常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法(常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法是什么)

1.常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法是什么

按實(shí)驗(yàn)方法，實(shí)驗(yàn)室診斷大致可分為：病理組織學(xué)診斷、微生物診斷、免疫學(xué)診斷、分子生物學(xué)診斷等。

從檢測目標(biāo)來看，應(yīng)當(dāng)是兩方面，一方面是檢測病原或致病因素，如活的病原，病原的部分蛋白質(zhì)，病原的核酸，引起中毒的毒素；另一方面，感染病原微生物后機(jī)體發(fā)生的變化，也就是機(jī)體對病原或致病因子的反應(yīng)，包括病理組織學(xué)反應(yīng)，即病理組織學(xué)變化；病理生理學(xué)反應(yīng)，如血常規(guī)檢驗(yàn)、血液生化檢驗(yàn)、血液中酶活性的測定、肝功能和腎功能檢驗(yàn)等；免疫學(xué)反應(yīng)，可分為體液免疫反應(yīng)、細(xì)胞免疫反應(yīng)。不同的診斷方法各有優(yōu)勢，也各有缺陷，例如，常規(guī)病理組織學(xué)方法步驟固定、簡單，可以觀察到機(jī)體組織細(xì)胞形態(tài)的變化，特征性病變可以為診斷帶來很大幫助，甚至可以確診，但也存在同樣的病變可能由不同的疾病引起的問題，另外所需時間較長，需24小時以上才能觀察結(jié)果。

不同的疾病特點(diǎn)不同，診斷方法也有差異，應(yīng)根據(jù)情況加以選擇。

2.實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括哪些內(nèi)容

①病理組織學(xué)檢查腦觸片法是迅速而經(jīng)濟(jì)的方法，將腦 炎癥狀的患病動物捕殺，取大腦海馬角或小腦作觸片，染色鏡 檢，觀察有無內(nèi)基氏小體。

融片法不能獲得陽性結(jié)果時，可將腦組織作成病理切片 （冷凍或石蠟包埋切片）用H。E染色，鏡檢，內(nèi)基氏小體呈紅 褐色。

②突光抗體法是一種迅速而特異性很強(qiáng)的診斷方法。聯(lián) 合國世界衛(wèi)生組織曾推薦，許多國家已廣泛應(yīng)用。

方法是將狂犬病高免血清的球蛋白提純，用異硫氰熒光素 痧記，制成熒光抗本。取可疑清腦組織或唾液腺制成觸片或冰 凍切片，用熒光抗體染色，在熒光顯微鏡下觀察，胞漿內(nèi)出現(xiàn)黃 綠色熒光顆粒者即為陽性。

③動物接種法是較準(zhǔn)確的方法，但耗時較長，需觀察3個 星期才能做出診斷結(jié)果。方法是取腦病料制成乳劑，用30曰齡 靜小鼠，經(jīng)腦內(nèi)接種，如有狂犬病病毒則在接種后1 ~2周內(nèi)小 鼠出現(xiàn)麻痹癥狀與腦膜炎變化。

或者于接種后3天捕殺小鼠， 取膨制觸片，用熒光抗體法檢查，可以縮短診斷時間。 。

3.臨床診斷的方法有哪幾種

臨床上常用的診斷方法主要有視診、問診、觸診及嗅診4種。每一種方法各有其特點(diǎn)，反映出不同的結(jié)果，將這些結(jié)果綜合起來加以分析，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷，可為最后確診提供參考的依據(jù)。

(1)視診

視診是用肉眼直接觀察病貂的整體概況或某些局部癥狀的方法。通過肉眼觀察，看病貂的異常表現(xiàn)，如精神狀態(tài)，眼睛靈活性，被毛的完整性和光澤度，鼻鏡和眼的干濕度，采食情況，糞便的變化，飲水量多少，呼吸表現(xiàn)，頭、頸、軀干、四肢和尾有無異常變化等。根據(jù)視診所見典型癥狀亦可做出初步診斷。

(2)問診

首先向場中有關(guān)人員了解飼養(yǎng)管理的情況，如飼料的種類變化、來源、品種、質(zhì)量、貯藏等情況，日糧組成，飼料單變化時間，變更前后貂群食欲變化，飼料加工情況等。然后，再向飼養(yǎng)員了解病貂的情況。例如，什么時間出現(xiàn)食欲不振，有什么異?，F(xiàn)象，糞便的變化，以前得過哪些病等。

(3)觸診

觸診是用檢查者的手感覺檢查疾病。觸診可以確定視診所見癥狀的性質(zhì)，補(bǔ)充視診的不足。觸摸患貂的趾端和患部的溫度、硬度，局部有無波動，以及皮膚的完整性如何等。觸診對診斷水貂黃脂肪病、膿腫、膀胱結(jié)石有實(shí)用意義。黃脂肪病在鼠蹊部皮下可觸摸到面團(tuán)狀或索狀的硬脂肪、塊。

(4)嗅診

用診斷的嗅覺，去識別病貂的分泌物和排泄物的氣味，有無特殊的腥臭味。犬瘟熱病患貂發(fā)生化膿性結(jié)膜炎、鼻炎尤其是皮炎時，可聞到特殊的腥臭味。

4.病原微生物常用的實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)有哪些

1、外部質(zhì)量控制 外部質(zhì)量控制，顧名思義就是利用實(shí)驗(yàn)室以外的質(zhì)量控制手段來保證檢測結(jié)果所采取的方式，一般分為能力驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間比對。

1.1能力驗(yàn)證 能力驗(yàn)證，指利用實(shí)驗(yàn)室間比對，按照預(yù)先制定的準(zhǔn)則評價參加者的能力，是認(rèn)可機(jī)構(gòu)加入和維持國際相互承認(rèn)協(xié)議（MRA）的必要條件之一，是實(shí)驗(yàn)室重要、有效的外部質(zhì)量控制活動。 實(shí)驗(yàn)室每年可在中國合格評定國家認(rèn)可委員會（CNAS，以下稱CNAS）官方網(wǎng)站查詢年度能力驗(yàn)證計劃，針對性地選擇參加能力驗(yàn)證的項目。

實(shí)驗(yàn)室通過報名的方式參與驗(yàn)證并領(lǐng)取檢測樣品，根據(jù)規(guī)定的方案完成檢測后在規(guī)定的時間反饋給組織能力驗(yàn)證的機(jī)構(gòu)，能力驗(yàn)證組織機(jī)構(gòu)根據(jù)所有參與實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析后出具能力驗(yàn)證結(jié)果報告，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)結(jié)果報告評價自己的檢測能力。能力驗(yàn)證的評價方法包括：1、量值比對的評價參數(shù)（En）：若|En|≤1，滿意、通過；若|En|>1，不滿意，不通過。

2、檢測比對評價參數(shù)（Z）:|Z|≤2，滿意、通過；|Z|≥3，不滿意、不通過；2<|Z|<3，可疑。 當(dāng)能力驗(yàn)證出現(xiàn)不滿意結(jié)果時，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)深入分析原因、實(shí)施糾正措施，并驗(yàn)證措施的有效性；當(dāng)出現(xiàn)可疑結(jié)果時，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分析原因，并視其嚴(yán)重程度、影響范圍等必要時采取糾正措施。

參加能力驗(yàn)證是一種非常有效的外部質(zhì)量控制方式，它不僅可以確定和監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室檢測的能力、持續(xù)能力，亦可以有效識別實(shí)驗(yàn)室存在問題。但由于能力驗(yàn)證受年度計劃的制約，有時會出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室某些檢測項目不在計劃之列而無法確認(rèn)能力的情況，因此需要開展實(shí)驗(yàn)室間比對來補(bǔ)充。

1.2實(shí)驗(yàn)室間比對 實(shí)驗(yàn)室間比對，指按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個或多個實(shí)驗(yàn)室對相同或類似的測試樣品進(jìn)行檢測的組織、實(shí)施和評價，從而識別實(shí)驗(yàn)室存在的問題與實(shí)驗(yàn)室間的差異。 開展實(shí)驗(yàn)室間比對一般可通過兩種方式進(jìn)行，一種是自主組織，另一種是以參與者身份參加。

作為組織者，實(shí)驗(yàn)室首先要選擇適宜的比對實(shí)驗(yàn)室，為確保比對結(jié)果的可信度，建議盡可能選擇已獲得CNAS認(rèn)可、計量認(rèn)證或行業(yè)內(nèi)權(quán)威的實(shí)驗(yàn)室；實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)合理編制比對方案，方案應(yīng)包括采用的方法、測試的項目、數(shù)據(jù)分析處理方法、樣品數(shù)量及必要信息、實(shí)驗(yàn)要求、測試結(jié)果等內(nèi)容，并與參與實(shí)驗(yàn)室達(dá)成一致意見；最后，組織者根據(jù)測試結(jié)果編制比對報告，明確比對的結(jié)論及需要改進(jìn)的問題、改進(jìn)措施等。 實(shí)驗(yàn)室通過開展實(shí)驗(yàn)室間比對，及時發(fā)現(xiàn)存在的問題以及與其他實(shí)驗(yàn)室的差異，從而查找原因并及時改進(jìn)。

與能力驗(yàn)證比較，它的靈活性更強(qiáng)，可作為實(shí)驗(yàn)室外部質(zhì)量控制的常用手段。 2、內(nèi)部質(zhì)量控制 內(nèi)部質(zhì)量控制，指實(shí)驗(yàn)室為確保檢測結(jié)果的有效性而利 用自身資源在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部實(shí)施的質(zhì)量控制，一般包括使用標(biāo)物監(jiān)控、人員比對、儀器比對、方法比對、留樣再測、分析物品不同特性結(jié)果的相關(guān)性等方法。

2.1人員比對 即實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)人員之間的能力比對，由不同的檢測技術(shù)人員利用相同的儀器、使用相同的方法、在相同的檢測條件下對同一特殊物質(zhì)進(jìn)行測試，將獲取的數(shù)據(jù)來進(jìn)行評價?？勺鳛樾聠T工培訓(xùn)后驗(yàn)證其技術(shù)能力的手段，亦可在有多名檢測人員的實(shí)驗(yàn)室開展。

2.2儀器比對 即檢測儀器之間的比對，使用不同的檢測儀器、由相同的檢測人員、采用相同的方法、在相同的檢測條件下對同一檢測樣品進(jìn)行測試，將獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行評價，以確定儀器間的差異。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室擁有不同設(shè)備時，可采用儀器比對的方法開展質(zhì)量控制，特別可用于當(dāng)某臺儀器參加能力驗(yàn)證獲得滿意結(jié)果時，可用其來衡量其他儀器的可信度。

2.3方法比對 即檢測方法之間的對比，使用不同的檢測方法，在相同的人員、相同的儀器、相同的檢測條件下對同一檢測樣品進(jìn)行測試，將獲取的數(shù)據(jù)進(jìn)行評價，以確定方法間的差異。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用新方法、超出預(yù)期使用的標(biāo)準(zhǔn)方法、實(shí)驗(yàn)室制定的方法以及擴(kuò)充或修改的標(biāo)準(zhǔn)方法時，可與標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行比對，以證實(shí)該方法是否適用于預(yù)期的用途。

2.4分析物品不同特性結(jié)果的相關(guān)性 這種方法是樣品中同時存在若干特性，特性問題有確定的關(guān)系，當(dāng)這些特性被試驗(yàn)確定后，通過考察實(shí)驗(yàn)結(jié)果中表現(xiàn)出的特性間的關(guān)系是否違背已知關(guān)系來判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。這些相關(guān)特性間常存在因果關(guān)系，因此相關(guān)特性分析的方方可以用于實(shí)驗(yàn)條件與被測性能間的相關(guān)關(guān)系的分析。

以上分析看出，內(nèi)部質(zhì)量控制操作方便、方法多樣、易于實(shí)施，可作為實(shí)驗(yàn)室日常的質(zhì)量控制手段。 3、小結(jié) 實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制是保證實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、有效性的重要手段，是實(shí)驗(yàn)室持續(xù)改進(jìn)管理體系的有效工具，是實(shí)驗(yàn)室管理中的永恒主題。

因此，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)結(jié)合自身的實(shí)際情況，自覺地、經(jīng)常地、有計劃地、針對性地開展質(zhì)量控制活動，并利用其數(shù)據(jù)進(jìn)行深入分析，查找不足并加以改進(jìn)，使實(shí)驗(yàn)室的管理水平和技術(shù)能力得到不斷提高。 參考文獻(xiàn) [1]CNAS-CL01 《檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》 [2]CNAS-RL01 《實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可規(guī)則》 [3]CNAS-RL02 《能力驗(yàn)證規(guī)則》。

5.雞病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法有哪些

雞病的實(shí)驗(yàn)室診斷因病因不同而診斷方法各異，主要方法有以 下幾種。

（1）細(xì)菌性檢驗(yàn)①細(xì)菌的形態(tài)鑒定。細(xì)菌微小，必須借助于光學(xué)顯微鏡才能看 到。

細(xì)菌從形態(tài)上可分為球狀、桿狀和螺旋狀3種基本類型。細(xì)菌 細(xì)胞由細(xì)胞壁、胞漿膜、細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核等部分構(gòu)成。

有的細(xì)菌除 具有基本構(gòu)造外還能形成莢膜、芽孢、鞭毛和菌毛等特殊構(gòu)造。細(xì)菌的形態(tài)、大小及染色特性是鑒定細(xì)菌的重要標(biāo)志。

細(xì)菌染色方法 有單染色法（如亞甲藍(lán)染色法）、復(fù)染色法（如革蘭氏染色法、姬氏 染色法）、芽孢染色法、鞭毛染色法、抗酸染色法、負(fù)染色法、雷別 格爾莢膜染色法、螺旋體染色法等。 ②細(xì)菌的生化特性鑒定。

各種細(xì)菌具有各自獨(dú)立的酶系統(tǒng)，所 以在相應(yīng)的培養(yǎng)基上生長時，產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物，據(jù)此可鑒定各 種細(xì)菌。細(xì)菌的生化反應(yīng)在種、型的鑒別上具有重要意義。

進(jìn)行生 化性狀檢査，必須用純培養(yǎng)物進(jìn)行。生化性狀檢查的項目很多，應(yīng) 按診斷需要適當(dāng)選擇。

常用的生化檢測方法有糖類發(fā)酵試驗(yàn)、V-P 試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、靛基質(zhì)形成試驗(yàn)、硫化氫產(chǎn)生試驗(yàn)、硝酸鹽還 原試驗(yàn)、亞甲藍(lán)還原試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、明膠液化試驗(yàn)等。③動物接種實(shí)驗(yàn)。

可用采取的病料或分離的病原，人工接種易 感動物，根據(jù)其致病力、癥狀、病理變化等特點(diǎn)來幫助診斷，從而 判斷所分離菌是否為主要的病原菌。 ④細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)。

對分離出的病原菌進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，篩 選出高度敏感的藥物用于防治該菌引起的感染。（2）病毒學(xué)檢驗(yàn)①病毒的形態(tài)觀察。

病毒的形態(tài)有圓形、絲狀和彈狀等，其形 態(tài)觀察常借助于電子顯微鏡。各種病毒的大小和形態(tài)結(jié)構(gòu)是鑒定病 毒的初步依據(jù)之一。

電子顯微鏡常用技術(shù)包括超薄切片、負(fù)染技術(shù)和真空噴鍍術(shù)等。②病毒的分離培養(yǎng)。

病毒沒有獨(dú)立的酶系統(tǒng)，不能在無生命的培養(yǎng)基上生長，常用的分離培養(yǎng)方法有實(shí)驗(yàn)動物試驗(yàn)、雞胚接種和基組織細(xì)胞培養(yǎng)3種。現(xiàn)在細(xì)胞培養(yǎng)已成為病毒培養(yǎng)檢查的常用手段，雞胚和實(shí)驗(yàn)動物培養(yǎng)法現(xiàn)在較少使用。

（3）血清學(xué)檢驗(yàn)血清學(xué)檢驗(yàn)是建立在抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生反 應(yīng)這一原理的基礎(chǔ)上，有的反應(yīng)是不可見狀態(tài)，可應(yīng)用補(bǔ)體、溶血 及熒光素、酶和同位素標(biāo)記等指示系統(tǒng)，使其成為可見或可測狀態(tài)。血清學(xué)檢驗(yàn)方法具有嚴(yán)格的特異性和較高的敏感性，在傳染病的診 斷、病原微生物的分類和鑒定以及抗原分析等方面，均具有廣泛的 應(yīng)用。

用已知的抗體，可以對分離的病原微生物進(jìn)行鑒定。相反，通過已知的抗原對康復(fù)雞、隱性感染雞及接種疫苗后的雞的抗體可 以進(jìn)行定性或定量測定。

血清學(xué)檢驗(yàn)方法主要有：①直接凝集試驗(yàn)。細(xì)菌、紅細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)的抗體在 電解質(zhì)參與下，發(fā)生反應(yīng)相互凝集形成團(tuán)塊，這種現(xiàn)象稱凝集反應(yīng)。

按試驗(yàn)方法分為試管法、玻片法、玻板法及微量凝集法等。②間接凝集試驗(yàn)。

將可溶性抗原（或抗體）吸附于與免疫無關(guān) 的小顆粒（載體）的表面，此吸附抗原（或抗體）的載體顆粒與相 應(yīng)的抗體（或抗原）結(jié)合，在有電解質(zhì)存在的適宜條件下發(fā)生凝集 現(xiàn)象，因此稱為間接凝集試驗(yàn)，也稱為被動凝集試驗(yàn)。 常用的載體 有動物紅細(xì)胞，聚苯乙烯乳膠乃至細(xì)胞和活性炭等。

吸附抗原后的 顆粒稱為致敏顆粒。③血凝與血凝抑制試驗(yàn)。

有許多病毒能夠凝集某些動物和人的 紅細(xì)胞，而這種血凝作用可被特異性抗體所抑制。借此，可應(yīng)用標(biāo) 準(zhǔn)病毒懸液測定血清中的相應(yīng)抗體或應(yīng)用特異性抗體鑒定新分離的 病毒。

血凝與血凝抑制試驗(yàn)是診斷雞新城疫的重要手段，按試驗(yàn)方 法分為微量血凝試驗(yàn)、微血凝抑制試驗(yàn)等。④沉淀試驗(yàn)。

可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在有電解質(zhì)存在時 可形成肉眼可見的白色沉淀物，這個過程稱為沅淀反應(yīng)。參與沉淀 反應(yīng)的抗原稱為沉淀原，抗體稱為沉淀素。

沉淀反應(yīng)有液相和固相 之分，液相沉淀反應(yīng)中以環(huán)狀沉淀反應(yīng)最常用，固相沉淀反應(yīng)主要 有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)，瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)與電泳技術(shù)相結(jié)合，又發(fā)展成免疫 電泳技術(shù)。⑤紅細(xì)胞吸附和紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)。

又稱血球吸附和血球吸 附抑制試驗(yàn)。某些病毒如正黏病毒、副黏病毒和痘病毒等，在培養(yǎng) 的細(xì)胞內(nèi)增殖后，可使培養(yǎng)的細(xì)胞吸附某些動物的紅細(xì)胞，而且只 有感染細(xì)胞的表面能吸附紅細(xì)胞，不感染的細(xì)胞不吸附紅細(xì)胞，因 此，可以作為這些病毒增殖的指征。

紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象也可被特異抗 血清所抑制，故對病毒鑒定，尤其是對某些不產(chǎn)生細(xì)胞病變的病毒 來說，常是一個較好的快速鑒定方法。⑥補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。

可溶性抗原，如蛋白質(zhì)、多糖、類脂質(zhì)、病 毒等，與相應(yīng)抗體結(jié)合后，其抗原抗體復(fù)合物可結(jié)合補(bǔ)體，但這一反應(yīng)肉眼無法觀察，如再加人溶血系統(tǒng)，即可通過觀察是否溶血來 判斷反應(yīng)系統(tǒng)是否存在相應(yīng)抗原抗體，參與補(bǔ)體結(jié)合的抗體稱為補(bǔ) 體結(jié)合抗體。 ⑦中和試驗(yàn)。

病毒與相應(yīng)的中和抗體結(jié)合后，可使病毒喪失感 染力。中和反應(yīng)不僅具有高度的種、型特異性，而且一定量的病毒 必須有相應(yīng)量的中和抗體才能被中和。

因此中和試驗(yàn)不僅可用于病 毒種類鑒定，還可用于中和抗體的效價滴定。⑧免疫標(biāo)記技術(shù)。

利用某些能夠通過某種特殊理化因素而易于 檢測的物質(zhì)標(biāo)記抗體，這些被標(biāo)記的抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合，通。