一、固體培養基分離
1、稀釋倒平板
特點(diǎn):菌落分離較為均勻,進(jìn)行微生物計數結果相對準確。但操作相對麻煩,熱敏感菌有時(shí)易被燙死,而嚴格好氧菌也可能因被固定在培養基中生長(cháng)受到影響。
2、涂布平板法
特點(diǎn):操作相對簡(jiǎn)單,是較常使用的常規方法。但有時(shí)會(huì )因涂布不均勻使某些部位的菌落不能分開(kāi),進(jìn)行微生物計數時(shí)需對稀釋和涂布過(guò)程的操作特別注意,否則不易得到準確的結果。
3、平板劃線(xiàn)法
特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,多用于對已有純培養的確認和再次分離。
應用:這三種方法可用于所有能在固體培養基表面形成菌落的微生物的純培養分離。并且,通過(guò)選用適當的選擇平板及培養條件,可直接分離各種具有特定生理特征的微生物。和厭氧罐或厭氧手套箱技術(shù)結合,這3種方法也可用于獲得各種厭氧菌的純培養。
4、稀釋搖管法
特點(diǎn):稀釋倒平板法的一種變通形式,但由于菌落形成在瓊脂柱的中間,觀(guān)察和挑取都相對困難。
應用:在缺乏專(zhuān)業(yè)的厭氧操作設備的情況下對嚴格厭氧菌進(jìn)行分離和觀(guān)察。
二、液體培養基分離
1、稀釋法
特點(diǎn):工作量大,是否獲得純培養需依靠統計學(xué)的推測。
應用:不能或不易在固體培養基上生長(cháng)的微生物進(jìn)行純培養分離或數量統計。
2、富集培養
特點(diǎn):一般不能直接獲得微生物的純培養,在通過(guò)富集培養使原本在自然環(huán)境中占少數的微生物的數量大大提高后,需再通過(guò)平板法進(jìn)行相應微生物純培養的分離和檢測。
應用:
(1)根據某種微生物的特殊生長(cháng)要求,按照意愿從自然界中對這種微生物進(jìn)行有針對性的有效分離;
(2)分離培養出由科學(xué)家設計的特定環(huán)境中能生長(cháng)的微生物,盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長(cháng)。
三、顯微操作
單細胞(孢子)挑取
特點(diǎn):分離過(guò)程直觀(guān),可靠,但對儀器和操作技術(shù)要求較高,多限于高度專(zhuān)業(yè)化的科學(xué)研究。而挑取的微生物單細胞或孢子需經(jīng)固體或液體培養基培養后才能獲得其純培養物。
應用:從樣品中直接分離所需的微生物細胞或孢子,獲得其純培養。
微生物純培養的方法
一、固體培養基分離
1、稀釋倒平板
特點(diǎn):菌落分離較為均勻,進(jìn)行微生物計數結果相對準確。但操作相對麻煩,熱敏感菌有時(shí)易被燙死,而嚴格好氧菌也可能因被固定在培養基中生長(cháng)受到影響。
2、涂布平板法
特點(diǎn):操作相對簡(jiǎn)單,是較常使用的常規方法。但有時(shí)會(huì )因涂布不均勻使某些部位的菌落不能分開(kāi),進(jìn)行微生物計數時(shí)需對稀釋和涂布過(guò)程的操作特別注意,否則不易得到準確的結果。
3、平板劃線(xiàn)法
特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,多用于對已有純培養的確認和再次分離。
應用:這三種方法可用于所有能在固體培養基表面形成菌落的微生物的純培養分離。并且,通過(guò)選用適當的選擇平板及培養條件,可直接分離各種具有特定生理特征的微生物。和厭氧罐或厭氧手套箱技術(shù)結合,這3種方法也可用于獲得各種厭氧菌的純培養。
4、稀釋搖管法
特點(diǎn):稀釋倒平板法的一種變通形式,但由于菌落形成在瓊脂柱的中間,觀(guān)察和挑取都相對困難。
應用:在缺乏專(zhuān)業(yè)的厭氧操作設備的情況下對嚴格厭氧菌進(jìn)行分離和觀(guān)察。
二、液體培養基分離
1、稀釋法
特點(diǎn):工作量大,是否獲得純培養需依靠統計學(xué)的推測。
應用:不能或不易在固體培養基上生長(cháng)的微生物進(jìn)行純培養分離或數量統計。
2、富集培養
特點(diǎn):一般不能直接獲得微生物的純培養,在通過(guò)富集培養使原本在自然環(huán)境中占少數的微生物的數量大大提高后,需再通過(guò)平板法進(jìn)行相應微生物純培養的分離和檢測。 應用:
(1)根據某種微生物的特殊生長(cháng)要求,按照意愿從自然界中對這種微生物進(jìn)行有針對性的有效分離;
(2)分離培養出由科學(xué)家設計的特定環(huán)境中能生長(cháng)的微生物,盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長(cháng)。
三、顯微操作
單細胞(孢子)挑取
特點(diǎn):分離過(guò)程直觀(guān),可靠,但對儀器和操作技術(shù)要求較高,多限于高度專(zhuān)業(yè)化的科學(xué)研究。而挑取的微生物單細胞或孢子需經(jīng)固體或液體培養基培養后才能獲得其純培養物。 應用:從樣品中直接分離所需的微生物細胞或孢子,獲得其純培養。
一、固體培養基分離1、稀釋倒平板特點(diǎn):菌落分離較為均勻,進(jìn)行微生物計數結果相對準確。
但操作相對麻煩,熱敏感菌有時(shí)易被燙死,而嚴格好氧菌也可能因被固定在培養基中生長(cháng)受到影響。2、涂布平板法特點(diǎn):操作相對簡(jiǎn)單,是較常使用的常規方法。
但有時(shí)會(huì )因涂布不均勻使某些部位的菌落不能分開(kāi),進(jìn)行微生物計數時(shí)需對稀釋和涂布過(guò)程的操作特別注意,否則不易得到準確的結果。3、平板劃線(xiàn)法特點(diǎn):操作簡(jiǎn)單,多用于對已有純培養的確認和再次分離。
應用:這三種方法可用于所有能在固體培養基表面形成菌落的微生物的純培養分離。并且,通過(guò)選用適當的選擇平板及培養條件,可直接分離各種具有特定生理特征的微生物。
和厭氧罐或厭氧手套箱技術(shù)結合,這3種方法也可用于獲得各種厭氧菌的純培養。4、稀釋搖管法特點(diǎn):稀釋倒平板法的一種變通形式,但由于菌落形成在瓊脂柱的中間,觀(guān)察和挑取都相對困難。
應用:在缺乏專(zhuān)業(yè)的厭氧操作設備的情況下對嚴格厭氧菌進(jìn)行分離和觀(guān)察。二、液體培養基分離1、稀釋法特點(diǎn):工作量大,是否獲得純培養需依靠統計學(xué)的推測。
應用:不能或不易在固體培養基上生長(cháng)的微生物進(jìn)行純培養分離或數量統計。2、富集培養特點(diǎn):一般不能直接獲得微生物的純培養,在通過(guò)富集培養使原本在自然環(huán)境中占少數的微生物的數量大大提高后,需再通過(guò)平板法進(jìn)行相應微生物純培養的分離和檢測。
應用:(1)根據某種微生物的特殊生長(cháng)要求,按照意愿從自然界中對這種微生物進(jìn)行有針對性的有效分離;(2)分離培養出由科學(xué)家設計的特定環(huán)境中能生長(cháng)的微生物,盡管我們并不知道什么微生物能在這種特定的環(huán)境中生長(cháng)。三、顯微操作單細胞(孢子)挑取特點(diǎn):分離過(guò)程直觀(guān),可靠,但對儀器和操作技術(shù)要求較高,多限于高度專(zhuān)業(yè)化的科學(xué)研究。
而挑取的微生物單細胞或孢子需經(jīng)固體或液體培養基培養后才能獲得其純培養物。應用:從樣品中直接分離所需的微生物細胞或孢子,獲得其純培養。
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