將已經(jīng)液化的精液標本均勻混合,用白細胞計數吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計數板內,計數二大格(每格面積1平方毫米)之精子數,在尾數后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內精子數。
例如計數為1280個(gè),則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。
稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí),可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內,稀釋后進(jìn)行計數。
如精子的數目極少,亦可改為稀釋10倍計數。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的,因此單憑一次排精的精子計數來(lái)衡量睪丸生精機能是不全面的。
只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數來(lái)反映睪丸的生精機能。
為了比較精確地評定精子密度,可采用精子計數的方法,即應用計數血細胞的方法計算精子數,將1滴精液置于玻片上,用紅細胞吸管吸精液至“0.5”刻度處,然后吸人3%氣花鈉液至“1.0”刻度處,3%氣化鈉用于殺死精子和進(jìn)行稀釋?zhuān)阌谟^(guān)察計數。
用拇指和食指分別按住吸管的兩端,輕輕搖蕩,使精液和氣化鈉充分混勻,然后棄去吸管前端數滴,將吸管尖端放在計箅板與蓋玻片之間的空隙邊緣,使吸管內精液流入計算室,注意防止精液流到蓋玻片上面。計算室用刻線(xiàn)劃分成25個(gè)正方形大方格,每個(gè)大方格又劃分為16個(gè)小方格,共400個(gè)小方格,面積為1毫米2。
將計算板放在顯微鏡下計數5個(gè)大方格(80個(gè)小方格)的精子數,所選擇的5個(gè)大方格,應位于一條對角線(xiàn)上,或四角各取1個(gè)角再加中央1個(gè)。
有以下兩種方式: (1)精子的取樣與計數將備用的精液攪勻,吸出幾十毫升 置于杯中,加人1?2滴碘酒,將精子固定后搖勻,取1滴置于 100倍的顯微鏡下計數(應在鏡下計數2?3滴,取平均數),換 算出每毫升精液的精子濃度(每滴精子數X每毫升水的滴數=每 毫升含有精子數)。
也可以將上述水樣置于血球計數板中用顯微 鏡計數。 (2)卵的取樣與計數卵粒較精子大得多,計數比較容易。
將卵液攪勻,用移液管吸取2?10毫升(視卵的密度)放人玻璃 杯中,加少量清水,把杯子放在深色的基面上,用肉眼即可清晰 地將卵全部計數。或將含卵的水體充分輕輕攪勻,將2毫升移液 管(管口要粗些)伸入水中,取出水樣直接用肉眼計算管中的卵 量。
上述兩種方法取樣計數至少3次以上,求平均值,換算出水 中每毫升的含卵量與全水體總卵量。
檢測精子的質(zhì)量最好是去醫院,醫院會(huì )有專(zhuān)門(mén)的儀器幫助檢驗精子的質(zhì)量的。注意去醫院檢測之間最好不要有太大的心里情感起伏,最好是心情比較平靜的時(shí)候,這樣更加有利于檢測精子的質(zhì)量。
檢測精子質(zhì)量的標準有哪些
1、精液量。一個(gè)正常的成年男性每次射精的量為≥2ml,大于7ml時(shí)為過(guò)多不僅精子的密度降低,而且易從陰道中流出以致精子總數降低;小于2ml則為精液量過(guò)少,精液與女性生殖道接觸面積小,或因粘稠不利于精子進(jìn)入女方宮頸口。精液量過(guò)多、過(guò)少屬于精液精子異常之一,精液異常嚴重的影響了精子的數量和質(zhì)量,都可能最終導致男性不育。
2、存活率。射精之后1小時(shí)內檢查,活精子≥50%為正常情況。副性腺炎癥、精索靜脈曲張、精液中存在抗精子抗體等原因都會(huì )影響男性精子存活率。
3、顏色。正常精液是灰白色或略帶黃色,乳白色或黃綠色有可能是生殖道或副性腺存在炎癥。粉色、紅色可能是血性精液,常見(jiàn)于副性腺、后尿道的炎癥。偶可見(jiàn)于結核或腫瘤。
4、粘稠度。檢查時(shí)候將玻璃棒接觸已經(jīng)液化的精液,輕輕提起的時(shí)候可形成小于2cm的精液絲為正常情況。
5、精子計數。一般情況下每毫升精液中的精子數≥20*106ml,如果過(guò)高或過(guò)低都會(huì )影響精子活動(dòng)力和正常功能。
6、酸堿度。正常精子的PH值在7.2—7.8之間,這樣就有利于綜合女性陰道的酸性環(huán)境,這樣精子活動(dòng)力就強,容易使女方受懷孕如果是偏酸性的,就提示有炎癥,那樣受孕的機會(huì )就少。
7、染色體分析。對于檢測精子質(zhì)量可以通過(guò)男性的染色體進(jìn)行分析,如果染色體方面存在了問(wèn)題,就會(huì )引起精子數目過(guò)少、精子大量畸形、活動(dòng)能力過(guò)低或根本就沒(méi)有精子的結果。
影響精子成活率低的因素主要有: 1、生殖系統感染(前列腺炎,精囊炎,附睪炎,尿道炎)使精液成分改變,鎂、鋅、檸檬酸、果糖減少和pH升高都會(huì )影響精子活力造成影響。
2、長(cháng)期禁欲導致精子活力度差,死精子多,這種情況屬正常,所以檢查精液前以禁欲5~7d為宜。 3、精索靜脈曲張造成陰囊溫度升高,也可以使精子活動(dòng)力低下。
4、睪丸損傷或病變導致精子營(yíng)養分泌不足,引起的精子成活率低。 精子成活率檢查 精液常規查哪些方面 以往,不少人認為只要一檢查精液常規就可以了解男性的生育能力是否正常,其實(shí)這是非常片面的。
目前常規精液分析主要可以了解精液量、精子密度及其精液中精子的總數量、精子凝集、精子活力與活率、精子形態(tài)、精液液化等方面的信息。 實(shí)際上這些內容的分析,只是非常表淺的分析,有時(shí)還難以真正了解精子的功能和受精潛能,特別是在人工授精及試管嬰兒方面,尚不能僅僅通過(guò)精液常規所提供的信息,決定是否可以進(jìn)行人工授精。
宮頸粘液穿透試驗 精子活力是否正常,是自然受孕和提高人工授精成功率的關(guān)鍵。精子要穿透宮頸粘液,通過(guò)女性生殖道達到授精部位,穿透卵丘與透明帶,必須具有一定的活力,缺乏活力的精子數量再多也是沒(méi)有用處的。
宮頸粘液穿透試驗,也是在不育癥患者中經(jīng)常需要做的一項檢查。一般情況下,影響精子穿透宮頸粘液的常見(jiàn)因素為宮頸粘液的理化狀態(tài)、精漿酶的活性、精子的運動(dòng)質(zhì)量等。
了解精子與宮頸粘液的相互作用,臨床目前多采用性交后試驗的方法。在人工授精的時(shí)候,一定要盡量選擇穿透宮頸粘液能力強的精子,這樣對提高受孕率具有積極作用。
精子功能的生化指標 了解精子功能的生化指標,對準確評價(jià)男性生育能力十分有益。在精漿中,存在著(zhù)包括酶、小分子有機物、無(wú)機物在內的各種生化成分。
這些成分的存在對保護、促進(jìn)與維護精子的正常功能具有非常重要的意義。 在這些成分中,乙酰肉毒堿顯得非常重要,因為它是精子運動(dòng)的一種能源儲備形式,對精子活力的產(chǎn)生和加強具有重要的作用。
獲能及其頂體反應的檢測,對部分不育癥來(lái)說(shuō)是應查項目。在受精過(guò)程中,頂體蛋白酶及透明質(zhì)酸酶的作用最為重要。
當精子與卵泡結合的初期,精子就會(huì )遇到圍繞在卵母細胞周?chē)穆亚鸺毎淖钄r,精子必須穿過(guò)卵丘的基層,然后向透明帶“進(jìn)軍”。 頂體反應 精子獲能后,這些酶被釋放出來(lái),以分解卵細胞周?chē)姆派涔诤屯该鲙В瑸榫舆M(jìn)入卵子打開(kāi)方便之門(mén)。
倘若缺乏這些酶的作用,精卵結合將成為可望不可及的分離結局,受孕也就成為一句空話(huà)。在人類(lèi)生育過(guò)程中,頂體反應同樣也是相當重要的。
該反應是一種使精子頂體區前2/3處以及精子漿膜和外頂體膜有順序的空泡化過(guò)程,也是為精子進(jìn)入卵泡促成精卵結合的最后過(guò)程。這一過(guò)程出現“故障”,男性就有可能難以實(shí)現正常生育。
因而,目前在臨床上經(jīng)常要檢查精子的頂體反應是否正常。 其他方面 之外,檢查精液中非精子細胞包括未成熟的精原細胞、精母細胞、生殖脫落的上皮細胞、多形核白細胞、巨噬細胞、淋巴細胞、單核細胞等,對精液中的非精子細胞的全面正確評價(jià)、精子計數及其活力,均有非常重要的作用。
例如,醫學(xué)研究業(yè)已表明精液中的白細胞及其產(chǎn)物,可降低精子的活動(dòng)率和活動(dòng)力,前者還會(huì )刺激生殖道產(chǎn)生局部抗精子抗體,影響或阻礙精子的運動(dòng)和成熟,影響精子穿透卵子的能力。只有得到了正確的精子檢查結果,才能進(jìn)行有效的治療。
對于精子成活率低該怎么辦呢? 首先通過(guò)精子分析儀檢查出精子成活率是多少,再了解患者有沒(méi)有男科其他病史或疾病,確定是否有其他疾病而引起精子成活率低。最后制訂詳細的治療方案,例如患者有生殖感染疾病,必須先治療生殖感染疾病,同時(shí)戒影響精子成活率的不良習慣,如吸煙、飲酒等。
再進(jìn)行中西醫聯(lián)合施治,并配合使用物理療法,達到理想的治療效果。當然患者也必須按醫囑配合治療,并加強自身鍛煉提高身體素質(zhì),注意飲食搭配,按醫囑食用一些有助精子生長(cháng)的食物等等,以便全方位提高精子成活率,達到理想的治療效果。
以上介紹了有關(guān)精子成活率低的問(wèn)題,只要患者積極采取治療措施,一般都可以恢復正常的精子活率,但必須到正規專(zhuān)業(yè)的醫院進(jìn)行治療,切記不要依賴(lài)一些偏方,要以科學(xué)的態(tài)度對待才是正確解決辦法。
MAKLER 精子計數板使用說(shuō)明書(shū) 一、描述: Makler 精子計數板(腔室)是一種方便精子計數的設備,用于快速精確的精子計數、活動(dòng)性和形態(tài)學(xué)評價(jià),可使用未稀釋的樣品。
計數板包括兩個(gè)部分: 1. 下面的主要部分有一個(gè)金屬基底(A)和兩個(gè)把手(H)。在基底的中心有一個(gè)光學(xué)平玻璃制的平盤(pán)(D),樣品放置其上。
在平盤(pán)周?chē)兴膫€(gè)針(P)。他們的尖端比平盤(pán)高10微米。
2. 上面部分是覆蓋玻璃(C)被一個(gè)金屬環(huán)環(huán)繞。在他的下表面中心有一個(gè) 1 mm平方的格子,被分成100個(gè)方格,每個(gè)是0.1 mm * 0.1mm 。
當覆蓋玻璃放置在四個(gè)針上時(shí),在一行上的10個(gè)方格包圍的空間就是一毫升的百萬(wàn)分之一。因此,在10個(gè)方格里的精子頭數量代表著(zhù)他們以 百萬(wàn)/mL 為單位的濃度。
二、腔室的準備: 在把樣品放在平盤(pán)上之前,確保相對表面徹底清潔且無(wú)塵,因為大多數顆粒的尺寸大于玻璃間的狹小空間。為了此目的,用鏡頭紙擦兩個(gè)表面。
清潔度可以通過(guò)把覆蓋玻璃放置到四個(gè)針上,觀(guān)察四個(gè)接觸點(diǎn)彩色邊紋(Newton現象)來(lái)檢查。對著(zhù)熒光燈可以看到最好的效果。
三、精液分析的方法: 充分混合樣品,注意避免產(chǎn)生氣泡。通過(guò)木棒或移液器的幫助,在平盤(pán)中心區域放置一小滴。
用手指拿起覆蓋玻璃黑色點(diǎn)的相反面,并立即放在四根針上。輕柔按下,再次觀(guān)察彩色邊紋。
液滴會(huì )在平盤(pán)的整個(gè)區域擴散成厚度10微米的薄層。 只要針沒(méi)有被淹沒(méi),多余的不會(huì )影響正常的分析。
一旦覆蓋玻璃就位,避免觸摸、抬起以及再次覆蓋。因為這會(huì )改變腔室內精子的平均分布。
用把手拿起腔室并放置在顯微鏡平臺上。可能需要用腔室?jiàn)A頭來(lái)進(jìn)行固定。
四、特別注意事項 1,絕對不要對此腔室使用40* 物鏡。這樣蓋玻片在聚焦時(shí)會(huì )被破壞。
2,即使使用合適的20* 物鏡,也要小心不要壓到覆蓋玻璃上。 一般當物鏡末端距離表面1mm的時(shí)候,圖像是清晰的。
如果因為不正確的使用顯微鏡導致覆蓋玻璃損壞,我們不會(huì )負責。 3,推薦使用20* 物鏡和10* 目鏡。
不推薦使用10* 物鏡,因為精子看起來(lái)會(huì )太小,除非用20* 目鏡。 五、精子計數: 如果精子太密集和活動(dòng),他們首先需要被固定。
這很容易做到,通過(guò)把樣品一部分轉移到另一個(gè)測試管。然后測試管插入50℃-60℃熱水中,大約5分鐘。
一滴充分混合的,預熱的樣品放置在腔室上并蓋上覆蓋玻璃。在格子的方格里精子頭被計數,與血液學(xué)中計數血細胞的方法一樣。
在此精子的數量是最重要的,在連續一列10個(gè)方格里對其計數。數量代表了以 百萬(wàn)每毫升為單位的濃度。
在其他一列或兩列里重復此操作,以測定平均值。可以選擇用其他2或3滴樣品進(jìn)行計數以提高計數的可靠性。
在精子缺乏癥樣品中,推薦在整個(gè)格子區域計數。 在精子聚焦之后,移動(dòng)顯微鏡平臺把各自定位在視野中心。
然后,調節腔室以使格子線(xiàn)處于水平和垂直位置。 在此搜索期間你可能會(huì )觀(guān)察到: A)精子分別是否均勻?如果不是,樣品沒(méi)有混合好。
B) 是否所有精子都在一個(gè)聚焦平面,沒(méi)有模糊?如果不是,可能表面沒(méi)有清潔或兩個(gè)表面之間有大的顆粒。 任意情況,都要從開(kāi)始重復。
六、活動(dòng)性評價(jià): 推薦在樣品準備好3-5分鐘之內進(jìn)行活動(dòng)性評價(jià),以避免從周邊移動(dòng)過(guò)來(lái)的精子的干擾。計數9或16格內所有不能動(dòng)的精子。
然后計數相同區域內能動(dòng)的精子且評估移動(dòng)等級+1到+4. 在格子的另一個(gè)區域重復此過(guò)程,以及另外3到4滴樣品并計算平均值。 這樣的評估比原始載玻片上的要精確很多,因為那里精子被蓋玻片壓縮且活動(dòng)性被損害。
Makler精子計數板提供了標準條件,對所有分析樣品精子都可以在一個(gè)光滑的水平面自由移動(dòng)。 七、形態(tài)學(xué): 快速精子形態(tài)學(xué)評價(jià)可以從一個(gè)濕的未染色的樣品進(jìn)行,其包含固定的精子。
推薦使用一個(gè)相差顯微鏡。在格子的一個(gè)特定區域計數所有正常和不正常精子,且從其他樣品重復此過(guò)程以達到總計數200。
顯然,精子缺乏癥樣品掃描的精子數可以更低。腔室不適合染色的,干的樣品進(jìn)行形態(tài)學(xué)測定。
八、特殊情況: 氣泡:格子區域如果出現氣泡,推薦換一滴樣品,除非氣泡非常小,不影響分析。 大的灰塵顆粒,纖維等,也會(huì )通過(guò)改變空間大小來(lái)影響計數,也應該更換一滴樣品。
如果樣品沒(méi)有混合完全,高度粘稠,或腔室有顆粒或灰塵;在同一樣品不同滴之間計數會(huì )出現較大差別。 凝聚:在腔室里有時(shí)周?chē)木訒?huì )聚集,如果在計數之前過(guò)去了太久。
這種情況下,更換此滴樣品為適當混合的新樣品。在個(gè)別情況下,在格子區域內會(huì )出現膠狀聚集,此時(shí)應更換樣品。
結晶:樣品時(shí)間過(guò)長(cháng)可能包含晶體,可能不會(huì )影響計數,但使計數更困難。有時(shí)候,這些晶體太大,可能會(huì )損壞表面區域。
因此,分析包含晶體的樣品時(shí)需特別注意。 九、為了重復使用的清洗和準備: 不要用自來(lái)水淋洗或浸泡腔室。
把刷子蘸水或非腐蝕性殺菌溶液,并擦玻璃的兩個(gè)面。然后,擠壓刷子擦掉剩下的水。
最后用無(wú)毛鏡頭紙擦干表面,盡量避免觸摸針的尖端。腔室現在可以重復使用了。
一般來(lái)說(shuō),一旦檢查固定,不需要改變聚焦。無(wú)需提高物鏡,簡(jiǎn)單的把腔室滑進(jìn)滑出即可。
十、附 件: ???清潔刷 ???無(wú)毛鏡頭紙 ???腔室?jiàn)A頭——在精 子。
精子計數。
一般以每毫升精液中的精子數表示。正常精子密度>20 x 106/毫升,同時(shí)也要綜合精子總數評價(jià)精子的數量才夠全面,總數大于 45 x106/—次射精。
其異常常見(jiàn)于各種原因導致的睪丸生精功能下降、精 索靜脈曲張、有害金屬和放射性損害等。精子數量減少,可因精子進(jìn)人子 宮腔及輸卵管的機會(huì )減少而致生育力低下或不育。
如精子計數大于250 x 106/毫升為精子過(guò)多,因其活動(dòng)力受影響也可能導致不育。精液中無(wú)精子 為無(wú)精子癥,應離心確定在沉渣中無(wú)精子,傾去精漿后將沉渣重新懸浮, 經(jīng)系統和徹底檢查后發(fā)現無(wú)精子,才能作出無(wú)精子的診斷。
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