蛋白除鹽方法(蛋白質(zhì)除鹽的方法有哪幾種簡述其原理)

1.蛋白質(zhì)除鹽的方法有哪幾種簡述其原理

蛋白質(zhì)在用鹽析沉淀分離后 需要將蛋白質(zhì)中的鹽除去 常用的辦法是透析 即把蛋白質(zhì)溶液裝入秀析袋內(nèi)（常用的是玻璃紙）用緩沖液進(jìn)行透析 并不斷的更換緩沖液 因透析所需時(shí)間較長 所以最好在低溫中進(jìn)行 此外也可用葡萄糖凝膠G-25或G-50過柱的辦法除鹽 所用的時(shí)間就比較短

2、等電點(diǎn)沉淀法

蛋白質(zhì)在靜電狀態(tài)時(shí)顆粒之間的靜電斥力最小 因而溶解度也最小 各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)有差別 可利用調(diào)節(jié)溶液的PH達(dá)到某一蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)使之沉淀 但此法很少單獨(dú)使用 可與鹽析法結(jié)合用

3、用與水可混溶的有機(jī)溶劑 甲醇 乙醇或丙酮 可使多數(shù)蛋白質(zhì)溶解度降低并析出 此法分辨力比鹽析高 但蛋白質(zhì)較易變性 應(yīng)在低溫下進(jìn)行

2.蛋白質(zhì)水解有哪些方法

酸法水解：（通常以5-10倍的20%HCl煮沸回流16h-20h，或加壓于120攝氏度水解12h，可將蛋白質(zhì)水解成氨基酸）優(yōu)點(diǎn)：水解徹底，水解的最終產(chǎn)物是L-氨基酸，沒有旋光異構(gòu)體的產(chǎn)生。缺點(diǎn)：營養(yǎng)價(jià)值較高的色氨酸幾乎全部被破環(huán)，而與含醛基的化合物（如糖）作用生成一種黑色物質(zhì)，稱為腐黑質(zhì)，因此水解液呈黑色。此外，含羥基的絲氨酸、蘇氨酸、洛氨酸也有部分被破壞。此法常用于蛋白質(zhì)的分析與制備。

堿法水解：（可用6摩爾每升NaOH或4摩爾每升氫氧化鋇煮沸6小時(shí)即可完全水解得到氨基酸。優(yōu)點(diǎn)：色氨酸不被破壞，水解液清亮。缺點(diǎn)：水解產(chǎn)生的氨基酸發(fā)生旋光異構(gòu)作用，產(chǎn)物有D-型和L-型兩類氨基酸。D-型氨基酸不能被人體分解利用，因而營養(yǎng)價(jià)值減半；此外，絲氨酸、蘇氨酸、賴氨酸、胱氨酸等大部分被破壞，因此堿水解法一般很少使用。

蛋白酶法水解，優(yōu)點(diǎn)：條件溫和，常溫（36-60攝氏度）\常壓和PH值在2-8時(shí)，氨基酸完全不被破壞，不發(fā)生旋光異構(gòu)現(xiàn)象。缺點(diǎn)：水解不徹底，中間產(chǎn)物較多。根據(jù)水解的程度分（蛋白質(zhì)--膘--胨--多肽--二肽--氨基酸）蛋白質(zhì)煮沸時(shí)可凝固，而膘、胨、肽均不能：蛋白質(zhì)和膘可被飽和的硫酸銨和硫酸鋅沉淀，而胨以下的產(chǎn)物均不能；胨可被磷鎢酸等復(fù)鹽沉淀，而肽類及氨基酸均不能，借此可將產(chǎn)物分開。

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3.脫除蛋白質(zhì)中鹽雜質(zhì)常用方法有哪三種

1.鹽析得到的蛋白質(zhì)中的鹽離子去除，可以用沉淀法去除，也可以用滲析法去除

2.沉淀法原理為離子反應(yīng)

滲析法原理為蛋白質(zhì)溶液為膠體，不能通過半透膜，而離子可以通過半透膜

3.沉淀法方法：加入與該離子可以發(fā)生沉淀反應(yīng)的鹽溶液，又不能帶入雜質(zhì)離子（視情況而定，一般最后加的溶液為可以使雜質(zhì)離子完全沉淀，又可以用加熱的方法除去，如鹽酸）

滲析法方法：1.將溶液裝入半透膜中，

2.將半透膜放入燒杯，

3.用穩(wěn)定緩慢的水流浸沒半透膜，

4.一段時(shí)間后取出半透膜，得到較純的蛋白質(zhì)

4這兩種方法第一種得到的蛋白質(zhì)比第二種純

第一種為化學(xué)方法，第二種為物理方法

4.分離提純蛋白質(zhì)時(shí)常需去鹽,常用去鹽的方法有哪些

蛋白質(zhì)沉淀的定義： 蛋白質(zhì)分子凝聚從溶液中析出的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)沉淀（precipitation），變性蛋白質(zhì)一般易于沉淀，但也可不變性而使蛋白質(zhì)沉淀，在一定條件下，變性的蛋白質(zhì)也可不發(fā)生沉淀。

蛋白質(zhì)沉淀的方法： 鹽析法 ——多用于各種蛋白質(zhì)和酶的分離純化； 在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的中性鹽以破壞蛋白質(zhì)的膠體穩(wěn)定性而使其析出，這種方法稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉、氯化鈉等。

各種蛋白質(zhì)鹽析時(shí)所需的鹽濃度及pH不同，故可用于對(duì)混和蛋白質(zhì)組分的分離。例如用半飽和的硫酸銨來沉淀出血清中的球蛋白，飽和硫酸銨可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出來，鹽析沉淀的蛋白質(zhì)，經(jīng)透析除鹽，仍保證蛋白質(zhì)的活性。

調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液的pH至等電點(diǎn)后，再用鹽析法則蛋白質(zhì)沉淀的效果更好。鹽析法分為兩類，第一類叫Ks分段鹽析法，在一定PH和溫度下通過改變離子強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)，用于早期的粗提液；第二種叫b分段鹽析法，在一定離子強(qiáng)度下通過改變PH和溫度來實(shí)現(xiàn)，用于后期進(jìn)一步分離純化和結(jié)晶。

影響鹽析的因素包括：蛋白質(zhì)濃度、離子強(qiáng)度和類型、PH值、溫度等。針對(duì)溫度這一條，需要強(qiáng)調(diào)：在低離子強(qiáng)度或純水中，蛋白質(zhì)溶解度在一定范圍內(nèi)隨溫度增加而增加。

但在高濃度下，蛋白質(zhì)、酶和多肽類物質(zhì)的溶解度隨溫度上升而下降。在一般情況下，蛋白質(zhì)對(duì)鹽析溫度無特殊要求，可在室溫下進(jìn)行，只有某些對(duì)溫度比較敏感的酶要求在0-四℃進(jìn)行。

使用硫酸銨沉淀蛋白需要注意：硫酸銨中常含有少量的重金屬離子，對(duì)蛋白質(zhì)巰基有敏感作用，使用前必須用H二S處理：將硫酸銨配成濃溶液，通入H二S飽和，放置過夜，用濾紙除去重金屬離子，濃縮結(jié)晶，一00℃烘干后使用。另外，高濃度的硫酸銨溶液一般呈酸性（PH=5.0左右），使用前也需要用氨水或硫酸調(diào)節(jié)至所需PH。

有機(jī)溶劑沉淀法 ——多用于生物小分子、多糖及核酸產(chǎn)品的分離純化； 有機(jī)溶劑的沉淀機(jī)理是降低水的介電常數(shù)，導(dǎo)致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最后析出。該法優(yōu)點(diǎn)在于：一）分辨能力比鹽析法高，即蛋白質(zhì)或其它溶劑只在一個(gè)比較窄的有機(jī)溶劑濃度下沉淀；二）沉淀不用脫鹽，過濾較為容易；三）在生化制備中應(yīng)用比鹽析法廣泛。

但是，在常溫下，有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。例如酒精消毒滅菌就是如此。

因此，操作要求在低溫下進(jìn)行。有機(jī)溶劑的選擇首先是能和水混溶，使用較多的有機(jī)溶劑是乙醇、甲醇、丙酮，還有二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙腈和二-甲基-二，四戊二醇等。

等電點(diǎn)沉淀法 ——此法單獨(dú)應(yīng)用較少，多與其它方法結(jié)合使用； 兩性電解質(zhì)分子上的凈電荷為零時(shí)溶解度最低，不同的兩性電解質(zhì)具有不同的等電點(diǎn)，以此為基礎(chǔ)可進(jìn)行分離。如工業(yè)上生產(chǎn)胰島素時(shí)，在粗提液中先調(diào)PH吧.0去除堿性蛋白質(zhì)，再調(diào)PH三.0去除酸性蛋白質(zhì)。

利用等電點(diǎn)除雜蛋白時(shí)必須了解制備物對(duì)酸堿的穩(wěn)定性，不然盲目使用十分危險(xiǎn)。不少蛋白質(zhì)與金屬離子結(jié)合后，等電點(diǎn)會(huì)發(fā)生偏移，故溶液中含有金屬離子時(shí)，必須注意調(diào)整PH值。

等電點(diǎn)法常與鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法或其他沉淀方法聯(lián)合使用，以提高其沉淀能力。 重金屬鹽沉淀法 ——常用于搶救誤服重金屬鹽中毒的病人； 許多有機(jī)物質(zhì)包括蛋白在內(nèi)，在堿性溶液中帶負(fù)電荷，能與金屬離子形成沉淀。

根據(jù)有機(jī)物與它們之間的作用機(jī)制，可分為羧酸、胺及雜環(huán)等含氮化合物類，如銅鋅鎘；親羧酸疏含氮化合物類，如鈣鎂鉛；親硫氫基化合物類，如汞銀鉛。蛋白質(zhì)-金屬離子復(fù)合物的重要性質(zhì)是它們的溶解度對(duì)溶液的介電常數(shù)非常敏感，調(diào)整水溶液的介電常數(shù)（如加入有機(jī)溶劑），即可沉淀多種蛋白。

沉淀的條件以pH稍大于等電點(diǎn)為宜。重金屬沉淀的蛋白質(zhì)常是變性的，但若在低溫條件下，并控制重金屬離子濃度，也可用于分離制備不變性的蛋白質(zhì)。

臨床上利用蛋白質(zhì)能與重金屬鹽結(jié)合的這種性質(zhì)，搶救誤服重金屬鹽中毒的病人，給病人口服大量蛋白質(zhì)，然后用催吐劑將結(jié)合的重金屬鹽嘔吐出來解毒。

5.蛋白質(zhì)分離純化的四種方法

1、鹽析法：

鹽析法的根據(jù)是蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中，溶解度會(huì)隨鹽濃度的增高而上升，但當(dāng)鹽濃度增高到一定數(shù)值時(shí)，使水活度降低，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質(zhì)分子間互相凝聚并從溶液中析出。

2、有機(jī)溶劑沉淀法：

有機(jī)溶劑能降低蛋白質(zhì)溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機(jī)溶劑的介電常數(shù)比水小，導(dǎo)致溶劑的極性減小。

3、蛋白質(zhì)沉淀劑：

蛋白質(zhì)沉淀劑僅對(duì)一類或一種蛋白質(zhì)沉淀起作用，常見的有堿性蛋白質(zhì)、凝集素和重金屬等。

4、聚乙二醇沉淀作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀作用。

擴(kuò)展資料：

蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是有機(jī)大分子，是構(gòu)成細(xì)胞的基本有機(jī)物，是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者。沒有蛋白質(zhì)就沒有生命。氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動(dòng)緊密聯(lián)系在一起的物質(zhì)。

機(jī)體中的每一個(gè)細(xì)胞和所有重要組成部分都有蛋白質(zhì)參與。蛋白質(zhì)占人體重量的16%~20% ，即一個(gè)60kg重的成年人其體內(nèi)約有蛋白質(zhì)9.6~12kg。

人體內(nèi)蛋白質(zhì)的種類很多，性質(zhì)、功能各異，但都是由20多種氨基酸（Amino acid）按不同比例組合而成的，并在體內(nèi)不斷進(jìn)行代謝與更新。

參考資料來源：百度百科-蛋白質(zhì)分離純化

6.除蛋白都有哪些方法

啤酒和酒精濃度高的飲料中的泡沫，其苦味成分中能去除腦內(nèi)積聚的蛋白質(zhì)“Aβ”。

啤酒泡沫本身的苦味成分“異α-酸”能激活腦內(nèi)的免疫細(xì)胞——“小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞”， 有除去Aβ的作用。服食過異α-酸餌料的老鼠和普通的老鼠相比，Aβ約減少5成，認(rèn)知功能也得到提高。

擴(kuò)展資料： 引起尿蛋白的原因 腎小球性蛋白尿，無論是原發(fā)還是繼抓腎小球損害，是臨床上最常見的蛋白質(zhì)。腎小球?yàn)V過膜有病變，基底膜增厚，孔隙增大，蛋白漏出增加，甚至分子量更大的球蛋白亦可漏出。

腎小管性蛋白尿 是指腎小球?yàn)V過正常，腎小管重吸收障礙，最常見各種原因引起的間質(zhì)性腎炎，腎靜脈血栓形成，腎動(dòng)脈栓塞，重金屬鹽類中毒等。此類尿蛋白量較腎小球性蛋白量少。

腎組織性蛋白尿又稱分泌性蛋白尿。腎小球?yàn)V過功能和腎小管重吸收功能均正常，由于尿液形成過程中，腎小管代謝產(chǎn)生的蛋白質(zhì)滲入尿液中所致，如腎小管拌和遠(yuǎn)曲腎小管產(chǎn)生的Tamm-Horsfall蛋白以蛋白（一種大分子糖蛋白），此種蛋白易形成管型和結(jié)石核心。

參考資料：人民網(wǎng)-啤酒苦味能有效預(yù)防老年癡呆癥 可去除多余蛋白質(zhì)。

7.蛋白質(zhì)的純化方法有那些呢

蛋白質(zhì)分離純化的一般程序可分為以下幾個(gè)步驟：

（一）材料的預(yù)處理及細(xì)胞破碎

分離提純某一種蛋白質(zhì)時(shí)，首先要把蛋白質(zhì)從組織或細(xì)胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài)，不喪失活性。所以要采用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒔M織和細(xì)胞破碎。常用的破碎組織細(xì)胞的方法有：

1. 機(jī)械破碎法

這種方法是利用機(jī)械力的剪切作用，使細(xì)胞破碎。常用設(shè)備有，高速組織搗碎機(jī)、勻漿器、研缽等。

2. 滲透破碎法

這種方法是在低滲條件使細(xì)胞溶脹而破碎。

3. 反復(fù)凍融法

生物組織經(jīng)凍結(jié)后，細(xì)胞內(nèi)液結(jié)冰膨脹而使細(xì)胞脹破。這種方法簡單方便，但要注意那些對(duì)溫度變化敏感的蛋白質(zhì)不宜采用此法。

4. 超聲波法

使用超聲波震蕩器使細(xì)胞膜上所受張力不均而使細(xì)胞破碎。

5. 酶法

如用溶菌酶破壞微生物細(xì)胞等。

（二） 蛋白質(zhì)的抽提

通常選擇適當(dāng)?shù)木彌_液溶劑把蛋白質(zhì)提取出來。抽提所用緩沖液的pH、離子強(qiáng)度、組成成分等條件的選擇應(yīng)根據(jù)欲制備的蛋白質(zhì)的性質(zhì)而定。如膜蛋白的抽提，抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑（十二烷基磺酸鈉、tritonX-100等），使膜結(jié)構(gòu)破壞，利于蛋白質(zhì)與膜分離。在抽提過程中，應(yīng)注意溫度，避免劇烈攪拌等，以防止蛋白質(zhì)的變性。

（三）蛋白質(zhì)粗制品的獲得

選用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑺牡鞍踪|(zhì)與其它雜蛋白分離開來。比較方便的有效方法是根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的差異進(jìn)行的分離。常用的有下列幾種方法：

1. 等電點(diǎn)沉淀法

不同蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同，可用等電點(diǎn)沉淀法使它們相互分離。

2. 鹽析法

不同蛋白質(zhì)鹽析所需要的鹽飽和度不同，所以可通過調(diào)節(jié)鹽濃度將目的蛋白沉淀析出。被鹽析沉淀下來的蛋白質(zhì)仍保持其天然性質(zhì)，并能再度溶解而不變性。

3. 有機(jī)溶劑沉淀法

中性有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮，它們的介電常數(shù)比水低。能使大多數(shù)球狀蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度降低，進(jìn)而從溶液中沉淀出來，因此可用來沉淀蛋白質(zhì)。此外，有機(jī)溶劑會(huì)破壞蛋白質(zhì)表面的水化層，促使蛋白質(zhì)分子變得不穩(wěn)定而析出。由于有機(jī)溶劑會(huì)使蛋白質(zhì)變性，使用該法時(shí)，要注意在低溫下操作，選擇合適的有機(jī)溶劑濃度。

（四）樣品的進(jìn)一步分離純化

用等電點(diǎn)沉淀法、鹽析法所得到的蛋白質(zhì)一般含有其他蛋白質(zhì)雜質(zhì)，須進(jìn)一步分離提純才能得到有一定純度的樣品。常用的純化方法有：凝膠過濾層析、離子交換纖維素層析、親和層析等等。有時(shí)還需要這幾種方法聯(lián)合使用才能得到較高純度的蛋白質(zhì)樣品。

8.常用蛋白質(zhì)沉淀方法有哪些

一般最常見的是鹽析沉淀，就是在蛋白質(zhì)溶液中加入一定量的硫酸銨，蛋白質(zhì)便會(huì)沉淀下來，不同蛋白沉淀所需要的硫酸銨濃度不一樣，通過這個(gè)方法也可以對(duì)蛋白進(jìn)行初步的純化分離。

再有就是等電沉淀，通過調(diào)節(jié)蛋白溶液的pH，使其剛好達(dá)到目標(biāo)蛋白的等電點(diǎn)，這時(shí)候蛋白分子將不帶有電荷，在相互碰撞聚集過程中沉淀下來。與之類似的有通過加沉淀劑或絮凝劑比如明礬之類的，也可以沉淀蛋白。

另外還有就是親和沉淀，利用生物分子親和力，比如抗原抗體親和、酶與底物親和等性質(zhì)，將配對(duì)的另一半固定在某些介質(zhì)，比如小磁珠上，就能將溶液里面的目的蛋白抓住沉淀下來。