2010版的血液凈化標準操作規程中六、透析機消毒
(一) 透析機器外部消毒
1、每次透析結束后,如沒(méi)有肉眼可見(jiàn)的污染時(shí)應對透析機外部進(jìn)行初步的
消毒,采用500mg/L的含氯消毒劑擦拭消毒。?
2、如果血液污染到透析機,應立即用1500 mg/L濃度的含氯消毒劑的一次性
布擦拭去掉血跡后,再用500mg/L濃度的含氯消毒劑擦拭消毒機器外部。
而2012年的《醫療機構消毒技術(shù)規范》13.3.1的要求是遇明顯污染隨時(shí)去污與消毒,當收到明顯污染時(shí),先用吸濕材料去除可見(jiàn)污染物,然后再清潔與消毒。
1.干熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌:灼燒主要是用于接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌,火焰滅菌通常用于無(wú)菌操作中,將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過(guò)火焰數次,利用火焰對管口等進(jìn)行滅菌,阻止管口污染,作為無(wú)菌操作過(guò)程中的輔助滅菌手段。
1.2干烤滅菌:利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后,均可在烤箱內干熱滅菌。通常加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌。但不宜超過(guò)170℃,玻璃量具易變形。降溫過(guò)速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時(shí)裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利于熱空氣流動(dòng),過(guò)密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底。
2.濕熱滅菌法
通過(guò)加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,穿透力強,溫度高,滅菌效果最好。
注意事項:1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣。有冷空氣存在時(shí),在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時(shí),為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除。否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底。
3.紫外線(xiàn) 殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制。
紫外線(xiàn)消毒效果與紫外線(xiàn)強度、照射時(shí)間、溫度與濕度等因素有關(guān)。
我國規定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。一般紫外燈使用超過(guò)100h,則應更換。表面有塵土,降低滅菌效果。紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜。
消毒滅菌的方法 (一)物理消毒滅菌法 利用物理因子殺滅微生物的方法.包括熱力消毒滅菌、輻射消毒、空氣凈化、超聲波消毒和微波消毒等。
1.熱力消毒滅菌 高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和酶變性或凝固(結構改變導致功能喪失),新陳代謝受到障礙而死亡,從而達到消毒與滅菌的目的.在消毒中,熱可分為濕熱與干熱兩大類(lèi)。 干熱是指相對濕度在20%以下的高熱,干熱消毒滅菌是由空氣導熱,傳熱效果較慢.一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時(shí)可以殺死,芽胞需160-170℃經(jīng)2小時(shí)方可殺死。
(1)燃燒法 是一種簡(jiǎn)單、迅速、徹底的滅菌方法,因對物品的破壞性大,故應用范圍有限。 燒灼法:一些耐高溫的實(shí)驗器械(金屬、搪瓷類(lèi)),在急用或無(wú)條件用其他方法消毒時(shí)可采用此法.將器械放在火焰上燒灼1-2分鐘.若為搪瓷容器,可倒少量95%乙醇,慢慢轉動(dòng)容器,使乙醇分布均勻,點(diǎn)火燃燒至熄滅約1-2分鐘.采集作細菌培養的標本時(shí),在留取標本前后(即啟蓋后,閉蓋前)都應將試管(瓶)口和蓋子置于火焰上燒灼,來(lái)回旋轉2-3次。
燃燒時(shí)要注意安全,須遠離易燃易爆物品,如氧氣、汽油、乙醚等.燃燒過(guò)程不得添加乙醇,以免引起火焰上竄而致灼傷或火災.銳利刀剪為保護刀鋒,不宜用燃燒滅菌法。 焚燒:某些特殊感染,如破傷風(fēng)、氣性壞疽、綠膿桿菌感染的敷料,以及其它已污染且無(wú)保留價(jià)值的物品,如污紙、垃圾等,應放入焚燒爐內焚燒,使之炭化。
(2)干烤法 電熱烤箱:利用烤箱的熱空氣消毒滅菌。烤箱通電加熱后的空氣在一定空間不斷對流,產(chǎn)生均一效應的熱空氣直接穿透物體.一般繁殖體在干熱80-100℃中經(jīng)1小時(shí)可以殺死,芽胞、病毒需160-170℃經(jīng)2小時(shí)方可殺死.熱空氣消毒滅菌法適用于玻璃器皿、瓷器以及明膠海棉、液體石臘、各種粉劑、軟膏等.滅菌后待箱內溫度降至50-40℃以下才能開(kāi)啟柜門(mén),以防炸裂。
微波消毒:微波是一種高頻電磁波,其殺菌的作用原理,一為熱效應,所及之處產(chǎn)生分子內部劇烈運動(dòng),使物體里外濕度迅速升高;一為綜合效應,諸如化學(xué)效應、電磁共振效應和場(chǎng)致力效應。目前已廣泛應用于食品、藥品的消毒,用微波滅菌手術(shù)器械包、微生物實(shí)驗室用品等亦有報告.若物品先經(jīng)1%過(guò)氧乙酸或0.5%新潔爾滅濕化處理后,可起協(xié)同殺菌作用,照射2分鐘,可使殺芽胞率由98.81%增加到99.98%-99.99%。
微波對人體有一定危害性,其熱效應可損傷眼睛晶狀體等,長(cháng)時(shí)間照射還可致神經(jīng)功能紊亂.使用時(shí)可設置不透微波的金屬屏障或戴特制防護眼境等。 濕熱消毒滅菌 由空氣和水蒸氣導熱,傳熱快,穿透力強,濕熱滅菌法比干熱滅菌法所需溫度低、時(shí)間短。
(1)煮沸法 將水煮沸至100℃,保持5-10分鐘可殺滅繁殖體,保持1-3小時(shí)可殺滅芽胞.在水中加入碳酸氫鈉至1%-2%濃度時(shí),沸點(diǎn)可達105℃,能增強殺菌作用,還可去污防銹.在高原地區氣壓低、沸點(diǎn)低的情況下,要延長(cháng)消毒時(shí)間(海拔每增高300m,需延長(cháng)消毒時(shí)間2分鐘).此法適用于不怕潮濕耐高溫的搪瓷、金屬、玻璃、橡膠類(lèi)物品。 煮沸前物品涮洗干凈,打開(kāi)軸節或蓋子,將其全部浸入水中.大小相同的碗、盆等均不能重疊,以確保物品各面與水接觸.銳利、細小、易損物品用紗布包裹,以免撞擊或散落.玻璃、搪瓷類(lèi)放入冷水或溫水中煮;金屬、橡膠類(lèi)則待水沸后放入.消毒時(shí)間均從水沸后開(kāi)始計時(shí).若中途再加入物品,則重新計時(shí),消毒后及時(shí)取出物品,保持其無(wú)菌狀態(tài)。
經(jīng)煮沸滅菌的物品.“無(wú)菌”有效期不超過(guò)6小時(shí)。 (2)高壓蒸汽滅菌法 高壓蒸汽滅菌器裝置嚴密,輸入蒸汽不外逸,溫度隨蒸汽壓力增高而升高,當壓力增至103-206kPa時(shí),濕度可達121.3-132℃.高壓蒸汽滅菌法就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌,為目前可靠而有效的滅菌方法.適用于耐高溫、高壓,不怕潮濕的物品,如敷料、手術(shù)器械、藥品、細菌培養基等。
潛熱是指當lg100℃的水蒸汽變成lg100℃水時(shí),釋放出2255.2J的熱量。 高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵問(wèn)題是為熱的傳導提供良好條件,而其中最重要的是使冷空氣從滅菌器中順利排出.因為冷空氣導熱性差,阻礙蒸汽接觸欲滅菌物品,并且還可減低蒸汽分壓使之不能達到應有的溫度。
手提式高壓蒸汽滅菌器:為金屬圓筒,分為二層,隔層內盛水,有蓋,可以旋緊,加熱后產(chǎn)生蒸汽。鍋外有壓力表,當蒸汽壓力升高時(shí),溫度也隨之相應升高。
該滅菌器體積小,可自發(fā)蒸汽,便于攜帶。 操作方法如下:在滅菌器中盛水3000ml;將擬滅菌的物品隨同盛裝的桶放入滅菌器內;將蓋子上的排氣軟管插于鋁桶內壁的的方管中;蓋好蓋子,擰緊元寶螺絲,勿使漏氣;鍋下加熱,打開(kāi)排氣活門(mén),放出冷空氣(一般在水沸后排氣10-15分鐘左右),關(guān)閉放氣活門(mén),使壓力逐漸上升至103kPa,溫度達121.3℃,維持20分鐘后,排氣至“0”時(shí),慢慢打開(kāi)蓋子.如果突然開(kāi)蓋,冷空氣大量進(jìn)入,蒸汽凝成水滴,使物品潮濕,且玻璃類(lèi)易發(fā)生爆裂。
臥式高壓蒸汽滅菌器:其結構原理同手提式高壓蒸汽滅菌器,因其體積大,一次可滅菌大量物品.操作人員須經(jīng)專(zhuān)業(yè)培訓,再關(guān)閉放氣開(kāi)關(guān),待夾層壓力表達到滅菌所需壓力時(shí)(約10分鐘后),將蒸汽控制閥移至“消毒”位置,使蒸汽。
(1)加熱滅菌法 利用高溫來(lái)殺死微生物(超過(guò)最高生長(cháng)溫度)的方法。
加熱滅菌的原理:當高溫作用于微生物時(shí),首先引起細胞內生理生化反應速率加快,機體內對溫度敏感的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸等,隨著(zhù)溫度的增高而遭受不可逆的破壞,盡而導致細胞內原生質(zhì)體的變化、酶結構的破壞,從而使細胞失去了生活機能上的協(xié)調,停止了生長(cháng)發(fā)育。隨著(zhù)高溫的繼續作用,細胞內原生質(zhì)便發(fā)生凝固,酶結構完全破壞,活動(dòng)消失,生化反應停止,滲透交換等新陳代謝活動(dòng)消失,細胞死亡。
加熱滅菌可分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類(lèi)。 1)干熱滅菌 利用灼燒或干熱空氣滅菌而沒(méi)有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱(chēng)為干熱滅菌法。
由于干熱滅菌使用方便,方法簡(jiǎn)單,故在生產(chǎn)上廣泛應用。如火焰滅菌法:直接利用火焰把微生物燒死,故又稱(chēng)焚燒滅菌法。
采用此法滅菌既徹底又迅速,但只適用于金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法:即在電熱恒溫干燥箱中利用干熱空氣來(lái)滅菌。
2)濕熱滅菌 即利用蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。
①高壓蒸汽滅菌 由于高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度,能大大縮短滅菌時(shí)間,提高工作效率,加之蛋白質(zhì)在濕熱條件下容易變性,在熱蒸汽條件下,細菌的芽孢在120℃,經(jīng)20~30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大,不易被穿透時(shí),可將壓力增加到0.152兆帕,延長(cháng)至1~2小時(shí)。
在高壓蒸汽滅菌中,滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高(圖2-6)。 圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋 在使用高壓滅菌鍋時(shí),要完全排出鍋內的空氣而以飽和蒸汽代之。
如果空氣不排除干凈,則鍋內溫度將低于同樣壓力下由純飽和蒸汽產(chǎn)生的溫度,影響滅菌效果。 此法適用于各種耐熱物品的滅菌,如一般培養基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。
所采用的蒸汽壓力與時(shí)間,應根據待滅菌物品的性質(zhì)、體積與容器類(lèi)型等決定。 ②常壓蒸汽滅菌 這是采用自然壓力、100℃蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。
它設備簡(jiǎn)單、成本低,當前使用最廣泛。只要砌一個(gè)爐灶,買(mǎi)1~2只大鍋,上面用磚和水泥砌成,也可用大鐵桶、木桶等,體積大小可自行決定,但不宜過(guò)大,以裝800~1500瓶為好。
設計常壓灶時(shí)應注意的問(wèn)題:大小根據生產(chǎn)規模來(lái)定,灶頂部最好制成拱圓形,這樣冷凝水可沿灶的內壁下流而不會(huì )打濕棉塞;灶倉內要有層架結構,以便分層裝入滅菌物;灶上應安裝溫度計,可隨時(shí)觀(guān)察灶內溫度的變化;因滅菌時(shí)間長(cháng),鍋內水不夠蒸發(fā),故容量大的灶要安裝加水裝置;灶倉的密閉程度要盡可能高,這樣既提高滅菌效果,又節省燃料。菇農在生產(chǎn)中還常用一種小型蒸汽發(fā)生裝置,引出蒸汽后直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進(jìn)行常壓滅菌。
這種方法不用建灶,簡(jiǎn)便省工(圖2-7)。常壓滅菌一般水燒開(kāi)后保持8~10小時(shí),悶一夜即可。
圖2-7 簡(jiǎn)易常壓滅菌法 ③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內,100℃處理1小時(shí)左右,殺死微生物的營(yíng)養細胞,讓其冷卻至30℃左右,此時(shí)芽胞會(huì )萌發(fā),再以同樣方法加熱處理,反復3次,可達到滅菌目的。
該方法可用于不耐高溫的藥品、營(yíng)養物、特殊培養基的滅菌。 ④低溫巴氏滅菌法 即在60~70℃下,經(jīng)一定時(shí)間,殺死有害微生物的方法。
適應于不耐高溫的物品消毒。有些培養基,在高溫下遭到破壞,用此法既可殺死致病微生物的營(yíng)養體,又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。
食用菌生產(chǎn)中培養料堆積發(fā)酵工藝,就是利用這個(gè)原理殺死其中的病蟲(chóng)、雜菌。 (2)過(guò)濾除菌法 又分液體過(guò)濾和空氣過(guò)濾兩種,就是采用機械的方法,設計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過(guò)濾器,通過(guò)機械過(guò)濾,只讓液體培養基或空氣從篩孔流出,各種微生物菌體則留在篩子上,從而達到除菌的目的。
這種方法適用于對熱不穩定的體積小的液體培養基(如動(dòng)物血清、蛋白質(zhì)、酶、維生素等)及氣體的滅菌。超凈工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過(guò)過(guò)濾滅菌形成無(wú)菌空氣,從風(fēng)洞中吹出,來(lái)造成工作臺范圍的無(wú)菌狀態(tài)。
過(guò)濾滅菌的最大優(yōu)點(diǎn)是不破壞培養基中各種物質(zhì)的化學(xué)成分。常用的過(guò)濾器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的,也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜制成的。
(3)輻射滅菌法 利用輻射產(chǎn)生的能量進(jìn)行殺菌的方法稱(chēng)輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種,α-射線(xiàn)、β-射線(xiàn)、γ-射線(xiàn)、X-射線(xiàn)、中子和質(zhì)子、微波等屬電離輻射,紫外線(xiàn)、臭氧、日光為非電離輻射。
1)紫外線(xiàn)滅菌 紫外線(xiàn)殺菌的原理是利用紫外線(xiàn)的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發(fā)生光化學(xué)反應,將細菌細胞質(zhì)誘導形成胸腺嘧啶雙聚體,從而抑制DNA的復制而發(fā)生變性、致死。
另一方面,空氣在紫外線(xiàn)照射下產(chǎn)生的臭氧(O3),也具有一定的殺菌作用。紫外線(xiàn)的有效作用距離為1.2~2.0米。
紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方,個(gè)數依房間大小而定,容1~2個(gè)人操作的接種室,安裝一個(gè)30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前,應將所需的器具一起放入接種室(箱)內,然后打開(kāi)紫外燈照射。
如果接種室體積較大,開(kāi)燈照射2小時(shí)。
血液透析機消毒是一項重要又嚴謹的工作,不規范的消毒無(wú)疑是更強化了污染。從血液透析機水路工作原理中不難看出,在血液透析過(guò)2113程中從新鮮透析液到廢液是單向通道。而在消毒過(guò)程中,消毒液是在水路中循環(huán)往復的5261,如果消毒液濃度不夠,或消毒時(shí)間不夠,有可能讓本來(lái)只有透析器下游有限的污染變成了血液透析機管路全面的污染。
常用消毒方法有化學(xué)消毒、熱化學(xué)消毒和熱沖洗三4102種。
1、化學(xué)消毒:常用的化學(xué)消毒劑是朗索次氯酸鈉和朗索過(guò)氧乙酸,要注意其對透析機內部管路的腐蝕性,推薦使用5%的次氯酸鈉。但是二者都沒(méi)有除鈣的作1653用,因此應參照廠(chǎng)家說(shuō)明書(shū)建議的頻率和除鈣液(一般為冰醋酸或檸檬酸)的濃度進(jìn)行清洗然后再消毒。
2、熱沖洗和熱化回學(xué)消毒:二者的區別只是血液透析機在加熱消毒的過(guò)程中是否吸入以檸答檬酸為主要原料的溶液。熱沖洗的加熱溫度至少要達到85℃,并持續20min以上在機器水路系統中循環(huán),然后進(jìn)行冷卻沖洗。采用熱化學(xué)消毒是省時(shí)省力,安全有效的方法。
化學(xué)消毒滅菌方法有:
1.浸泡法(immersion):將待消毒的物品浸沒(méi)在消毒溶液中的方法.按不同被消毒物品和消毒液的種類(lèi),確定消毒溶液濃度與浸泡時(shí)間.浸泡前將被消毒物品洗凈擦干,浸沒(méi)在消毒液內,注意打開(kāi)物品的軸節或套蓋,管腔內注滿(mǎn)消毒液.浸泡中途添加物品,需重新計時(shí).器械使用前用無(wú)菌生理鹽水沖凈,避免消毒劑刺激人體組織.
2.擦拭法(rubbing):是用化學(xué)消毒液擦拭被污染物體表面或進(jìn)行皮膚消毒的方法.選用易溶于水、穿透性強、無(wú)顯著(zhù)刺激性的消毒劑.
3.噴霧法(nebulization):用噴霧器將化學(xué)消毒劑均勻噴灑在空氣中和物體表面進(jìn)行消毒的方法.如墻壁、地面等的消毒.
4.熏蒸法(fumigation):是利用消毒藥品所產(chǎn)生的氣體進(jìn)行消毒的方法.如病室的空氣消毒.在消毒間或密閉的容器內,也可用熏蒸法對被污染的物品進(jìn)行消毒滅菌.臨床常用甲醛和環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行熏蒸消毒.
(1)加熱滅菌法利用高溫來(lái)殺死微生物(超過(guò)最高生長(cháng)溫度)的方法。
加熱滅菌的原理:當高溫作用于微生物時(shí),首先引起細胞內生理生化反應速率加快,機體內對溫度敏感的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸等,隨著(zhù)溫度的增高而遭受不可逆的破壞,盡而導致細胞內原生質(zhì)體的變化、酶結構的破壞,從而使細胞失去了生活機能上的協(xié)調,停止了生長(cháng)發(fā)育。隨著(zhù)高溫的繼續作用,細胞內原生質(zhì)便發(fā)生凝固,酶結構完全破壞,活動(dòng)消失,生化反應停止,滲透交換等新陳代謝活動(dòng)消失,細胞死亡。
加熱滅菌可分干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類(lèi)。 1)干熱滅菌 利用灼燒或干熱空氣滅菌而沒(méi)有飽和水蒸氣參加的滅菌法稱(chēng)為干熱滅菌法。
由于干熱滅菌使用方便,方法簡(jiǎn)單,故在生產(chǎn)上廣泛應用。如火焰滅菌法:直接利用火焰把微生物燒死,故又稱(chēng)焚燒滅菌法。
采用此法滅菌既徹底又迅速,但只適用于金屬制的接種工具、試管口及污染物品等的處理。熱空氣滅菌法:即在電熱恒溫干燥箱中利用干熱空氣來(lái)滅菌。
2)濕熱滅菌 即利用蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。濕熱滅菌又分為高壓、常壓、間歇滅菌和巴氏滅菌4種。
①高壓蒸汽滅菌 由于高壓蒸汽具有較強的穿透力和較常壓高的溫度,能大大縮短滅菌時(shí)間,提高工作效率,加之蛋白質(zhì)在濕熱條件下容易變性,在熱蒸汽條件下,細菌的芽孢在120℃,經(jīng)20~30分鐘可全部被殺死。如滅菌材料體積較大,不易被穿透時(shí),可將壓力增加到0.152兆帕,延長(cháng)至1~2小時(shí)。
在高壓蒸汽滅菌中,滅菌溫度隨蒸汽壓力的增加而升高(圖2-6)。 圖2-6 高壓蒸汽滅菌鍋在使用高壓滅菌鍋時(shí),要完全排出鍋內的空氣而以飽和蒸汽代之。
如果空氣不排除干凈,則鍋內溫度將低于同樣壓力下由純飽和蒸汽產(chǎn)生的溫度,影響滅菌效果。 此法適用于各種耐熱物品的滅菌,如一般培養基、生理鹽水等各種溶液、玻璃器皿、工作服等。
所采用的蒸汽壓力與時(shí)間,應根據待滅菌物品的性質(zhì)、體積與容器類(lèi)型等決定。 ②常壓蒸汽滅菌 這是采用自然壓力、100℃蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。
它設備簡(jiǎn)單、成本低,當前使用最廣泛。只要砌一個(gè)爐灶,買(mǎi)1~2只大鍋,上面用磚和水泥砌成,也可用大鐵桶、木桶等,體積大小可自行決定,但不宜過(guò)大,以裝800~1500瓶為好。
設計常壓灶時(shí)應注意的問(wèn)題:大小根據生產(chǎn)規模來(lái)定,灶頂部最好制成拱圓形,這樣冷凝水可沿灶的內壁下流而不會(huì )打濕棉塞;灶倉內要有層架結構,以便分層裝入滅菌物;灶上應安裝溫度計,可隨時(shí)觀(guān)察灶內溫度的變化;因滅菌時(shí)間長(cháng),鍋內水不夠蒸發(fā),故容量大的灶要安裝加水裝置;灶倉的密閉程度要盡可能高,這樣既提高滅菌效果,又節省燃料。菇農在生產(chǎn)中還常用一種小型蒸汽發(fā)生裝置,引出蒸汽后直接通到下邊用木條塹起、四周用多層塑料布密封的菌袋堆中進(jìn)行常壓滅菌。
這種方法不用建灶,簡(jiǎn)便省工(圖2-7)。常壓滅菌一般水燒開(kāi)后保持8~10小時(shí),悶一夜即可。
圖2-7 簡(jiǎn)易常壓滅菌法③常壓間歇蒸汽滅菌法 這是利用常壓蒸汽反復幾次滅菌的方法。具體做法是將待滅菌物品放在鍋內,100℃處理1小時(shí)左右,殺死微生物的營(yíng)養細胞,讓其冷卻至30℃左右,此時(shí)芽胞會(huì )萌發(fā),再以同樣方法加熱處理,反復3次,可達到滅菌目的。
該方法可用于不耐高溫的藥品、營(yíng)養物、特殊培養基的滅菌。 ④低溫巴氏滅菌法 即在60~70℃下,經(jīng)一定時(shí)間,殺死有害微生物的方法。
適應于不耐高溫的物品消毒。有些培養基,在高溫下遭到破壞,用此法既可殺死致病微生物的營(yíng)養體,又能使培養基的成分不致受到嚴重破壞。
食用菌生產(chǎn)中培養料堆積發(fā)酵工藝,就是利用這個(gè)原理殺死其中的病蟲(chóng)、雜菌。 (2)過(guò)濾除菌法又分液體過(guò)濾和空氣過(guò)濾兩種,就是采用機械的方法,設計一種濾孔比細菌還小的篩子,做成各種過(guò)濾器,通過(guò)機械過(guò)濾,只讓液體培養基或空氣從篩孔流出,各種微生物菌體則留在篩子上,從而達到除菌的目的。
這種方法適用于對熱不穩定的體積小的液體培養基(如動(dòng)物血清、蛋白質(zhì)、酶、維生素等)及氣體的滅菌。超凈工作臺的工作原理就是將帶菌空氣通過(guò)過(guò)濾滅菌形成無(wú)菌空氣,從風(fēng)洞中吹出,來(lái)造成工作臺范圍的無(wú)菌狀態(tài)。
過(guò)濾滅菌的最大優(yōu)點(diǎn)是不破壞培養基中各種物質(zhì)的化學(xué)成分。常用的過(guò)濾器有用硅藻土制的、石棉制的、陶瓷土制的,也有用火棉膠、硝化纖維素濾膜制成的。
(3)輻射滅菌法利用輻射產(chǎn)生的能量進(jìn)行殺菌的方法稱(chēng)輻射滅菌。輻射可分電離輻射和非電離輻射兩種,α-射線(xiàn)、β-射線(xiàn)、γ-射線(xiàn)、X-射線(xiàn)、中子和質(zhì)子、微波等屬電離輻射,紫外線(xiàn)、臭氧、日光為非電離輻射。
1)紫外線(xiàn)滅菌 紫外線(xiàn)殺菌的原理是利用紫外線(xiàn)的輻射作用。用燈管直接照射細菌使其發(fā)生光化學(xué)反應,將細菌細胞質(zhì)誘導形成胸腺嘧啶雙聚體,從而抑制DNA的復制而發(fā)生變性、致死。
另一方面,空氣在紫外線(xiàn)照射下產(chǎn)生的臭氧(O3),也具有一定的殺菌作用。紫外線(xiàn)的有效作用距離為1.2~2.0米。
紫外燈一般懸吊在接種室或培養室的上方,個(gè)數依房間大小而定,容1~2個(gè)人操作的接種室,安裝一個(gè)30瓦的紫外燈就可以了。在每次接種前,應將所需的器具一起放入接種室(箱)內,然后打開(kāi)紫外燈照射。
如果接種室體積較大,開(kāi)燈照射2小時(shí)才能達到滅菌效果;如果。
聲明:本網(wǎng)站尊重并保護知識產(chǎn)權,根據《信息網(wǎng)絡(luò )傳播權保護條例》,如果我們轉載的作品侵犯了您的權利,請在一個(gè)月內通知我們,我們會(huì )及時(shí)刪除。
蜀ICP備2020033479號-4 Copyright ? 2016 學(xué)習?shū)B(niǎo). 頁(yè)面生成時(shí)間:4.108秒