分光光度法操作(分光光度計(jì)使用中的注意事項(xiàng))
1.分光光度計(jì)使用中的注意事項(xiàng)
使用中的注意事項(xiàng)：
1、該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。
2、熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
3、使用本儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。
3、在儀器尚未接通電源時(shí)，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。
擴(kuò)展資料
儀器特點(diǎn)：
1、獨(dú)特的長(zhǎng)光程光路設(shè)計(jì)，使儀器分辨率更高，尤其適合微量測(cè)試 強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理功能，使測(cè)試結(jié)果能得到充分的應(yīng)用，用戶編輯更為簡(jiǎn)單快捷。
2、采用懸架式光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)，整體光路獨(dú)立固定在16mm厚的鋁制無變形基座上，底板的變形和外界的震動(dòng)對(duì)光學(xué)系統(tǒng)不產(chǎn)生任何影響，從而大大提高了儀器的穩(wěn)定性和可靠性。
3、采用同步正弦機(jī)構(gòu)，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度高，重復(fù)性好。
參考資料來源：搜狗百科——分光光度計(jì)
2.分光光度計(jì)使用中的注意事項(xiàng)
分光光度計(jì)是目前化驗(yàn)室中使用比較廣泛的一種分析儀器，其測(cè)定原理是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收特性，以較純的單色光作為入射光，測(cè)定物質(zhì)對(duì)光的吸收，從而確定溶液中物質(zhì)的含量。其特點(diǎn)是靈敏度高；準(zhǔn)確度高；測(cè)量范圍廣；在一定條件下，可同時(shí)測(cè)定水樣中兩種或兩種以上的物質(zhì)組分含量等。
分光光度計(jì)按其波長(zhǎng)范圍可分為可見分光光度計(jì)（工作范圍360~800nm）、紫外-可見分光光度計(jì)（工作范圍200~1000nm）和紅外分光光度計(jì)（工作范圍760~400000nm）等。
在日常使用及維護(hù)當(dāng)中應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：
第一，在使用儀器前，必須仔細(xì)閱讀其使用說明書。
第二，若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng)，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新調(diào)零及滿度后，再測(cè)量。
第三，指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。
第四，操作人員不應(yīng)輕易觸動(dòng)燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
第五，放大器靈敏度換擋后，必須重新調(diào)零。
第六，比色皿使用時(shí)要注意其方向性，并應(yīng)配套使用，以延長(zhǎng)其使用壽命。新的比色皿使用前必須進(jìn)行配對(duì)選擇，測(cè)定其相對(duì)厚度，互相偏差不得超過2%透光度，否則影響測(cè)定結(jié)果。使用完畢后，請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈（測(cè)定有色溶液后，應(yīng)先用相應(yīng)的溶劑或（1+3）的硝酸進(jìn)行浸泡，浸泡時(shí)間不宜過長(zhǎng)，再用蒸餾水沖洗干凈），并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
第七，比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。首先，應(yīng)保證比色皿不傾斜。因?yàn)樯栽S傾斜，就會(huì)使參比樣品與待測(cè)樣品的吸收光徑長(zhǎng)度不一致，還有可能使入射光不能全部通過樣品池，導(dǎo)致測(cè)試準(zhǔn)確度不符合要求。其次，應(yīng)保證每次測(cè)試時(shí)，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測(cè)試值的重復(fù)性或準(zhǔn)確度。
第八，干燥劑的使用問題。干燥劑失效將會(huì)導(dǎo)致以下問題：①數(shù)顯不穩(wěn)，無法調(diào)零或滿度。②反射鏡發(fā)霉或沾污，影響光效率，雜散光增加。因此分光光度計(jì)應(yīng)放置在遠(yuǎn)離水池等濕度大的地方，并且干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤。
第九，分光光度計(jì)的放置位置應(yīng)符合以下條件：避免陽光直射；避免強(qiáng)電場(chǎng)；避免與較大功率的電器設(shè)備共電；避開腐蝕性氣體等。
3.分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行含量測(cè)定的操作步驟和注意事項(xiàng)
一，在測(cè)量方法上
如果是標(biāo)準(zhǔn)曲線的基體和樣品的基體大致相同的情況，用標(biāo)準(zhǔn)曲線法：
首先配制一系列濃度的所測(cè)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用分光光度計(jì)測(cè)的吸光度A值，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線（最好估測(cè)所測(cè)物質(zhì)的濃度，使標(biāo)準(zhǔn)曲線包含這個(gè)濃度），再測(cè)出樣品的A值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線求出其濃度。
如果被測(cè)溶液成分復(fù)雜未知，就用標(biāo)準(zhǔn)加入法：
在數(shù)份樣品溶液中加入不等量的標(biāo)準(zhǔn)溶液；然后按照繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的步驟測(cè)定吸光度繪制吸光度-加入濃度曲線用外推法求得樣品溶液的濃度。首先要大概知道樣品中待測(cè)物的含量；然后確定加入的C標(biāo)準(zhǔn)的量要和Cx相當(dāng)；再就是線性方程一定要過坐標(biāo)原點(diǎn)，即空白含量的吸光度值要為零，否則，你的線性方程為A=KC+B，此時(shí)還應(yīng)該要作A=K(Cx+2C標(biāo)準(zhǔn))、A=K(Cx+3C標(biāo)準(zhǔn))，然后才能得出Cx。（選用這種方法需保證樣品溶液足夠量）
二，在紫外可見分光光度計(jì)使用上
首先確定要使用的分光光度計(jì)型號(hào)，我使用的為為雙光束的T6型紫外可見分光光度計(jì)，使用時(shí)注意，開機(jī)初始化時(shí)不能打開儀器蓋子，比色皿不能放在槽內(nèi)，可以先對(duì)所測(cè)樣品的任意一濃度在儀器波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，找出最大吸收波長(zhǎng)，然后再最大波長(zhǎng)下進(jìn)行定量測(cè)定，每個(gè)溶液測(cè)定時(shí)先用該溶液潤(rùn)洗比色皿2-3次，倒入比色皿中液體約2/3，然后用擦鏡紙擦干比色皿外壁，標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)量時(shí)，需用除含待測(cè)成分外的與樣品一致的溶液校零（最重要的是在使用儀器前要了解具體儀器使用方法，可閱讀說明書，操作和注意事項(xiàng)都有介紹）
4.分光光度計(jì)的正確操作方法是什么
分光光度計(jì)正確操作使用方法：1.接通電源，打開儀器開關(guān)，掀開樣品室暗箱蓋，預(yù)熱10分鐘。
2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔（若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時(shí)，需選用較高檔。） 3.根據(jù)所需波長(zhǎng)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)選擇鈕。
4.將空白液及測(cè)定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使空白管對(duì)準(zhǔn)光路。 5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤指針指向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測(cè)定管的光密度值，并記錄。 7.比色完畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。
5.分光光度計(jì)使用方法及細(xì)節(jié)
首先要問樓主用的是哪個(gè)廠家什么型號(hào)的分光光度計(jì)。
一般來說調(diào)0和調(diào)100時(shí)為了預(yù)防不小心的誤操作，建議樓主這時(shí)候都不要放置樣品。調(diào)零的意思是當(dāng)不讓光進(jìn)入接收器時(shí)調(diào)整儀器的整體零位。調(diào)100是讓光不經(jīng)過樣品而直接進(jìn)入接收器時(shí)調(diào)節(jié)。
在這里順便給樓主一點(diǎn)建議：
1、儀器最好先預(yù)熱一段時(shí)間后再進(jìn)行測(cè)量操作
2、定量分析的時(shí)候要注意樣品線性的濃度范圍，如果濃度太高或者太低都會(huì)影響到數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度。
3、如果樣品對(duì)光敏感，則測(cè)量時(shí)間要注意迅速有效。
