種蒜的方法及過程,青霉素發(fā)酵的方法和步驟是什么？

牛津的一所病理學(xué)院主任，澳大利亞籍的弗洛瑞（Howard Florey）對溶菌酶很感興趣，在這方面進(jìn)行了廣泛的研究種蒜的方法及過程。1938年的夏天，他的助手，一名從希特勒德國逃出的青年猶太難民錢恩（Ernst Chain），在文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)了1929年弗萊明發(fā)表的關(guān)于青霉素的文章，經(jīng)弗洛瑞同意，他決定對青霉素進(jìn)行深入的研究。錢恩發(fā)現(xiàn)，青霉素可以用有機(jī)溶劑（乙醚）從霉菌的培養(yǎng)液中提取出來。從這種性質(zhì)看，他感到青霉素不大可能是一種酶，而是小分子化合物（酶通常是蛋白質(zhì)，是由許多種氨基酸形成的有機(jī)大分子，它們不可能溶解于像乙醚這樣的有機(jī)溶劑中）。但e78988e69d他也遇到了同樣的麻煩，青霉素的性質(zhì)很不穩(wěn)定，不容易從溶液中得到。但這并沒有使他氣餒，而是更引起了他的研究興趣。

第二次世界大戰(zhàn)爆發(fā)后，需要大量和多種的殺菌消炎藥物，特別是在有膿血存在下仍有殺菌作用的藥物，而磺胺類藥物在這種情況下是無效的。青霉素在有膿血存在下，仍有殺菌作用，因此它成為深入研究的對象。錢恩從醫(yī)學(xué)研究委員會和洛克菲勒基金會得到資助。在弗洛瑞的指導(dǎo)下，整個病理學(xué)院都投入到對青霉素的研究中，使研究的步伐加快了。為了能得到更多的青霉素，他們加大了培養(yǎng)量，并用圓柱形的大瓶子進(jìn)行培養(yǎng)。然而結(jié)果是，青霉素的生成量并沒有增加多少。后來，他們發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液在 1.5 cm的深度時，青霉素的生成量最多，培養(yǎng)液太深反而不行，因為青霉菌的生長需要氧氣。這樣他們就把瓶子橫放著來培養(yǎng)，可是瓶子是圓柱形的，橫放著要滾動，同時這種圓柱形的瓶子，放 1.5 cm深的培養(yǎng)液，有效體積太小了，于是又改成扁平的瓶子。最后，他們設(shè)計了一種陶瓷的、像醫(yī)院病人在病床上使用的便盆樣子的培養(yǎng)器皿。錢恩等人在研究中發(fā)現(xiàn)，可以用極弱的堿性水溶液將青霉素從乙醚溶液中提取出來。這樣，就可以用比乙醚液體積小得多的微堿性水溶液把青霉素從乙醚液中提取出來，達(dá)到濃縮的目的。他們設(shè)計了機(jī)械的逆流提取設(shè)備，那是一根比較粗的、兩端密封的玻璃管，在兩端各有兩個側(cè)管，讓經(jīng)過濾除青霉菌并酸化后的培養(yǎng)液從玻璃管上端的一個側(cè)管向下流，同時讓乙醚自玻璃管下端的一個側(cè)管向上流動，兩種液體在玻璃管中混合。因為乙醚的相對密度比水輕許多，所以青霉素被乙醚提取后，便隨乙醚液從玻璃管上端的另一側(cè)管流出來。然后還是用這種設(shè)備，讓微堿性的水溶液從玻璃管上端的一個側(cè)管向下流，同時讓提取了青霉素的乙醚液從玻璃管下端的一個側(cè)管向上流。這樣青霉素就從乙醚中轉(zhuǎn)移到微堿性的水溶液中。但是，錢恩等人沒有辦法把極不穩(wěn)定的青霉素從水溶液中分離出來。后來他試用了1935年瑞典人發(fā)明的冷凍干燥法。此法是將水溶液在低溫下冷凍結(jié)冰，然后在冷凍及高真空下使水在固體狀態(tài)下升華，溶液中的固體就剩余在容器中。這樣他們就把微堿性青霉素水溶液濃縮為棕色粉末。青霉素在非常低的溫度下，沒有被分解破壞。他們對這種棕色粉末的效價進(jìn)行測定，1mg棕色粉末相當(dāng)于5個牛津單位（這是他們自己制定的效價單位。他們把1mL培養(yǎng)液中的青霉素用鏈球菌①做試驗，把對它的抑菌能力定為1個牛津單位）。