指將微生物接種到培養基內,經(jīng)一定條件使微生物生長(cháng)繁殖。
接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養基表面。
②劃線(xiàn)法:用接種環(huán)沾取含菌材料,在固體培養基表面劃線(xiàn)。③傾注法:取少許含菌材料放入無(wú)菌培養皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養基,搖勻后冷卻凝固。
④點(diǎn)植法:用接種針在固體培養基表面接觸幾點(diǎn)。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經(jīng)穿刺而進(jìn)入半固體深層培養基中。
⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料,在液體培養基中洗下。培養方法則根據微生物對氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。
需氧培養是指必須在有氧環(huán)境中進(jìn)行培養,必要時(shí)用振蕩或通氣攪拌達到充分供氧;厭氧培養是培養過(guò)程一直保持在少氧或無(wú)氧的環(huán)境中。厭氧的方法可用物理、化學(xué)、生物等辦法使培養容器內的氧氣部分或全部消除。
通常用抽真空方法,有時(shí)將兩種方法結合使用,使厭氧培養更為理想。接種、培養是食品微生物應用、研究過(guò)程中最基本和必不可少的方法。
高中生物涉及到的微生物及代謝類(lèi)型
乳酸菌、硝化細菌(代謝類(lèi)型,其中乳酸菌是厭氧微生物);
肺炎雙球菌S型、R型(遺傳的物質(zhì)基礎);
結核桿菌和 麻風(fēng)桿菌(胞內寄生菌);
根瘤菌、圓褐固氮菌(固氮菌);
大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農桿菌(為基因工程提供運載體,也可作為基因工程的受體細胞,其中大腸桿菌是厭氧微生物);
蘇云金芽孢 桿菌(為抗蟲(chóng)棉提供抗蟲(chóng)基因);
假單孢桿菌 (分解石油的超級細菌);
甲基營(yíng)養細 菌、谷氨酸棒狀桿菌、黃色短桿菌(微生物的代謝);
鏈球菌(一 般厭氧型);
產(chǎn)甲烷桿菌 (嚴格厭氧型)等
1905年,德國微生物學(xué)家科赫因對結核桿菌和結核菌素的研究取得重大成就而榮獲諾貝爾獎金。
他發(fā)明固體培養基,用它分離培養細菌,創(chuàng )造細菌的純粹培養法。他又改進(jìn)細菌染色法,為研究細菌的形態(tài)和結構創(chuàng )造有利條件。
荷蘭科學(xué)家E.C.翰遜教授研究使啤酒發(fā)酵的酵母,創(chuàng )造單細胞的純粹培養法。以后,又有人采用純粹培養法選擇適當酵母,用于啤酒的工業(yè)生產(chǎn),為純粹培養法在工業(yè)發(fā)酵上的應用開(kāi)辟了道路。
翰遜的學(xué)生哈斯發(fā)現,當時(shí)用的由明膠制成的固體培養基很容易發(fā)生液化現象,使用時(shí)有困難。哈斯的妻子建議用瓊脂代替明膠,獲得了較好的效果。
這種瓊脂培養基被后人采用,一直沿用到今天。后來(lái)又有人創(chuàng )造一種培養皿,可供微生物平板分離用。
從此以后,分離出的微生物日益增多,新的微生物不斷被發(fā)現。這樣,可供工業(yè)用的微生物也日益充實(shí)起來(lái),一支微生物生力軍異軍突起。
我只知道有關(guān)厭氧菌的一些東西:
厭氧菌尚無(wú)公認的確切定義,但通常認為這是一類(lèi)只能在低氧分壓的條件下生長(cháng),而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的固體培養基表面生長(cháng)的細菌。按其對氧的耐受程度的不同,可分為專(zhuān)性厭氧菌、微需氧厭氧菌和兼性厭氧菌。
厭氧菌種類(lèi):脆弱類(lèi)桿菌群、產(chǎn)色素普雷活特和卟啉單胞菌、解脲類(lèi)桿菌群、核梭桿菌、厭氧革蘭陰性桿菌、厭氧革蘭陰性球菌、厭氧革蘭陽(yáng)性球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、其他被狀芽胞桿菌、厭氧革蘭陽(yáng)性桿菌。
希望對你有幫助。
厭氧菌的培養方法
厭氧菌在有氧的情況下不能生長(cháng)。要培養厭氧菌,必須創(chuàng )造一個(gè)無(wú)氧的環(huán)境。通常用培養基中加入還原劑,或用物理、化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養基、硫基乙酸鈉培養基,牛心腦浸液培養基等。常用的厭氧培養方法有許多,可根據實(shí)際情況選用。
1.厭氧缸法接種好標本的平板或液體培養基試管,可放入厭氧缸內培養,厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學(xué)的方法使缸內造成厭氧環(huán)境,從而將厭氧菌培養出來(lái)。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內造成厭氧環(huán)境來(lái)培養厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內裝氣體發(fā)生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內在半小時(shí)內造成無(wú)氣環(huán)境。如不突變表示袋內已達厭氧狀態(tài),可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國際上公認的培養厭氧菌最佳儀器之一。它是一個(gè)密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個(gè)有機玻璃做的透明面板,板上裝有兩個(gè)手套,可通過(guò)手套在箱內進(jìn)行操作,故名。箱側有一交換室,具有內外二門(mén),內門(mén)通箱內先關(guān)著(zhù)。欲放物入箱,先打開(kāi)外門(mén),放入交換室,關(guān)上外門(mén)進(jìn)行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內門(mén)打開(kāi),將物品移入箱內,關(guān)上內門(mén)。箱內保持厭氧狀態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢(qián)殘余氧化合成水的原理。該箱可調節溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內,還可放入解剖顯微鏡便于觀(guān)察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細菌的大量培養研究,大量培養基可放入作預還原和厭氧性無(wú)菌試驗。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動(dòng)調節。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷(xiāo)售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時(shí)產(chǎn)生二氧化碳,供細菌生長(cháng)用。我沒(méi)見(jiàn)過(guò)。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或濾紙,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個(gè)封閉空間。焦性末食子酸與堿反應后耗氧。該法用于厭氧不嚴格的厭氧菌的培養,簡(jiǎn)單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養基:本身就是一個(gè)不需特殊設備的厭氧培養法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無(wú)氧環(huán)境。
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