核酸含量測定常用的方法(測定核酸含量的方法)
1.測定核酸含量的方法有哪些
核酸中的有機無(wú)機磷酸——→無(wú)機磷酸+鉬酸——→磷鉬酸+還原劑（抗壞血酸等）——→鉬蘭
鉬蘭的最大吸收波長(cháng)在660nm，在一定濃度范圍內，溶液的吸收值與無(wú)機磷的含量成正比。該法測得的是總磷量，需減去無(wú)機磷的含量才是核酸的含磷量。
（二）定糖法
核酸中的戊糖可在濃鹽酸或濃硫酸作用下脫水生成醛類(lèi)化合物，醛類(lèi)化合物可與某些成色劑縮合成有色化合物，可用比色法或分光光度法測定其溶液中的吸收值，在一定濃度范圍內，溶液的吸收值與核酸的含量成正比。
1、核糖的測定
生成的綠色化合物在λ=670nm處有最大的吸收值。
2、脫氧核糖的測定
DNA中的脫氧核糖可在濃硫酸作用下脫水生成ω-羥基-γ-酮戊酸，該化合物可與二苯胺生成蘭色化合物，在λ=595nm處有最大吸收值。
（三）紫外吸收法
根據核酸分子中的嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)在λ=260nm處有最大吸收值，可采用紫外分光光度法測定核酸的含量。
2.核酸含量測定的方法和原理都有哪些
核酸定量常用方法及原理如下： 1、光吸收法：核酸中堿基共軛結構在近紫外光波長(cháng)260nm處有最大吸收，吸收強度與核酸濃度成正比，因此可以用于核酸定量。
2、定P法：核酸中P含量約為9.5%，因此可以通過(guò)測定樣品中的有機P量來(lái)進(jìn)行核酸定量。核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質(zhì)之一。
核酸廣泛存在于所有動(dòng)植物細胞、微生物體內，生物體內的核酸常與蛋白質(zhì)結合形成核蛋白。不同的核酸，其化學(xué)組成、核苷酸排列順序等不同。
根據化學(xué)組成不同，核酸可分為核糖核酸（簡(jiǎn)稱(chēng)RNA）和脫氧核糖核酸（簡(jiǎn)稱(chēng)DNA）。
3.核酸含量的測定方法及原理都有哪些
核酸定量常用方法及原理如下： 1、光吸收法：核酸中堿基共軛結構在近紫外光波長(cháng)260nm處有最大吸收，吸收強度與核酸濃度成正比，因此可以用于核酸定量。
2、定P法：核酸中P含量約為9.5%，因此可以通過(guò)測定樣品中的有機P量來(lái)進(jìn)行核酸定量。核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的最基本物質(zhì)之一。
核酸廣泛存在于所有動(dòng)植物細胞、微生物體內，生物體內的核酸常與蛋白質(zhì)結合形成核蛋白。不同的核酸，其化學(xué)組成、核苷酸排列順序等不同。
根據化學(xué)組成不同，核酸可分為核糖核酸（簡(jiǎn)稱(chēng)RNA）和脫氧核糖核酸（簡(jiǎn)稱(chēng)DNA）。
4.核酸檢測方法有哪些
核酸檢測采用咽拭子檢測，有口咽拭子采樣和鼻咽拭子采樣兩種方式。
口咽拭子采樣就是在咽喉部位用棉簽涂擦，刷取咽喉部位上皮細胞的檢測。受檢測者只要放松心情，張口發(fā)出“啊——”的聲音就可以了，檢測過(guò)程并沒(méi)有創(chuàng )傷風(fēng)險，是非常安全的檢測。
檢測時(shí)可能會(huì )有惡心、想要嘔吐的不適感覺(jué)，不過(guò)這些不適癥狀通常只需要半分鐘到兩分鐘左右就可以完全緩解了。鼻咽拭子采樣是將一根細棉簽深入鼻孔，從下鼻道深入抵達鼻咽后壁，然后捻轉棉簽取樣。
棉簽進(jìn)入鼻腔的深度約為鼻尖到耳垂的距離。擴展資料：核酸檢測相關(guān)知識：核酸檢測是檢測病毒的方法，它可以更早發(fā)現感染。
現在臨床中對乙肝、丙肝、艾滋病都開(kāi)展了核酸檢測，可以在抗體產(chǎn)生前檢測到血液中是否存在病毒。而一些呼吸道疾病可以通過(guò)咽拭子或者呼吸道分泌物的核酸檢測來(lái)判斷是否感染，以及推測是否具有傳染性。
季節性流感、禽流感、冠狀病毒感染等通過(guò)咽拭子檢測可以方便地判斷出上呼吸道是否存在病毒成份，從而判斷被檢測者是否屬于感染者。新冠病毒的核酸檢測已經(jīng)是比較成熟的檢測方法了，只要在咽喉部位擦拭幾秒鐘就可以采集到標本。
通過(guò)分析判斷是否有新冠病毒的核酸成分，可以盡早發(fā)現感染者，甚至在感染者出現癥狀前就可以檢測到陽(yáng)性。感染者經(jīng)過(guò)隔離治療后咽拭子檢測陰性說(shuō)明病毒已經(jīng)清除，不具有傳染性了。
目前兩次咽拭子核酸檢測陰性是確診病例和無(wú)癥狀感染者解除隔離的標準之一。參考資料來(lái)源：人民網(wǎng)-核酸檢測究竟是怎么回事。
5.核酸定量常見(jiàn)方法
去百度文庫，查看完整內容>內容來(lái)自用戶(hù)：孤墨陽(yáng)核酸定量的常用方法、原理、優(yōu)缺點(diǎn)等。
紫外分光光度法：利用核酸中的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵，在紫外光的照射下在260nm處有最大吸收峰的原理對核酸進(jìn)行定量和定性的方法。是實(shí)驗室內較為常用的方法。
優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，設備要求低。缺點(diǎn)：靈敏度不夠高，只能測定總核酸量，不能區分核算種類(lèi)；易受樣品中其他雜質(zhì)的干擾（如pH值、殘留的提取劑等）。
熒光染料法：基于熒光染料與核酸分子結合，發(fā)出的熒光信號強度與結合的核酸分子數成正比的原理設計的。常用的熒光染料有嗅化乙錠、SYBR系列染料等。
優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，所需樣品量少，可重復性高。缺點(diǎn)：染料一般都含有較高毒性，檢測結果受染料與核酸的結合率影響。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR法：在反應體系內加入熒光基團，通過(guò)熒光基團發(fā)出熒光信號經(jīng)積累來(lái)實(shí)時(shí)檢測PCR的反應過(guò)程，最后通過(guò)相對定量或者絕對定量的方法對未知濃度的核酸進(jìn)行定量分析。常用的檢測方法有TaqMan探針和熒光染料兩種。
TaqMan探針?lè )ǎ豪肨aqman酶在特異性引物上增加一條熒光雙標記的探針，分別標記有熒光信號基團R和淬滅基團Q，當二者都存在的時(shí)候R基團受Q基團影響不發(fā)出熒光信號，而在PCR反應過(guò)程中，聚合酶將探針的堿基水解，R與Q基團分離，R基團發(fā)出熒光信號，模板每擴增一次，就產(chǎn)生一次熒光信號，通過(guò)對熒光信號的檢測和繪制熒光信號曲線(xiàn)，與標準曲線(xiàn)對比分析，可對核酸進(jìn)行定量。優(yōu)點(diǎn)是特異性強，缺點(diǎn)是探針序列設計時(shí)需要強特異。
6.核酸定量常見(jiàn)方法
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內容來(lái)自用戶(hù)：孤墨陽(yáng)
核酸定量的常用方法、原理、優(yōu)缺點(diǎn)等。
紫外分光光度法：利用核酸中的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵，在紫外光的照射下在260nm處有最大吸收峰的原理對核酸進(jìn)行定量和定性的方法。是實(shí)驗室內較為常用的方法。
優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，設備要求低。
缺點(diǎn)：靈敏度不夠高，只能測定總核酸量，不能區分核算種類(lèi)；易受樣品中其他雜質(zhì)的干擾（如pH值、殘留的提取劑等）。
熒光染料法：基于熒光染料與核酸分子結合，發(fā)出的熒光信號強度與結合的核酸分子數成正比的原理設計的。常用的熒光染料有嗅化乙錠、SYBR系列染料等。
優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，所需樣品量少，可重復性高。
缺點(diǎn)：染料一般都含有較高毒性，檢測結果受染料與核酸的結合率影響。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR法：
在反應體系內加入熒光基團，通過(guò)熒光基團發(fā)出熒光信號經(jīng)積累來(lái)實(shí)時(shí)檢測PCR的反應過(guò)程，最后通過(guò)相對定量或者絕對定量的方法對未知濃度的核酸進(jìn)行定量分析。常用的檢測方法有TaqMan探針和熒光染料兩種。
TaqMan探針?lè )ǎ豪肨aqman酶在特異性引物上增加一條熒光雙標記的探針，分別標記有熒光信號基團R和淬滅基團Q，當二者都存在的時(shí)候R基團受Q基團影響不發(fā)出熒光信號，而在PCR反應過(guò)程中，聚合酶將探針的堿基水解，R與Q基團分離，R基團發(fā)出熒光信號，模板每擴增一次，就產(chǎn)生一次熒光信號，通過(guò)對熒光信號的檢測和繪制熒光信號曲線(xiàn)，與標準曲線(xiàn)對比分析，可對核酸進(jìn)行定量。優(yōu)點(diǎn)是特異性強，缺點(diǎn)是探針序列設計時(shí)需要強特異
7.核酸的定量測定用什么方法
核酸的定量測定——定磷法 [原理] 磷的測定方法很多，Fiske-Subbarow定磷法是一經(jīng)典的但至今仍被經(jīng)常采用的方法，它具有靈敏、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。
各種含磷有機物經(jīng)硫酸或過(guò)氯酸水解，使有機磷消化成為無(wú)機磷。無(wú)機磷在酸性條件下，與鉬酸鹽（常用鉬酸銨或鉬酸鈉）反應生成磷鉬酸鹽絡(luò )合物。
用還原劑處理，磷鉬酸鹽絡(luò )合物被還原生成鉬藍，在660nm處有最大光吸收峰。在一定濃度范圍內，顏色的深淺與磷含量成正比關(guān)系。
因此可應用分光光度法進(jìn)行磷的定量測定。 生物幫上面相關(guān)的專(zhuān)題資料的， 生物問(wèn)答 /。
