茚三酮手印(茚三酮顯色液容易氧化嗎)
1.茚三酮顯色液容易氧化嗎
1,pH值的影響。
樓主在實(shí)驗中兩次用到緩沖液調節pH=5。5，但是在最后顯色的一步是在加熱的狀況下進(jìn)行的。
沒(méi)有在反應過(guò)程中檢測pH值的變化，導致顏色不是Ruhemann紫。而茚三酮與氨基酸作用得到的藍紫色物質(zhì)是一種銨鹽。
從結構上看，季銨和還原的酮的氧連在一起，這本來(lái)就是個(gè)亞穩定結構。 季銨鹽容易把H+給O得到一個(gè)羥基，所以很依賴(lài)pH的變化。
那么你的溶液不停變化吸光度就能解釋了，是由于Ruhemann紫因pH不適不斷釋放NH3或NH4+的結果。這個(gè)情況一般是由于pH值過(guò)大引起的。
2，沒(méi)有反應完全。在進(jìn)行樣品沉降時(shí)其實(shí)很有可能殘留了許多蛋白質(zhì)和多肽。
多肽和蛋白質(zhì)也能形成這個(gè)反應，但是肽越大反應就越不靈敏。所以有可能是第三產(chǎn)物，中間得到的醛可能會(huì )影響了這個(gè)反應，可能會(huì )生成其他帶有顏色的副產(chǎn)物干擾紫色的呈現。
但是在逐漸反應后，醛由于大基團逐漸分解對反應的影響越來(lái)越小，這個(gè)干擾也就變小了，實(shí)際的紫色濃度自然比原來(lái)要弱許多。 以上只是個(gè)人推測，沒(méi)有依據。
建議你用其它方法測定，比如用茚三酮作顯色劑的紙層析色譜，不僅可以計算總量，還可以初步估計氨基酸種數。
2.得了周?chē)窠?jīng)損傷應該注意什么?
根據外傷史、臨床癥狀和檢查，判斷神經(jīng)損傷的部位、性質(zhì)和程度。
一、臨床檢查 1。傷部檢查 檢查有無(wú)傷口，如有傷口，應檢查其范圍和深度、軟組織損傷情況以及有無(wú)感染。
查明槍彈傷或彈片傷的徑路，有無(wú)血管傷、骨折或脫臼等。如傷口已愈合，觀(guān)察瘢痕情況和有無(wú)動(dòng)脈瘤或動(dòng)靜脈瘺形成等。
2。肢體姿勢 觀(guān)察肢體有無(wú)畸形。
橈神經(jīng)傷有腕下垂；尺神經(jīng)傷有爪狀手，即第4、5指的掌指關(guān)節過(guò)伸，指間關(guān)節屈曲；正中神經(jīng)傷有猿手；腓總神經(jīng)傷有足下垂等。如時(shí)間過(guò)久，因對抗肌肉失去平衡，可發(fā)生關(guān)節攣縮等改變。
3。運動(dòng)功能的檢查 根據肌肉癱瘓情況判斷神經(jīng)損傷及其程度，用六級法區分肌力。
0級——無(wú)肌肉收縮； 1級——肌肉稍有收縮； 2級——不對抗地心引力方向，能達到關(guān)節完全動(dòng)度； 3級——對抗地心引力方向，能達到關(guān)節完全動(dòng)度，但不能加任何阻力； 4級——對抗地心引力方向并加一定阻力，能達到關(guān)節完全動(dòng)度； 5級——正常。 周?chē)窠?jīng)損傷引起肌肉軟癱，失去張力，有進(jìn)行性肌肉萎縮。
依神經(jīng)損傷程度不同，肌力有上述區別，在神經(jīng)恢復過(guò)程中，肌萎縮逐漸消失，如堅持鍛煉可有不斷進(jìn)步。 4。
感覺(jué)功能的檢查 檢查痛覺(jué)、觸覺(jué)、溫覺(jué)、兩點(diǎn)區別覺(jué)及其改變范圍，判斷神經(jīng)損傷程度。一般檢查痛覺(jué)及觸覺(jué)即可。
注意感覺(jué)供給區為單一神經(jīng)或其它神經(jīng)供給重疊，可與健側皮膚比較。實(shí)物感與淺觸覺(jué)為精細感覺(jué)，痛覺(jué)與深觸覺(jué)為粗感覺(jué)。
神經(jīng)修復后，粗感覺(jué)恢復較早較好。 感覺(jué)功能障礙亦可用六級法區別其程度： 0級——完全無(wú)感覺(jué)； 1級——深痛覺(jué)存在； 2級——有痛覺(jué)及部分觸覺(jué)； 3級——痛覺(jué)和觸覺(jué)完全； 4級——痛、觸覺(jué)完全，且有兩點(diǎn)區別覺(jué)，惟距離較大； 5級——感覺(jué)完全正常。
5。營(yíng)養改變 神經(jīng)損傷后，支配區的皮膚發(fā)冷、無(wú)汗、光滑、萎縮。
坐骨神經(jīng)傷常發(fā)生足底壓瘡，足部?jì)鰝o(wú)汗或少汗區一般符合感覺(jué)消失范圍。
可作出汗試驗，常用的方法有（1）碘—淀粉試驗：在手指掌側涂2%碘溶液，干后涂抹一層淀粉，然后用燈烤，或飲熱水后適當運動(dòng)使病人出汗，出汗后變?yōu)樘m色。 （2）茚三酮（Ninhydrin）指印試驗；將患指或趾在干凈紙上按一指印（亦可在熱飲發(fā)汗后再按）。
用鉛筆畫(huà)出手指足趾范圍，然后投入1%茚三酮溶液中。如有汗液即可在指印處顯出點(diǎn)狀指紋。
用硝酸溶液浸泡固定，可長(cháng)期保存。因汗中含有多種氨基酸，遇茚三酮后變?yōu)樽仙?/p>
通過(guò)多次檢查對比，可觀(guān)察神經(jīng)恢復情況。 6。
反射 根據肌肉癱瘓情況，腱反射消失或減退。 7。
神經(jīng)近側斷端有假性神經(jīng)瘤，常有劇烈疼痛和觸痛，觸痛放散至該神經(jīng)支配區。 8。
神經(jīng)干叩擊試驗（Tinel征） 當神經(jīng)損傷后或損傷神經(jīng)修復后，在損傷平面或神經(jīng)生長(cháng)所達到的部位，輕叩神經(jīng)，即發(fā)生該神經(jīng)分布區放射性麻痛，稱(chēng)Tinel征陽(yáng)性。 二、電生理檢查 通過(guò)肌電圖及誘發(fā)電位檢查，判斷神經(jīng)損傷范圍、程度、吻合后恢復情況及預后。
3.比色法操作的注意事項是什么
噻唑藍（MTT）比色法操作注意事項
噻唑藍（MTT）：四唑鹽
1. 原理：
MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長(cháng)的方法.活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶干水的藍紫色產(chǎn)物，并沉淀在細胞中，而死細胞沒(méi)有這種功能。二甲亞砜（DMSO）能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物，溶液顏色深淺與活細胞數成正比。
2. 優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單快速、靈敏、經(jīng)濟
3. 缺點(diǎn)：由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測。這不僅使工作量增加，也會(huì )對實(shí)驗結果的準確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲的有機溶劑對實(shí)驗者也有損害。
4. 應用：新藥篩選、細胞毒牲試驗、腫瘤放射敏感性實(shí)驗等
5. MTT主要有兩個(gè)用途
1）藥物（也包括其他處理方式如放射線(xiàn)照射）對體外培養的細胞毒性的測定；
2） 細胞增殖及細胞活性測定。
6. 比色法操作注意事項
1） 選擇適當的細胞接種濃度，保證細胞培養結束時(shí)濃度不至于過(guò)滿(mǎn)。
2） 種板技術(shù)：均勻。
3） 實(shí)驗時(shí)應設置調零孔，溶媒孔，加藥孔。
調零孔：培養基、MTT、DMSO。（無(wú)細胞）
溶媒孔：培養液、MTT、DMSO、細胞、溶酶。
加藥孔：培養液、MTT、DMSO、細胞、不同濃度的藥物。
（一般5-7個(gè)梯度，設3-5個(gè)復孔）
4）避免血清干擾：一般選小于10%胎牛血清的培養液進(jìn)行。
5）邊緣效應：周邊孔加入PBS。
6)MTT的配置： MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液。4℃下避光保存2周。
7）孔板的重復利用（1.做完MTT后用大水流盡量將板沖凈，然后用洗衣粉水泡幾個(gè)小時(shí)（小心最好讓洗衣粉先化開(kāi)）。2.用自來(lái)水沖凈洗衣粉水，倒扣晾
干.3.重鉻酸鉀加濃硫酸配成的酸液中浸泡過(guò)夜泡洗液（六小時(shí)以上即可）后自來(lái)水洗凈（20次左右）每個(gè)孔都要處理4.用去離子水沖洗3遍，雙蒸水沖洗3
遍，烤干5.超凈臺中紫外線(xiàn)照射2個(gè)小時(shí)左右，就可以用了，不可以高壓。或泡酸過(guò)夜，dd水沖洗干凈，烘干或者晾干后紫外照射30min以上即可使用。
8)MTT法只能用來(lái)檢測細胞相對數和相對活力，但不能測定細胞絕對數。
9）在用酶標儀檢測結果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗結果的線(xiàn)性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內。
10)MTT有致癌性，用的時(shí)候小心，有條件最好帶那種透明的簿膜手套。
11）配成的MTT需要無(wú)菌，MTT對菌很敏感；往96孔板加時(shí)不避光也沒(méi)有關(guān)系，畢竟時(shí)間較短，或者你不放心的時(shí)候可以操作臺上的照明燈關(guān)掉。
4.指紋的顯現主要有什么方法
求指紋顯現方法有哪些？
1人回答
ssofa
高粉答主
2018-12-26
繁雜信息太多，你要學(xué)會(huì )辨別
關(guān)注謝謝你的關(guān)注
指紋顯現方法有：
一.光學(xué)識別技術(shù)
借助光學(xué)技術(shù)采集指紋是歷史最久遠、使用最廣泛的技術(shù)。將手指放在光學(xué)鏡片上，手指在內置光源照射下，用棱鏡將其投射在電荷耦合器件（CCD） 上，進(jìn)而形成脊線(xiàn)（指紋圖像中具有一定寬度和走向的紋線(xiàn)）呈黑色、谷線(xiàn)（紋線(xiàn)之間的凹陷部分）呈白色的數字化的、可被指紋設備算法處理的多灰度指紋圖像。
二.溫差感應式識別技術(shù)
它的優(yōu)點(diǎn)是可在0.1s內獲取指紋圖像，而且傳感器體積和面積最小，即通常所說(shuō)的滑動(dòng)式指紋識別儀就是采用該技術(shù)。缺點(diǎn)是：受制于溫度局限，時(shí)間一長(cháng)，手指和芯片就處于相同的溫度了。
三.半導體硅感技術(shù)（電容式技術(shù)）
半導體電容傳感器根據指紋的嵴和峪與半導體電容感應顆粒形成的電容值大小不同，來(lái)判斷什么位置是嵴什么位置是峪。其工作過(guò)程是通過(guò)對每個(gè)像素點(diǎn)上的電容感應顆粒預先充電到某一參考電壓。
5.用茚三酮法測蛋白水解度應該怎樣做
如果已做完標線(xiàn)，可以按下列公式進(jìn)行計算：
注意：將圖片放大，看得更清晰。公式中DH即為產(chǎn)物水解度（Degree of hydrolysis,DH）， 用于衡量蛋白質(zhì)的水解程度，定義為蛋白質(zhì)水解過(guò)程中被裂解的肽鍵數h(mmol/g蛋白質(zhì))與給定蛋白質(zhì)的總肽鍵數hhot (mmol/g蛋白質(zhì))。
補充：
1. 7.8 mmol/g是給定蛋白質(zhì)即大豆蛋白質(zhì)的總肽鍵數，以hhot(hot為h的右下標)表示。
2. 操作與計算：
(1)標準曲線(xiàn)的繪制 （因已做完，故略去）
(2)水解蛋白液中-NH2基的測定（茚三酮法）：取水解蛋白液0.50 mL定容至50 mL，取0.40 mL稀釋液于試管中并加入1.60 mL蒸餾水、1.00 mL顯色劑，混勻后置沸水浴中加熱15 min，同時(shí)作空白試驗。以后操作同標準曲線(xiàn)。利用標準曲線(xiàn)計算水解蛋白液-NH2的含量（μmol/mL）。
(3)水解蛋白液中蛋白質(zhì)含量的測定：取1.00 mL水解液進(jìn)行濕法消化處理，然后在蒸餾儀上蒸餾進(jìn)行人工滴定定氮，蛋白質(zhì)的含量表示為N*6.25 mg/mL。
(4)結果計算：原料蛋白質(zhì)中存在游離的-NH2基，在計算時(shí)要考慮它的影響，否則計算的DH值偏大。
