氨基酸分離方法(氨基酸的分離分析方法常有)
1.氨基酸的分離分析方法常有有哪些
如果是兩個氨基酸的保留時間距離太近，那么只能調(diào)整液相條件了。
比如調(diào)整流動相比例，或者是梯度比例，把兩個氨基酸拉開。
也可以適當調(diào)整衍生程序。
雖然衍生程序不會對氨基酸的保留時間有影響，不過會對它的信號產(chǎn)生影響。
如果這兩種氨基酸的峰高有所下降，或許分離度也可以達到要求。
還有就是注意峰型。
衍生化程序很容易損壞色譜柱，超高效色譜的壓力又高，色譜柱很容易損毀。
如果峰型不好，建議用純乙腈低流速反沖色譜柱。
或者是更換新色譜柱。
2.氨基酸的分離
一、沉淀法：1.利用氨基酸的溶解度分離或等電點沉淀
2.特殊試劑沉淀法
二、離子交換：離子交換是利用不溶性高分子化合物，就是離子交換樹脂對不同氨基酸吸附能力的差異對氨基酸混合物進行分組或?qū)崿F(xiàn)單一成分的分離.
三、萃?。?、反應(yīng)萃?。哼x取適當?shù)姆磻?yīng)萃取劑，其解離出來的離子與氨基酸解離出來的離子發(fā)生反應(yīng)，生成可以溶于有機溶劑的萃取配合物，從而使氨基酸從水相進入有機相.
2、反相微膠團萃?。悍聪辔⒛z團是溶在有機溶劑中的表面活性劑自發(fā)形成的納米級的聚體，表面活性劑的極性尾與外在非極性的有機溶劑接觸，而極性頭則排列在內(nèi)形成極性核，極性核溶于水后就形成了“水池”，當含有氨基酸的水溶液與反相微膠團的有機溶劑相混合時，氨基酸以帶電離子狀態(tài)進入反相微膠團的水池內(nèi)而被分離
氨基酸分離的方法還有很多，但是常用的就是離子交換.
全手打，
3.氨基酸的分離
一、沉淀法：1.利用氨基酸的溶解度分離或等電點沉淀2.特殊試劑沉淀法二、離子交換：離子交換是利用不溶性高分子化合物，就是離子交換樹脂對不同氨基酸吸附能力的差異對氨基酸混合物進行分組或?qū)崿F(xiàn)單一成分的分離.三、萃?。?、反應(yīng)萃取：選取適當?shù)姆磻?yīng)萃取劑，其解離出來的離子與氨基酸解離出來的離子發(fā)生反應(yīng)，生成可以溶于有機溶劑的萃取配合物，從而使氨基酸從水相進入有機相.2、反相微膠團萃?。悍聪辔⒛z團是溶在有機溶劑中的表面活性劑自發(fā)形成的納米級的聚體，表面活性劑的極性尾與外在非極性的有機溶劑接觸，而極性頭則排列在內(nèi)形成極性核，極性核溶于水后就形成了“水池”，當含有氨基酸的水溶液與反相微膠團的有機溶劑相混合時，氨基酸以帶電離子狀態(tài)進入反相微膠團的水池內(nèi)而被分離氨基酸分離的方法還有很多，但是常用的就是離子交換.全手打，。
4.如何用紙層析法對氨基酸分離
氨基酸的分離鑒定——紙層析法
一，實驗?zāi)康?
掌握氨基酸紙層析的方法和原理，學(xué)會分析待
測樣品的氨基酸成分.
二，實驗原理
紙層析是以濾紙為惰性支持物的分配層析.濾紙纖維上的羥基具有親水性，吸附一層水作為固定相，有機溶劑為流動相.當有機相流經(jīng)固定相時，物質(zhì)在兩相間不斷分配而得到分離.
溶質(zhì)在濾紙上的移動速度用Rf值表示：
Rf=原點到層析斑點中心的距離/原點到溶劑前沿的距離
在一定的條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù).Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，性質(zhì)，溶劑系統(tǒng)，層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關(guān).本實驗利用紙層析法分離氨基酸.
三，實驗器材
(1)大燒杯（5000mL）:1只/組
(2)微量注射器（100 L）:1只/ 組.
(3)噴霧器：公用.
(4)培養(yǎng)皿：1只/組.
(5)層析濾紙（長22cm，寬14cm的新華一號濾紙）：1張/組.
(6)直尺，鉛筆：自備.
(7)電吹風(fēng)：1只/組.
(8)托盤，針，白線：1套/組.
(9)手套：1雙/組.
(10)塑料薄膜：公用.
(11)小燒杯：50mL,1只/組.
四，實驗試劑
(1)擴展劑：將4體積正丁醇和1體積冰醋酸放入分液漏斗中，與5體積水混合，充分振蕩，靜置后分層，棄去下層水層.
(2)氨基酸溶液：0.5%的已知氨基酸溶液3種（賴氨酸，苯丙氨酸，纈氨酸），0.5%的待測氨基酸液1種.
(3)顯色劑：0.1%水合茚三酮正丁醇溶液.
實驗試劑
五，實驗操作
檢查培養(yǎng)皿是否干燥，潔凈；若否，將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)120℃烘干.
(1)平衡：剪一大塊塑料薄膜鋪在桌面上，將層析缸或大燒杯到置于塑料薄膜上，再把盛有約20mL展層溶液的小燒杯置于倒置的層析缸或大燒杯中，用塑料薄膜密封起來，平衡20min.
(2)規(guī)劃：帶上手套，取寬約14cm，高約22cm的層析濾紙一張.在紙的下端距邊緣2cm處輕輕用鉛筆劃一條平行于底邊的直線A，在直線上做4個記號，記號之間間隔2cm，這就是原點的位置.另在距左邊緣1cm處畫一條平行于左邊緣的直線B，在B線上以A,B兩線的交點為原點標明刻度（以厘米為單位），參見左圖.
(3)點樣：用微量注射器分別取10mL左右的氨基酸樣品（每取一個樣之前都要用蒸餾水洗滌微量注射器，以免交叉污染），點在這四個位置上.擠一滴點一次，同一位置上需點2~3次，2~3mL/次，每點完一點，立刻用電吹風(fēng)熱風(fēng)吹干后再點，以保證每點在紙上擴散的直徑最大不超過3mm.每人須點4個樣，其中3個是已知樣，1個是待測樣品.
(4)層析：用針，線將濾紙縫成筒狀，紙的兩側(cè)
邊緣不能接觸且要保持平行，參見圖3-3.向培養(yǎng)皿中加入擴展劑，使其液面高度達到1cm左右，將點好樣的濾紙筒直立于培養(yǎng)皿中（點樣的一端在下，擴展劑的液面在A線下約1cm），罩上大燒杯，仍用塑料薄膜密封.當擴展劑上升到A線時開始計時，每隔一定時間測定一下擴展劑上升的高度，填入表3-1中.當上升到15~18cm，取出濾紙，剪斷連線，立即用鉛筆描出溶劑前沿線，迅速用電吹風(fēng)熱風(fēng)吹干.
(5)顯色：用噴霧器在通風(fēng)廚中向濾紙上均勻噴上0.1%茚三酮正丁醇溶液，然后立即用熱風(fēng)吹干，即可顯出各層析斑點，參見左圖.
(6)計算各種氨基酸的Rf值，并判斷混合樣品中都有哪些氨基酸，各人將自己的實驗結(jié)果貼在實驗報告上，見表3-2.
(7)以層析時間為橫坐標，擴展劑上升高度為縱坐標畫圖，求出擴展劑上升到18cm時所需要的時間.
(8)將微量注射器內(nèi)外用蒸餾水清洗干凈，倒掉用過的展層液和平衡液，將培養(yǎng)皿洗凈，整理好桌面上的儀器和試劑.
5.求助幾種氨基酸化學(xué)拆分的方法
氨基酸有必須氨基酸和非必須氨基酸，非必須氨基酸可以在人和動物體內(nèi)合成，必需氨基酸需依靠食物供給，而植物能合成自身所需的全部氨基酸。
氨基酸合成的公共途徑有還原性氨基化作用、氨基轉(zhuǎn)移作用、氨基酸的相互轉(zhuǎn)化作用。 1、還原性氨基化作用 在多數(shù)機體中，NH3同化主要是經(jīng)谷氨酸和谷氨酰胺合成途徑完成的。
（1）、谷氨酸合成的主要途徑是由L-谷氨酸脫氫酶催化的α-酮戊二酸氨基化途徑 （2）、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸合成酶聯(lián)合作用，將游離氨轉(zhuǎn)變?yōu)楣劝彼岬摩?氨基。 2、氨基轉(zhuǎn)移作用 氨基轉(zhuǎn)移作用是由一種氨基酸把它的分子上的氨基轉(zhuǎn)移至其它α-酮酸上。
以形成另一種氨基酸。 植物細胞內(nèi)存在的轉(zhuǎn)氨作用主要有下列三種： 3、氨基酸的相互轉(zhuǎn)化作用 在有些情況下，氨基酸間也可以相互轉(zhuǎn)化。
如由蘇氨酸或絲氨酸可生成甘氨酸，由色氨酸或胱氨酸可生成丙氨酸。 氨基酸的合成需要有氨基和碳架。
氨基是由已有的氨基酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用提供的，許多氨基酸均可作為氨基的供體，其中主要的是谷氨酸；碳架來自于糖酵解，三羧酸循環(huán)，乙醇酸途徑和磷酸戊糖途徑的α-酮酸，如α-酮戊二酸、草酰乙酸、丙酮酸和乙醛酸。
