常用的樣品與處理方法(常用的樣品預(yù)處理方法)
1.常用的樣品預(yù)處理方法有哪些
1.溶劑提取法，同一溶劑中，不同物質(zhì)具有不同的溶解度。
利用混合物中各物質(zhì)溶解度的不同將混合物組分完全或部分分離的過(guò)程稱為萃取，也稱提取，常用方法有以下幾種：2.浸提法：浸提法又稱浸泡法。用于從固體混合物或有機(jī)體中提取某種物質(zhì)，所采用的提取劑，應(yīng)既能大量溶解被提取的物質(zhì)，又要不破壞被提取物質(zhì)的性質(zhì)。
為了提高物質(zhì)在溶劑中的溶解度，往往在浸提時(shí)加熱。如用索氏抽提法提取脂肪。
提取劑是此類方法中重要因素，可以用單一溶劑，也可以用混合溶劑。3.溶劑萃取法：溶劑萃取法用于從溶液中提取某一組分，利用該組分在兩種互不相溶的試劑中分配系數(shù)的不同，使其從一種溶液中轉(zhuǎn)移至另一種溶劑中，從而與其他組分分離，達(dá)到分離和富集的目的。
通常可用分液漏斗多次提取達(dá)到目的。若被轉(zhuǎn)移的成分是有色化合物，可用有機(jī)相直接進(jìn)行比色測(cè)定，即萃取比色法。
萃取比色法具有較高的靈敏度和選擇性，如，雙硫腙法測(cè)定食品中的鉛含量。此法設(shè)備簡(jiǎn)單、操作迅速、分離效果好，但是，成批試樣分析時(shí)工作量大。
同時(shí)，萃取溶劑常易揮發(fā)，易燒，且有毒性，操作時(shí)應(yīng)加以注意。4.鹽析法：向溶液中加入某種無(wú)機(jī)鹽，使溶質(zhì)在原溶劑中的溶解度大大降低，而從溶液中沉淀析出，這種方法叫做鹽析。
如在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的鹽類（硫酸銨），特別是加入重金屬鹽，使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來(lái)。在進(jìn)行鹽析工作時(shí)，應(yīng)注意溶液中所加入的物質(zhì)的選擇。
它應(yīng)是不會(huì)破壞溶液中所要析出的物質(zhì)，否則達(dá)不到鹽析提取的目的。磺化法和皂化法：這是處理油脂或脂肪樣品時(shí)經(jīng)常使用的方法。
例如，殘留農(nóng)藥分析和脂溶性維生素測(cè)定中，油脂被濃硫酸磺化，或被堿皂化，由疏水性變成親水性，使油脂中需檢測(cè)的非極性物質(zhì)能較容易地被非極性或弱極性溶劑提取出來(lái)。5.沉淀分離法：沉淀分離法是利用沉淀反應(yīng)進(jìn)行分離的方法。
在試樣中加入適當(dāng)?shù)某恋韯?，使被測(cè)組分沉淀下來(lái)，或?qū)⒏蓴_組分沉淀除去，從而達(dá)到分離的目的。6.掩蔽法：利用掩蔽劑與樣液中的干擾成分作用，使干擾成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴桓蓴_測(cè)定的狀態(tài)，即被掩蔽起來(lái)。
運(yùn)用這種方法，可以不經(jīng)過(guò)分離干擾成分的操作而消除其干擾作用，簡(jiǎn)化分析步驟，因而在食品分析中應(yīng)用十分廣泛，常用于金屬元素的測(cè)定。7.色層分離法：色層分離法又稱色譜分離法，是一種在載體上進(jìn)行物質(zhì)分離的方法的總稱。
根據(jù)分離原理的不同，可分為吸附色譜分離、分配色譜分離和離子交換色譜分離等。此類方法分離效果好，近年來(lái)在食品分析中應(yīng)用得越來(lái)越廣泛。
色層分離不僅分離效果好，而且分離過(guò)程往往也就是鑒定的過(guò)程。本法常用于有機(jī)物質(zhì)的分析測(cè)定。
8.吸附色譜分離：吸附色譜分離法利用聚酰胺、硅膠、硅藻土、氧化鋁等吸附劑，經(jīng)過(guò)活化處理后，具有適當(dāng)?shù)奈侥芰?，可?duì)被測(cè)組分或干擾組分進(jìn)行選擇性的吸附而達(dá)到分離的目的。比如：食品中色素的測(cè)定，可將樣品溶液中的色素經(jīng)吸附劑吸附（其他雜質(zhì)不被吸附），經(jīng)過(guò)過(guò)濾、洗滌，再用適當(dāng)?shù)娜軇┙馕玫奖容^純凈的色素溶液。
吸附劑可以直接加入樣品中吸附色素，也可將吸附劑裝入玻璃管制成吸附柱或涂布成薄層板使用。9.分配色譜分離：分配色譜分離法根據(jù)兩種不同的物質(zhì)在兩相中的分配比不同進(jìn)行分離的，兩相中一相是流動(dòng)的，稱為流動(dòng)相；另一相是固定的，稱為固定相。
當(dāng)溶劑滲透于固定相中并向上滲透時(shí)，分配組分就在兩相中進(jìn)行反復(fù)分配，進(jìn)而分離，例如，多糖類樣品的紙上層析，樣品經(jīng)酸水解處理，中和后制成試液，在濾紙上進(jìn)行點(diǎn)樣，用苯酚-1%氨水飽和溶液展開，苯胺鄰苯二酸顯色劑顯色，于105℃加熱數(shù)分鐘，可見不同色斑：戊醛糖（紅棕色）、己醛糖（棕褐色）、己酮糖（淡棕色）、雙糖類（黃棕色）的色斑。10.離子交換色譜分離：離子交換色譜分離法是利用離子交換劑與溶液中的離子之間所發(fā)生的交換反應(yīng)來(lái)進(jìn)行分離的方法。
根據(jù)被交換離子的電荷分為陽(yáng)離子交換和陰離子交換。該法可用于從樣品溶液中分離待測(cè)離子，也可從樣品溶液中分離干擾組分。
分離操作可將樣液與離子交換劑一起混合振蕩或?qū)右壕従復(fù)ㄟ^(guò)事先制備好的離子交換柱，則被測(cè)離子與交換劑上的H+或OH-發(fā)生交換，被測(cè)離子或干擾組分上柱，從而將其分離。例如，可以利用離子交換色譜分離法制備無(wú)氨水、無(wú)鉛水及分離比較復(fù)雜的樣品。
11.濃縮法：食品樣品經(jīng)提取、凈化后，有時(shí)凈化液的體積較大，被測(cè)組分的濃度太低，會(huì)影響最后結(jié)果的測(cè)定。此時(shí)需要對(duì)被測(cè)樣液進(jìn)行濃縮，以提高被測(cè)成分的濃度。
常用的方法有常壓濃縮和減壓濃縮兩種。12.常壓濃縮法：常壓濃縮法只能用于待測(cè)組分為非揮發(fā)性的樣品試液的濃縮，否則會(huì)造成待測(cè)組分的損失。
操作可采用蒸發(fā)皿直接揮發(fā)。如果溶劑需要回收，則可用一般蒸餾裝置或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
該法操作簡(jiǎn)便、快速，是常用的方法。13.減壓濃縮法：減壓濃縮法主要用于待測(cè)組分為熱不穩(wěn)定性或易揮發(fā)的樣品凈化液的濃縮，其樣品凈化液的濃縮需采用K-D濃縮器。
濃縮時(shí)，水浴加熱并抽氣減壓，以便濃縮在較低的溫度下進(jìn)行，且速度快，可減少被測(cè)組分的損失。食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定（如，甲胺磷。
2.食品分析樣品處理方法有哪些
1、有機(jī)物破壞法
(1)干法灰化：有機(jī)物破壞徹底，適用于除汞、砷、鉛等以外的金屬元素的測(cè)定。
(2)濕法消化：加熱溫度較干法低，減少了金屬揮發(fā)逸散的損失，但易產(chǎn)生有毒氣體和泡沫。
(3)紫外光分解法：由高壓汞燈提高紫外光，在（85±5）℃的溫度下進(jìn)行光解。
(4)微波消解法：適用于處理大批量樣品及萃取極性與熱不穩(wěn)定的化合物
2、蒸餾法
(1)常壓蒸餾
(2)減壓蒸餾
(3)水蒸汽蒸餾
(4)分餾
3、溶劑提取法
(1)浸提法
(2)萃取法
(3)超臨界流體萃取
(4)微波萃取
4、色層分離法
(1)吸附色譜分離
(2)分配色譜分離
(3)離子交換色譜分離
5、化學(xué)分離法
(1)磺化法和皂化法：除去油脂的方法，常用于農(nóng)藥分析中樣品的凈化。
(2)沉淀分離法：
(3)掩蔽法：
6、濃縮法
(1)常壓濃縮法
(2)減壓濃縮法
3.原子光譜中的樣品處理方法有哪些
原子光譜中的樣品處理方法有哪些
樣品處理是整個(gè)分析測(cè)試過(guò)程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，其目的是利用各種化學(xué)方法將待測(cè)元素從固（液）態(tài)試樣中定量地以離子形式轉(zhuǎn)入測(cè)試溶液.選擇合理的樣品分解方法，可使分析手續(xù)大大簡(jiǎn)化，使分析方法的適應(yīng)性、準(zhǔn)確性大大提高.
設(shè)計(jì)最佳樣品處理的原則是：
① 保證樣品中的被測(cè)元素全部定量地轉(zhuǎn)入試液，即樣品分解要完全；
② 避免樣品處理過(guò)程中引入干擾元素，同時(shí)要有利于除去干擾元素；
③ 分解方法要盡量簡(jiǎn)便，易操作，經(jīng)濟(jì)、迅速、安全，盡量減少對(duì)環(huán)境的污染；
④ 便于成批處理試樣.
要設(shè)計(jì)出符合這些條件的樣品處理方法，必須深入了
a）被測(cè)元素及其化合物的物理化學(xué)性質(zhì)；
b）被測(cè)元素在樣品中的含量范圍、賦存形態(tài)；
c）樣品基體組成和性質(zhì)；
d）采用的最終的測(cè)試方法和技術(shù).
以國(guó)內(nèi)外測(cè)定As、Se和Hg所用樣品各種處理方法為例
國(guó)內(nèi)外測(cè)定各種樣品中As、Se和Hg，所采用的樣品處理方法大致分為三類：
1）濕法酸/堿分解；
2）密閉體系燃燒法（氧彈燃燒法）；
3）燒結(jié)（半熔）法.
4.幾種常用樣品前處理方法在食品重金屬檢驗(yàn)中的應(yīng)用
食品是人類生存的基本要素，由于工業(yè)化的發(fā)展，導(dǎo)致食品中可能含有或者被污染有危害人體健康的物質(zhì)。隨著人們生活水平的提高，食品安全性問題日益受到重視，國(guó)家加大了對(duì)食品的監(jiān)管工作。與此同時(shí)也使食品檢驗(yàn)工作者的檢驗(yàn)工作量增多，這就要求食品檢驗(yàn)工作者在保證檢驗(yàn)質(zhì)量的同時(shí)還應(yīng)該提高工作效率。在食品的重金屬檢驗(yàn)中，樣品前處理最為食品檢驗(yàn)的關(guān)鍵步驟，直接影響分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度，選擇合適的前處理方法，縮短樣品的前處理時(shí)間，是在保證檢驗(yàn)質(zhì)量的同時(shí)提高檢驗(yàn)效率的一個(gè)重要方法。筆者依據(jù)目前常用的四種樣品前處理方法結(jié)合食品中金屬元素的檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，分析了四種方法在食品金屬檢驗(yàn)中的應(yīng)用和注意事項(xiàng)，為食品檢驗(yàn)工作者選取合適的樣品前處理方法提供一定的參考。
濕消化法濕消化法是在適量的食品樣品中，加入氧化性強(qiáng)酸，加熱破壞有機(jī)物，使待測(cè)的無(wú)機(jī)成分釋放出來(lái)，形成不揮發(fā)的無(wú)機(jī)化合物，以便進(jìn)行分析測(cè)定。
濕法消化是目前應(yīng)用比較廣泛的一種食品樣品前處理方法，該方法實(shí)用性強(qiáng)，幾乎所有的食品都可以用該方法消化。
下面介紹下濕法消解的優(yōu)勢(shì)：首先、前處理所用的試劑即酸都可以找到高純度的，同時(shí)基體成分都比較簡(jiǎn)單（偶爾也會(huì)產(chǎn)生部分硫酸鹽）；其次、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，只要控制好消化溫度，大部分元素一般很少或幾乎沒有損失。例如，在測(cè)定醬油中的砷含量時(shí)采用濕法消化加入了硝酸高氯酸混合酸和硫酸，加標(biāo)回收率為95%以上。即便像汞等極易揮發(fā)的元素，只要正確掌握消化溫度，也不會(huì)有損失。
但是濕消化法也有一定的缺陷：
首先，由于該反應(yīng)是氧化反應(yīng)，樣品氧化時(shí)間較長(zhǎng)，需要一個(gè)小時(shí)左右的時(shí)間（隨樣品的成分而定），且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一次不能消化超過(guò)10個(gè)樣品，因此方法的勞動(dòng)強(qiáng)度比較大。
其次，樣品消化時(shí)常使用的試劑硝酸、高氯酸、過(guò)氧化氫，硫酸都是具有腐蝕性且比較危險(xiǎn)的。在用硝酸和高氯酸時(shí)產(chǎn)生的酸霧和煙，對(duì)通風(fēng)櫥的腐蝕性也很大。特別需要注意的是用高氯酸消解樣品時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，燒杯中液體不能燒干，并且要保證溫度達(dá)到200攝氏度時(shí)只有少量的有機(jī)成分存在，否則高氯酸的氧化電位在此溫度下會(huì)迅速升高，會(huì)導(dǎo)致劇烈的爆炸！因此建議，在使用高氯酸時(shí)，最好先用硝酸氧化部分的有機(jī)物，或者是先加入硝酸與高氯酸的混合液浸泡一夜，同時(shí)實(shí)驗(yàn)要在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。消化液不能蒸干，以防部分元素如硒、鉛的損失。
還有，由于氧化反應(yīng)過(guò)程中加入了濃酸，這些酸可能會(huì)對(duì)儀器產(chǎn)生損害進(jìn)而影響試驗(yàn)結(jié)果，因此消解結(jié)束后需要排酸，例如，用原子熒光測(cè)定總砷，測(cè)定時(shí)硝酸的存在會(huì)妨礙的產(chǎn)生，對(duì)測(cè)定有干擾，消解完全后應(yīng)盡可能的加熱驅(qū)除硝酸。國(guó)標(biāo)實(shí)驗(yàn)中采用硝酸-硫酸消解樣品，由于硫酸的沸點(diǎn)比硝酸要高，所以最后消化液里基本上沒有硝酸。但是需要注意的是，采用硝酸-硫酸消解樣品時(shí)因避免發(fā)生碳化，消解過(guò)程發(fā)生碳化時(shí)會(huì)使砷嚴(yán)重?fù)p失，所以在消解過(guò)程中注意若消化液色澤變深應(yīng)適當(dāng)補(bǔ)加硝酸，值得注意的是在標(biāo)準(zhǔn)曲線也要保證和樣品消解液中相同的酸濃度即要基體匹配。
某些特殊食品濕消解時(shí)注意事項(xiàng)：
含油脂成分較高的食品，如植物油、桃酥等，在加入混合酸后，由于樣品浮在混酸表面上，容易形成完整的膜，加熱時(shí)液面上有劇烈的反應(yīng)，容易造成爆沸或飛濺，因此建議樣品稱樣量不高于1g（植物油最好為0.1-0.2g），同時(shí)要在消解過(guò)程中隨時(shí)補(bǔ)加硝酸，一般來(lái)講硝酸高氯酸混合液加入15ml，放置過(guò)夜讓其緩慢氧化，次日消化中途還需要補(bǔ)加混合酸10ml左右。
酒類樣品如葡萄酒、果酒，因其含有大量的乙醇，在加混合酸消化之前一定要加熱蒸發(fā)掉乙醇（注意不能干涸），待乙醇揮發(fā)完畢后，再加入酸消化。我曾經(jīng)在消化葡萄酒樣品時(shí)，未排乙醇直接加入了混合酸，結(jié)果過(guò)了幾分鐘后，反應(yīng)非常劇烈，產(chǎn)生大量氣泡同時(shí)樣品外溢，導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。
5.如何根據(jù)樣品的特性來(lái)選擇樣品的處理方法
樣品處理是整個(gè)分析測(cè)試過(guò)程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，其目的是利用各種化學(xué)方法將待測(cè)元素從固（液）態(tài)試樣中定量地以離子形式轉(zhuǎn)入測(cè)試溶液。
選擇合理的樣品分解方法，可使分析手續(xù)大大簡(jiǎn)化，使分析方法的適應(yīng)性、準(zhǔn)確性大大提高。 設(shè)計(jì)最佳樣品處理的原則是： ① 保證樣品中的被測(cè)元素全部定量地轉(zhuǎn)入試液，即樣品分解要完全； ② 避免樣品處理過(guò)程中引入干擾元素，同時(shí)要有利于除去干擾元素； ③ 分解方法要盡量簡(jiǎn)便，易操作，經(jīng)濟(jì)、迅速、安全，盡量減少對(duì)環(huán)境的污染； ④ 便于成批處理試樣。
要設(shè)計(jì)出符合這些條件的樣品處理方法，必須深入了解： a）被測(cè)元素及其化合物的物理化學(xué)性質(zhì)； b）被測(cè)元素在樣品中的含量范圍、賦存形態(tài)； c）樣品基體組成和性質(zhì)； d）采用的最終的測(cè)試方法和技術(shù)。 以國(guó)內(nèi)外測(cè)定As、Se和Hg所用樣品各種處理方法為例 國(guó)內(nèi)外測(cè)定各種樣品中As、Se和Hg，所采用的樣品處理方法大致分為三類： 1）濕法酸/堿分解； 2）密閉體系燃燒法（氧彈燃燒法）； 3）燒結(jié)（半熔）法。
在對(duì)煤中的微量元素進(jìn)行定性定量檢測(cè)的過(guò)程中，樣品的前處理往往比檢測(cè)技術(shù)本身還重要。尤其是對(duì)于各種原子光譜技術(shù)，一般必需制成液體樣品進(jìn)樣或液體進(jìn)樣時(shí)才能達(dá)到較高的準(zhǔn)確度。
為保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在使組成復(fù)雜的煤樣品充分溶解的同時(shí)，又要避免待檢測(cè)元素易揮發(fā)的單質(zhì)或化合物形式的損失。目前國(guó)內(nèi)外還有以下幾種方法： （1）封溶坩堝直接消解。
該方法系采用密閉容器，用混酸直接分解樣品，同時(shí)使用微波爐等加熱消解。具有稱樣量少、溶解效率高、操作簡(jiǎn)單、安全，便于控制、避免揮發(fā)的優(yōu)點(diǎn)；但直接分解法不可避免地有分解不完全的缺點(diǎn)。
檢測(cè)燃燒后的煤灰或煤抽提液樣品中的微量元素時(shí)常用這種方法。 （2）低溫灰化法。
采用等離子體技術(shù)在150℃左右使樣品灰化，再在聚四氟乙烯容器中用混酸分解。該方法是目前公認(rèn)的較好的預(yù)處理技術(shù)，但也有設(shè)備運(yùn)行成本高、耗時(shí)長(zhǎng)等缺點(diǎn)。
濕法酸分解 測(cè)定地質(zhì)樣品，常采用HNO3-HF-HClO4體系進(jìn)行酸溶，用該法分解樣品時(shí)，若加熱強(qiáng)度稍大，蒸發(fā)過(guò)干，則樣品中的部分Se會(huì)揮發(fā)損失。原因可能是樣品被酸分解生成的Se(ClO4)2可分解為HCl和SeO2，這兩種化合物可以反應(yīng)生成在較低溫度下可升華的SeCl2。
據(jù)資料介紹，當(dāng)處理樣品時(shí)，蒸發(fā)至干，樣品中Se可損失40%左右。因此，用該法分解試樣，必須小心掌握加熱溫度和時(shí)間，蒸到1~2mL透明溶液時(shí)，即應(yīng)停止加熱。
還有采用 HNO3-H2SO4體系酸溶以及HNO3-HClO4體系分解。濕法分解操作手續(xù)比較繁雜，且伴隨酸霧揮發(fā)到大氣，對(duì)環(huán)境保護(hù)不利。
另外，對(duì)煤而言，由于煤中含有的大量有機(jī)物質(zhì)，給酸分解帶來(lái)不便。 氧彈燃燒法 該法是將煤樣置于充滿高壓氧的不銹鋼彈筒內(nèi)，通電點(diǎn)燃煤樣，煤中有機(jī)質(zhì)充分燃燒，無(wú)機(jī)礦物質(zhì)也發(fā)生氧化、分解等反應(yīng)；煤中Se元素轉(zhuǎn)化為氧化物，再以氣態(tài)形式被溶解到彈筒內(nèi)的吸收液（水或稀堿）中。
國(guó)外有的實(shí)驗(yàn)室采用此法測(cè)煤中Se。其優(yōu)點(diǎn)是樣品處理除氧外，不引入其它試劑，減少了引入干擾元素的機(jī)會(huì)。
缺點(diǎn)是對(duì)高灰煤可能分解不完全（不能完全燃燒），可導(dǎo)致分析結(jié)果偏低；操作較麻煩，處理樣品效率較低；不利于成批分解樣品。 燒結(jié)（半熔）法 該法利用艾氏劑與試樣混合均勻，加熱灼燒，使煤中As、Se被氧化為氧化物，繼而與Na2CO3、MgO反應(yīng)形成砷酸鹽和硒酸鹽。
然后用HCl 溶解灼燒物， As、Se以離子形式轉(zhuǎn)入溶液。以煤中為例，反應(yīng)方程式為： 該法優(yōu)點(diǎn)是操作方便易行，便于成批處理分解樣品，只要正確控制灼燒條件，被測(cè)元素可定量轉(zhuǎn)化。
考慮到目前煤中其它元素分析標(biāo)準(zhǔn)中，有多種采用艾氏劑半熔分解煤樣的方法，分析人員易于接受，工作效率較高；國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)也采用艾氏劑半熔法處理樣品。通過(guò)對(duì)多種處理方法的比較，本試驗(yàn)采用半熔法處理樣品。
為使被測(cè)元素從灼燒后的試樣中轉(zhuǎn)入溶液，須用合適的酸將灼燒物溶解。為此，還要就酸的種類及加酸方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
酸的種類 使用不同的酸來(lái)處理樣品對(duì)結(jié)果有影響，因此試驗(yàn)考察了HCl、H2SO4和HNO3在處理灼燒物的溶解情況以及對(duì)測(cè)定的影響。 H2SO4：試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)用H2SO4溶解灼燒物會(huì)導(dǎo)致CaSO4沉淀，另外H2SO4中含As、Se較高，導(dǎo)致空白過(guò)高，若預(yù)先除去，又增加了實(shí)驗(yàn)工作量，因此，不宜選擇H2SO4作為溶解用酸。
HNO3：試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HNO3溶樣時(shí)，原子吸收信號(hào)比HCl介質(zhì)低，其原因可能是HNO3作為氧化劑與樣品中還原物質(zhì)反應(yīng)，形成亞硝酸，NO2-對(duì)Se的氫化物形成有抑制作用。國(guó)外有的實(shí)驗(yàn)室采用HNO3作介質(zhì)進(jìn)行Se的氫化物發(fā)生原子吸收測(cè)定，以降低靈敏度為代價(jià)，換取較好的穩(wěn)定性。
HCl：使用HCl溶解灼燒物是國(guó)內(nèi)外普遍采用的方法。氯化物大都為易溶鹽，HCl有還原性，是將Se6+還原為Se4+的還原劑，HCl中的 As、Se含量很少，試劑空白低，對(duì)測(cè)定有利，本法采用HCl溶解灼燒物。
6.樣品前處理的方法
第一法 薄層色譜法 1 原理 樣品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸。
將樣品提取液濃縮，點(diǎn)于聚酰胺薄層板上， 展開。顯色后，根據(jù)薄層板上山梨酸、苯甲酸的比移值，與標(biāo)準(zhǔn)比較定性，并可進(jìn)行概略 定量。
2 試劑 2.1 異丙醇。 2.2 正丁醇。
2.3 石油醚：沸程：30~60℃。 2.4 乙醚： 不含過(guò)氧化物。
2.5 氨水。 2.6 6N鹽酸： 取100mL鹽酸，加水稀釋至200mL。
2.7 無(wú)水乙醇。 2.8 聚酰胺粉：200目。
2.9 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.2000g山梨酸，用少量乙醇溶解后移入100ml容量瓶中 并稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于2mg山梨酸。 2.10 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.2000g苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100ml容量瓶中， 并稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于2mg苯甲酸。
2.11 展開劑 2.11.1 正丁醇-氨水-無(wú)水乙醇（7:1:2）。 2.11.2 異丙醇-氨水-無(wú)水乙醇（7:1:2）。
2.12 顯色劑：0.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液，用0.1N氫氧化鈉溶液調(diào)至pH=8。 2.13 4%氯化鈉酸性溶液：于4%氯化鈉溶液中加少量6N鹽酸酸化。
3 儀器 3.1 吹風(fēng)機(jī)。 3.2 層析缸。
3.3 玻璃板：10*18cm。 3.4 微量注射器：10μL,100μL。
3.5 噴霧器。 4 操作方法 4.1 樣品提取： 稱取2.5g事先混合均勻的樣品，置于25ml帶塞量筒中，加0.5ml 6N鹽酸酸化，用15、10ml乙醚提取兩次，每次振搖1min，將上層醚提取液吸入另一個(gè)25ml帶塞量筒中，合并乙 醚提取液。
用3ml4%氯化鈉酸性溶液洗滌兩次，靜止15min，用滴管將乙醚層通過(guò)無(wú)水硫 酸鈉濾入25ml容量瓶中。加乙醚至刻度，混勻。
吸取10.0ml乙醚提取液分兩次置于10ml帶 塞離心管中，在約40℃的水浴上揮干， 加入0.10ml乙醇溶解殘?jiān)瑐溆谩?4.2 測(cè)定 4.2.1 聚酰胺粉板的制備：稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約15ml水，研磨 3~5min，立即倒入涂布器內(nèi)制成10*18cm、厚度0.3mm的薄層板兩塊，于室溫干燥后，于 80℃干燥1h，取出，置于干燥器中保存。
4.2.2 點(diǎn)樣：在薄層板下端2cm的基線上，用微量注射器點(diǎn)1μL、2μl樣品液，同時(shí)各點(diǎn) 1μl、2μl山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。 4.2.3 展開與顯色：將點(diǎn)樣后的薄層板放入預(yù)先盛有展開劑（2.11.1或2.11.2）的展開槽 內(nèi)，展開槽周圍貼有濾紙，待溶劑前沿上展至10cm，取出揮干，噴顯色劑，斑點(diǎn)成黃色， 背景為藍(lán)色。
樣品中所含山梨酸、苯甲酸的量與標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)比較定量（山梨酸、苯甲酸的比 移值依次為0.82,0.73）。 4.2.4 計(jì)算： A1 * 1000 X1 = ─────────────。
.（1） m1 * 10/25 *V2/V1*1000 式中：X1—─樣品中山梨酸（苯甲酸）的含量，g/kg; A1—─測(cè)定用樣品液中山梨酸（苯甲酸）的含量，mg; m1——樣品質(zhì)量，g; V1——加入乙醇的體積，mL; V2──測(cè)定時(shí)點(diǎn)樣的體積，mL; 10——測(cè)定時(shí)吸取乙醚提取液的體積，mL; 25——樣品乙醚提取液總體積，mL。 注：本方法還可以同時(shí)測(cè)定果醬、果汁中的糖精。
第二法 氣相色譜法 5 原理 樣品酸化后，山梨酸、苯甲酸用乙醚提取濃縮后，用附氫火焰離子化檢測(cè)器的氣相色 譜儀進(jìn)行分離測(cè)定，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。 6 試劑 6.1 乙醚。
6.2 石油醚：沸程30~60℃。 6.3 鹽酸。
6.4 無(wú)水硫酸鈉。 6.5 山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液： 精密稱取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100ml容量瓶 中，用石油醚-乙醚（3:1）混合溶劑溶解后并稀釋至刻度。
此溶液每毫升相當(dāng)于2mg山梨 酸或苯甲酸。 6.6 山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取適量的山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，以石油醚-乙醚 （3:1）混合溶劑稀釋至每毫升相當(dāng)于50、100、150、200、25Oμg山梨酸或苯甲酸。
7 儀器 氣相色譜儀：具氫火焰離子化檢測(cè)器。 8 操作方法 8.1 樣品提取 按4.1自“稱取2.5g”至“加乙醚至刻度”依法操作。
準(zhǔn)確吸取5mL乙醚提取液于5mL 帶塞刻度試管中，置40℃水浴上揮干，加入2ml石油醚-乙醚（3:1）混合溶劑溶解殘?jiān)?，?用。 8.2 色譜條件 8.2.1 色譜柱：玻璃柱，內(nèi)徑3mm，長(zhǎng)2m，內(nèi)裝涂以5%DEGS+1%H3PO4固定液的60~80目 Chromosorb W AW。
8.2.2 氣流速度： 載氣，氮?dú)猓?0ml/min（氮?dú)夂涂諝狻錃庵劝锤鲀x器型號(hào)不同選擇 各自的最佳比例條件。） 8.2.3 溫度：進(jìn)樣口 230℃；檢測(cè)器230℃；柱溫170℃。
8.3 測(cè)定 進(jìn)樣2μL標(biāo)準(zhǔn)系列中各濃度標(biāo)準(zhǔn)使用液于氣相色譜儀中，可測(cè)得不同濃度山梨酸，苯 甲酸的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰高值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)進(jìn)樣2μL樣 品溶液，測(cè)得峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。
8.4 計(jì)算 A3 * 1000 X2 = ─────────────。
（2） m2*5/25*V4/V3*1000 式中：X2──樣品中山梨酸或苯甲酸的含量，g/kg; A3——測(cè)定用樣品液中山梨酸或苯甲酸的含量，μg; V3——加入石油醚—乙醚（3:1）混合溶劑的體積，mL; V4─—測(cè)定時(shí)進(jìn)樣的體積，μL; m2──樣品的質(zhì)量，g; 5─—測(cè)定時(shí)吸取乙醚提取液的體積，mL; 25──樣品乙醚提取液的總體積，mL。 由測(cè)得苯甲酸的量乘以1.18，即為樣品中苯甲酸鈉的含量。
/biaozhun/84.htm 2.山梨酸、苯甲酸的氣相色譜測(cè)定原理： 樣品經(jīng)酸化后，用乙醚提取山梨酸和苯甲酸，再用帶氫火焰離子化檢測(cè)。
