定。將一定體積的樣品通過(guò)離心或過(guò)濾將菌體分離出來(lái)，經(jīng)洗滌，再離心后直接稱(chēng)重，求出濕重，如果是絲狀體微生物，過(guò)濾后用濾紙吸去菌絲之間的自由水，再稱(chēng)重求出濕重。
不論是細菌樣品還是絲狀菌樣品，可以將它們放在已知重量的平皿或燒杯內，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器內冷卻，再稱(chēng)量，求出微生物干重。如果要測定固體培養基上生長(cháng)的放線(xiàn)菌或絲狀真菌，可先加熱至50℃，使瓊脂熔化，過(guò)濾得菌絲體，再用50℃的生理鹽水洗滌菌絲，然后按上述方法求出菌絲體的濕重或干重。
除了干重、濕重反映細胞物質(zhì)重量外，還可以通過(guò)測定細胞中蛋白質(zhì)或DNA的含量反映細胞物質(zhì)的量。蛋白質(zhì)是細胞的主要成分，含量也比較穩定，其中氮是蛋白質(zhì)的重要組成元素。
從一定體積的樣品中分離出細胞，洗滌后，按凱氏定氮法測出總氮量。蛋白質(zhì)含氮量為16%，細菌中蛋白質(zhì)含量占細菌固形物的50%一80%，一般以65%為代表，有些細菌則只占13%一14%，這種變化是由菌齡和培養條件不同所產(chǎn)生的。
因此總含氮量與蛋白質(zhì)總量之間的關(guān)系可按下列公式計算：蛋白質(zhì)總量=含氮量*6.25核酸DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個(gè)細菌的DNA含量相當恒定，平均為8.4*`10^(-5)`NG。因此從一定體積的細菌懸液中所含的細菌中提取DNA，求得DNA含量，再計算出這一定體積的細菌懸液所含的細菌總數。
7.高中生物所有實(shí)驗的實(shí)驗過(guò)程,方法,結論總結
生物實(shí)驗總結 實(shí)驗一 觀(guān)察DNA和RNA在細胞中的分布 實(shí)驗原理：DNA 綠色，RNA 紅色 分布：真核生物DNA主要分布在細胞核中，線(xiàn)粒體和葉綠體內也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質(zhì)中。
實(shí)驗結果： 細胞核呈綠色，細胞質(zhì)呈紅色. 實(shí)驗二 物質(zhì)鑒定 還原糖 + 斐林試劑 磚紅色沉淀 脂 肪 + 蘇丹III 橘黃色 脂 肪 + 蘇丹IV 紅色 蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 紫色反應 1、還原糖的檢測 （1）材料的選取：還原糖含量高，白色或近于白色，如蘋(píng)果，梨，白蘿卜。 （2）試劑：斐林試劑（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），現配現用。
（3）步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL（斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入）→水浴加熱2min左右→觀(guān)察顏色變化（白色→淺藍色→磚紅色） ★模擬尿糖的檢測 1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、檢測方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙 3、結果：（用斐林試劑檢測）試管內發(fā)生出現磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現磚紅色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖，與斐林試劑發(fā)生反應產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無(wú)還原糖，所以沒(méi)有發(fā)生反應。
2、脂肪的檢測 （1）材料的選取：含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。 （2）步驟： 制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央 ↓ 染色（滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作裝片（滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片） ↓ 鏡檢鑒定（顯微鏡對光→低倍鏡觀(guān)察→高倍鏡觀(guān)察染成橘黃色的脂肪顆粒） 3、蛋白質(zhì)的檢測 （1）試劑：雙縮脲試劑（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀(guān)察顏色變化（紫色） 考點(diǎn)提示： （1）常見(jiàn)還原性糖與非還原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。
（2 ）還原性糖植物組織取材條件？ 含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋(píng)果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。 （3）研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對實(shí)驗有何影響？ 加石英砂是為了使研磨更充分。
不加石英砂會(huì )使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。 （4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現混現用？ 混合后使用；產(chǎn)生氫氧化銅；氫氧化銅不穩定。
（5）還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序為？ 淺藍色 棕色 磚紅色 （6）花生種子切片為何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于顯微鏡的觀(guān)察。 （7）轉動(dòng)細準焦螺旋時(shí)，若花生切片的細胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片的厚薄不均勻。
（8）脂肪鑒定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用？先加A液的目的怎樣通過(guò)對比看顏色變化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈堿性；先留出一些大豆組織樣液做對比。
實(shí)驗三 觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng) 1、材料：新鮮蘚類(lèi)葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細胞臨時(shí)裝片 2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀(guān)察，綠色，球形或橢球形。 用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線(xiàn)粒體成藍綠色，細胞質(zhì)接近無(wú)色。
知識概要： 取材 制片 低倍觀(guān)察 高倍觀(guān)察 考點(diǎn)提示： （1）為什么可直接取用蘚類(lèi)的小葉，而不能直接取用菠菜葉？ 因為蘚類(lèi)的小葉很薄，只有一層細胞組成，而菠菜葉由很多層細胞構成。 （2）取用菠菜葉的下表皮時(shí)，為何要稍帶些葉肉？ 表皮細胞除保衛細胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細胞含較多的葉綠體。
（3）怎樣加快黑藻細胞質(zhì)的流動(dòng)速度？最適溫度是多少？ 進(jìn)行光照、提高水溫、切傷部分葉片；25℃左右。 （4）對黑藻什么部位的細胞觀(guān)察，所觀(guān)察到的細胞質(zhì)流動(dòng)的現象最明顯？ 葉脈附近的細胞。
（5）若視野中某細胞中細胞質(zhì)的流動(dòng)方向為順時(shí)針，則在裝片中該細胞的細胞質(zhì)的實(shí)際流動(dòng)方向是怎樣的？ 仍為順時(shí)針。 （6）是否一般細胞的細胞質(zhì)不流動(dòng)，只有黑藻等少數植物的細胞質(zhì)才流動(dòng)？ 否，活細胞的細胞質(zhì)都是流動(dòng)的。
（7）若觀(guān)察植物根毛細胞細胞質(zhì)的流動(dòng)，則對顯微鏡的視野亮度應如何調節？ 視野應適當調暗一些，可用反光鏡的平面鏡來(lái)采光或縮小光圈。 （8）在強光照射下，葉綠體的向光面有何變化？葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。
實(shí)驗四 觀(guān)察有絲分裂 1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜） 2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養 （二）裝片的制作 制作流程：解離→漂洗→染色→制片 1. 解離： 藥液： 質(zhì)量分數為15%的鹽酸，體積分數為95%的酒精（1 : 1混合液）. 時(shí)間： 3~5min .目的： 使組織中的細胞相互分離開(kāi)來(lái). 2. 漂洗： 用清水漂洗約3min. 目的： 洗去藥液，防止解離過(guò)度，并有利于染色. 3. 染色： 用質(zhì)量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液（或醋酸洋紅液）染色3~ 5min 目的： 使染色體著(zhù)色，利于觀(guān)察. 4. 制片： 將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子把根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按。
