測定旋光度應(測定液體旋光度時(shí),應注意哪些問(wèn)題)
1.測定液體旋光度時(shí),應注意哪些問(wèn)題
旋光儀是用來(lái)測定光學(xué)活性物質(zhì)旋光能力大小和方向的儀器。光學(xué)活性物質(zhì)可以旋轉偏振光平面，其大小和方向除了與該物質(zhì)結構有關(guān)外，還與測定時(shí)的溫度、所用光的波長(cháng)、溶液的濃度和溶劑、旋光管的長(cháng)度等有關(guān)。
一般單色光源用鈉光燈，波長(cháng)為589nm，以D表示。規定以每毫升溶液所含溶質(zhì)的克數作為質(zhì)量濃度的單位。由旋光儀測得旋光角度后，可以下式計算旋光度：α為用旋光儀測得的旋光度；c為溶液的質(zhì)量濃度（g/ml）;l為旋光管的長(cháng)度/dm;t為測定時(shí)溫度（℃），λ為測定所用光波波長(cháng)（鈉光以D表示）。
光活性物質(zhì)為液體時(shí)，則以密度ρ（g/ml）代替c，即若以100ml溶液含溶質(zhì)的克數，則，如果糖的水溶液，溶液濃度為5g/100ml，在1dm旋光管中測得旋光角度為-4.64°，則：書(shū)寫(xiě)旋光度時(shí)，除注明溫度，光波波長(cháng)外，在數據后的括號內，注明其質(zhì)量百分濃度和配制溶液用的溶劑。
旋光性的維相描述
旋光性，可以用左旋光和右旋光具有不同傳播速度維相地進(jìn)行描述.任何偏正光都可以看成左旋光和右旋光的疊加.把左右旋的光疊加成偏正光時(shí)，偏正方向跟兩種光的位相差有關(guān)系.如果兩種光傳播速度不同，就會(huì )產(chǎn)生附加的維相差，導致偏正光旋轉.
旋光性和晶體雙折射的類(lèi)比
雙折射晶體可以將偏振光變?yōu)闄E圓偏振光，或者其他方向的偏振光，將兩塊很薄的雙折射晶體以比較隨意的方向疊加（夾角為ψ），則疊加結果破壞空間反演不變性。
2.旋光儀的正確使用要注意什么
旋光儀的使用及注意事項： a.測定前應將儀器及樣品置20℃ 士0.5℃ 的恒溫室中或規定溫度的恒溫室中，也可用恒溫水浴保持樣品室或樣品測試管恒溫lh以上，特別是一些對溫度影響大的旋光性物質(zhì)，尤為重要。
b.未開(kāi)電源以前，應檢查樣品室內有無(wú)異物，鈉光燈源開(kāi)關(guān)是否在規定位置，示數開(kāi)關(guān)是否在關(guān)的位置，儀器放置位置是否合適，鈉光燈啟輝后，儀器不要再搬動(dòng)。 c. 開(kāi)啟鈉光燈后，正常起輝時(shí)間至少20min，發(fā)光才能穩定，測定時(shí)鈉光燈盡量采用直流供電，使光亮穩定。
如有極性開(kāi)關(guān)，應經(jīng)常于關(guān)機后改變極性，以延長(cháng)鈉燈的使用壽命。 d.測定前，儀器調零時(shí)，必須重復按動(dòng)復測開(kāi)關(guān)，使檢偏鏡分別向左或向右偏離光學(xué)零位。
通過(guò)觀(guān)察左右復測的停點(diǎn)，可以檢查儀器的重復性和穩定性。如誤差超過(guò)規定，儀器應維修后再使用。
e.將裝有蒸餾水或空白溶劑的測定管，放入樣品室，測定管中若混有氣泡，應先使氣泡浮于凸頸處，通光面兩端的玻璃，應用軟布擦干。測定時(shí)應盡量固定測定管放置的位置及方向，做好標記，以減少測定管及蓋玻片應力的誤差。
f.同一旋光性物質(zhì)，用不同溶劑或在不同pH值測定時(shí)，由于締合、溶劑化和解離的情況不同，而使比旋度產(chǎn)生變化，甚至改變旋光方向，因此必須使用規定的溶劑。 g.渾濁或含有小顆粒的溶液不能測定，必須先將溶液離心或過(guò)濾，棄去初濾液測定。
有些見(jiàn)光后旋光度改變很大的物質(zhì)溶液，必須注意避光操作。有些放置時(shí)間對旋光度影響較大的，也必須在規定時(shí)間內測定讀數。
h.測定空白零點(diǎn)或測定供試液停點(diǎn)時(shí)，均應讀取讀數三次，取平均值。嚴格的測定，應在每次測定前，用空白溶劑校正零點(diǎn)，測定后，再用試劑核對零點(diǎn)有無(wú)變化，如發(fā)現零點(diǎn)變化很大，則應重新測定。
i.測定結束時(shí)，應將測定管洗凈晾干放回原處。儀器應避免灰塵放置于干燥處，樣品室內可放少許干燥劑防潮。
3.旋光度法測葡萄糖濃度實(shí)驗的注意事項
1.對觀(guān)察者來(lái)說(shuō)，偏振光的振動(dòng)平面若是順時(shí)針旋轉，則為右旋（+），這樣測得的+α，也可以代表α ±（n*180）°的所有值。如讀數為+38°，實(shí)際上還可以是218°、398°、-142°等角度。因此，在測定未知物的旋光度時(shí)，至少要做一次改變濃度或者液層厚度的測定。如觀(guān)察值為+38°，在稀釋五倍后，所得讀數為+7.6°，則此未知物的旋光度α應該為+7.6°*5=+38°。
2.儀器應放在空氣流通和溫度適宜的地方，并不宜低放，以免光學(xué)零部件、偏振片與受潮發(fā)霉及性能衰退。
3. 試管使用后，應及時(shí)用水或蒸餾水沖洗干凈，揩干藏好。
4. 鏡片不能用不潔或硬質(zhì)布、紙去揩，以免鏡片表面產(chǎn)生道子等。
5. 儀器不用時(shí)，應將儀器放入箱內或用塑料罩罩上，以防灰塵侵入。
6. 儀器、鈉光燈管、試管等裝箱時(shí)，應按規定位置放置，以免壓碎。
7. 不懂裝校方法，切勿隨便拆動(dòng)，以免由于不懂校正方法而無(wú)法裝校好。
4.使用分光光度計測定吸光度值應該注意什么
注意事項：1、該儀器應放在干燥的房間內，使用時(shí)放置在堅固平穩的工作臺上，室內照明不宜太強。
熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩定。2、使用儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。
在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線(xiàn)應牢固，通電也要良好，各個(gè)調節旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開(kāi)關(guān)。3、在儀器尚未接通電源時(shí)，電表指針必須于“0”刻線(xiàn)上，不是這種情況可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調節。
4、若大幅度改變測試波長(cháng)，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100”點(diǎn)，然后再測量。5、指針式儀器在未接通電源時(shí)，電表的指針必須位于零刻度上，不是這種情況，需進(jìn)行機械調零。
6、比色皿使用完畢后，立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。擴展資料：分光光度計操作中故障原因及處理方法1、光門(mén)不能完全關(guān)閉。
解決方法：修復光門(mén)部件，使其完全關(guān)閉。2、透過(guò)率“100%”旋到底了。
解決方法：重新調整“100%”旋鈕。3、儀器嚴重受潮。
解決方法：可打開(kāi)光電管暗盒，用電吹風(fēng)吹上一會(huì )兒使其干燥，并更換干燥劑。4、電路故障。
解決方法：送修理部門(mén)，檢修電路。5、光能量不夠。
解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈（盡管燈還亮）。6、比色皿架未落位。
解決方法：調整比色皿架使其落位。7、光電轉換部分老化。
解決方法：更換部件。8、電路故障。
解決方法：調修電路。9、比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。
解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。10、電路故障（電壓、光電接收、放大電路）。
解決方法：送修。11、預熱時(shí)間不夠。
解決方法：延長(cháng)預熱時(shí)間至30分鐘左右（部分儀器由于老化等原因，長(cháng)時(shí)間處于工作狀態(tài)時(shí)，也會(huì )工作不穩）。12、光電管內的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。
解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。13、環(huán)境振動(dòng)過(guò)大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。
解決方法：改善工作環(huán)境。參考資料來(lái)源：百度百科-分光光度計。
