通過哪些方法可以觀察到細菌的細胞壁(細菌鑒定辦法,常見細菌的鑒定辦法就可以)

1.細菌鑒定辦法有哪些,常見細菌的鑒定辦法就可以

細菌的鑒定通過分離培養(yǎng)獲得的病原菌，必須達到不含有其他微生物的純培養(yǎng)程度，才能進行系統(tǒng)鑒定。

系統(tǒng)鑒定就是通過病原菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長特性、抗原性和病原性等檢測，并用已知標準免疫血清確定分離細菌的屬、種和型。微生物鑒定的程序通常是根據(jù)其形態(tài)，生長、生化特性等定種，最后根據(jù)抗原的免疫血清學檢查定型。

（一）形態(tài)學檢查 各種細菌的形態(tài)，在適宜的環(huán)境下是相對穩(wěn)定的。但環(huán)境的改變，如培養(yǎng)基條件的改變，抗生素和化學藥品的作用等，均可使細菌產(chǎn)生不規(guī)則的形態(tài)，并可出現(xiàn)細胞壁的缺陷和多樣性。

為此，在作細菌形態(tài)鑒定時，必須按被檢菌的生長要求，選擇適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，以及適宜的培養(yǎng)時間和檢查方法，才能作出正確的形態(tài)學鑒定。形態(tài)學檢查一般包括二方面：肉眼觀察和顯微鏡檢查。

1.肉眼觀察 肉眼觀察主要觀察細菌在固體、液體、半固體，鑒別培養(yǎng)基上的生長情況。在固體培養(yǎng)基上要觀察菌落形態(tài)、大小、顏色是否均勻一致，表面是光滑濕潤，還是干燥無光或呈皺紋狀，邊緣是整齊還是不規(guī)則，菌落是隆起、扁平，還是乳頭樣，是透明、半透明或不透明。

在液體培養(yǎng)基中，要觀察培養(yǎng)基是否呈均勻渾濁，管底有無沉淀，液面有無菌膜，是否產(chǎn)氣等。在半固體培養(yǎng)基上應(yīng)觀察細菌是否沿著接種線生長，是呈毛刷樣生長還是均勻生長，上下生長是否一致。

在鑒別培養(yǎng)基上，應(yīng)觀察其生長情況是否與預期的相一致，在血瓊脂培養(yǎng)基上還要觀察是否溶血及溶血圈的特點，在某些培養(yǎng)基上還要注意是否有臭味等。2.顯微鏡觀察 在作細菌個體形態(tài)學檢查時，要根據(jù)被檢菌的種類和檢查項目，選用相應(yīng)的染色方法，同時要注意選擇適合的培養(yǎng)基以及細菌培養(yǎng)的時間，才能達到預期的目的。

一般以18-24小時（生長時間長的細菌除外）的幼嫩培養(yǎng)菌為宜。例如，作革蘭氏染色檢查時，培養(yǎng)時間長的陳舊細菌，可能由陽性變?yōu)殛幮浴?/p>

作細菌運動性檢查時，液體培養(yǎng)基的幼嫩培養(yǎng)物（幾小時到十幾小時）最為適宜。作炭疽莢膜染色時，因炭疽桿菌在一般培養(yǎng)基上不形成莢膜，而在動物體內(nèi)形成明顯的莢膜，因此，應(yīng)先接種小鼠，取死亡動物的病料作涂片標本鏡檢。

作鞭毛染色時，以液體培養(yǎng)基為宜。芽胞的形成，因細菌種類不同，往往對培養(yǎng)條件如培養(yǎng)基、空氣和培養(yǎng)時間等而異，但一般均要求較長時間。

鏡檢時除注意其基本形態(tài)結(jié)構(gòu)和大?。ㄒ脺y微計測量）外，還應(yīng)注意其排列狀態(tài)、菌端形狀、有無兩極染色、有無形成芽胞和莢胞等。必要時可用電鏡觀察其微細結(jié)構(gòu)。

3.常用的幾種染色方法 涂片用的載玻片需用清潔液洗凈、擦干、不留油質(zhì)，否則培養(yǎng)物不能均勻地推開。被檢材料如果是肉湯培養(yǎng)物，用鉑金耳環(huán)取一滴，均勻涂抹于載玻片上，涂抹的范圍約有手指甲大即可。

隨后，在酒精燈火焰上加熱使之固定（即火焰固定）；被檢材料如果是固體培養(yǎng)物，先滴一滴水（常用生理鹽水）于載玻片上，用鉑金耳環(huán)取少許培養(yǎng)物，在水滴中混勻，培養(yǎng)物不宜太多，菌體看不清楚。膿汁、淋巴液、乳汁也按同樣方法制備抹片。

血液和病變組織，直接涂抹在載玻片上，組織抹片也不能太厚，否則看不見細菌，細菌培養(yǎng)物抹片用火焰固定，組織抹片常用甲醇或甲醛固定。

2.哪些細菌含有細胞壁

雖說細胞壁是細菌細胞的一般構(gòu)造，但在特殊情況下也可發(fā)現(xiàn)有幾種細胞壁缺損的或無細胞壁的細菌存在：①原生質(zhì)體（protoplast）：指在人工條件下用溶菌酶除盡原有細胞壁或用青霉素抑制細胞壁的合成后，所留下的僅由細胞膜包裹著的脆弱細胞，一般由革蘭氏陽性菌形成；②球狀體或原生質(zhì)球（sphaeroplast）：指還殘留部分細胞壁的原生質(zhì)體，一般由革蘭氏陰性細菌所形成；③L型細菌：1935年時，在英國李斯德預防醫(yī)學研究所中發(fā)現(xiàn)一種由自發(fā)突變而形成的細胞壁缺損的細菌——（念珠狀鏈桿菌），它的細胞膨大，對滲透壓十分敏感，在固體培養(yǎng)基表面形成“油煎蛋”似的小菌落。

由于李斯德（Lister）研究所的第一字母是“L”，故稱L型細菌。許多革蘭氏陽性和陰性細菌都可形成L型。

目前L型細菌的概念有時用得較雜，甚至還把原生質(zhì)體或球狀體也包括在內(nèi)。狹義地說，L型細菌應(yīng)專指那些在實驗室中通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺陷菌株。

3.用顯微鏡觀察細菌的步驟

一、用臟手上的細菌制裝片：

1、收集手上細菌，用少量無菌水（可用冷開水代替）沖洗臟手，讓洗手的水流到培養(yǎng)皿中。這些臟水就是細菌培養(yǎng)液。

2、制取細菌裝片，取甲、乙兩塊潔凈的載玻片，分別在兩玻片的中央各滴一小滴細菌培養(yǎng)液；然后在甲片上蓋好蓋玻片后直接用600倍的顯微鏡觀察。

（用稍偏暗的視野，調(diào)節(jié)到位可以看到多種細菌和其它微生物。很容易看到活動的微生物，這樣對兒童更有吸引力和教育意義。）如果你想進一步放大并會操作，選定觀察的物象后，可把此物象移到視野正中央，再轉(zhuǎn)換更高倍數(shù)的鏡頭觀察即可。

3、在乙片的細菌培養(yǎng)液滴上滴一小滴龍膽紫染色液，用牙簽將細菌培養(yǎng)液和龍膽紫液攪勻、并將液滴推開，再用酒精燈加熱液滴（約5秒鐘）后讓它自然晾干（約5分鐘）。

再用600倍的顯微鏡直接觀察，既可以看到染成深藍色的多種細菌和其它微生物。不過此時看到的微生物都已死亡、并被固定，因此看不到它們的活動狀態(tài)。

二、制取洗手后的對照裝片。

1、洗手-----將手用香皂洗干凈，用潔凈的干毛巾揩干手；

2、收集細菌培養(yǎng)液-------用少量無菌水沖洗雙手，讓洗手液流入潔凈的培養(yǎng)皿中；

3、制細菌裝片-----制片過程與以上裝片過程相同，參照制片即可。

擴展資料：

細菌的基本形態(tài)與大小

(1)球菌：

球菌是外形呈圓球形或橢圓形的細菌，直徑0.5~1微米，有以下幾種類型：

①單球菌：單獨存在，如尿素小球菌；②雙球菌：如肺炎雙球菌；

③鏈球菌：如乳酸鏈球菌；④四聯(lián)球菌：形成的4個細胞排列在一起，成田字，如四聯(lián)球菌；

⑤八疊球菌：如尿素生孢八疊球菌；⑥葡萄球菌：如金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）。

(2)桿菌：

外形為桿狀的細菌稱桿菌，常有長寬接近的短桿或球桿狀菌，如甲烷短桿菌屬（Methano—brevibacter）;

長寬相差較大的棒桿狀或長桿狀菌，如枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）、梭狀桿菌（Bacteriumfusiformis）;

分枝狀或叉狀菌，如雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）；竹節(jié)狀（兩端平截），如炭疽芽孢桿菌（Bacillusanthracis）等。

按桿菌細胞的排列方式不同則有成對的雙桿菌、呈鏈狀的鏈桿菌，另外，常有柵狀、“八”字狀以及由鞘衣包裹在一起的絲狀等多種。典型的桿菌有大腸桿菌、枯草桿菌、鏈桿菌、變形桿菌[2]。

(3)螺旋狀：

螺旋狀的細菌稱螺旋菌，一般長5~50微米，寬0.5~5微米，根據(jù)菌體的彎曲可分為：

①弧菌（Vibrio）：螺旋不足一環(huán)者呈香蕉狀或逗點狀，如霍亂弧菌（Vibriocholerae）；②螺菌（Spirillum）：滿2~6環(huán)的小型、堅硬的螺旋狀細菌，如小螺菌（Spirillumminor）;

③螺旋體（Spirochaeta）：旋轉(zhuǎn)周數(shù)多（通常超過6環(huán)）、體長而柔軟的螺旋狀細菌，如梅毒螺旋體（TreponemaPallidum）。

參考資料來源：百度百科-細菌