色譜分析的方法(色譜分析有幾種定量方法)
1.色譜分析有幾種定量方法
色譜分析常用的定量方法：歸一化法、內(nèi)標(biāo)法和內(nèi)加（增量）內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法。
1、面積歸一化法優(yōu)點(diǎn)是簡便、準(zhǔn)確，當(dāng)操作條件變化時(shí)對(duì)結(jié)果影響較小，宜于分析多組分試樣中各組分的含量。但是試樣中所有組分必須全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。
2、外標(biāo)法是用純物質(zhì)配成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（或直接購買不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液）分別取一定體積，注入色譜儀，根據(jù)峰面積和濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線。在分析未知樣時(shí)按與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的操作條件和方法，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出所需組分的濃度（現(xiàn)在在工作站上直接就能求出濃度）。
此法要求進(jìn)樣準(zhǔn)確，操作條件穩(wěn)定，分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線條件必須一致。 3、內(nèi)標(biāo)法是試樣中所有組分不能全部出峰或只要求測定試樣中某個(gè)或某幾個(gè)組分時(shí)，可采用此法。
內(nèi)標(biāo)法是在準(zhǔn)確稱取一定量的試樣中，加入一定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（內(nèi)標(biāo)物），根據(jù)內(nèi)標(biāo)物和試樣的質(zhì)量以及色譜圖上的相應(yīng)峰面積，計(jì)算待測組分的含量。內(nèi)標(biāo)法的關(guān)鍵是選擇合適的內(nèi)標(biāo)物，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是試樣中不存在的純物質(zhì)，物質(zhì)與被測物質(zhì)相近，能溶于樣品中，但不能于樣品發(fā)生反應(yīng)。
此法比較費(fèi)事，一般不使用于快速分析。
2.常用的層析分析方法有哪些
在分離分析特別是蛋白質(zhì)分離分析中，層析是相當(dāng)重要、且相當(dāng)常見的一種技術(shù)，其原理較為復(fù)雜，對(duì)人員的要求相對(duì)較高，這里只能做一個(gè)相對(duì)簡單的介紹。
一、吸附層析 1、吸附柱層析 吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機(jī)溶劑或緩沖液為流動(dòng)相構(gòu)成柱的一種層析方法。 2、薄層層析 薄層層析是以涂布于玻板或滌綸片等載體上的基質(zhì)為固定相，以液體為流動(dòng)相的一種層析方法。
這種層析方法是把吸附劑等物質(zhì)涂布于載體上形成薄層，然后按紙層析操作進(jìn)行展層。 3、聚酰胺薄膜層析 聚酰胺對(duì)極性物質(zhì)的吸附作用是由于它能和被分離物之間形成氫鍵。
這種氫鍵的強(qiáng)弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時(shí)，展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競爭形成氫鍵。
因此選擇適當(dāng)?shù)恼箤觿┦狗蛛x在聚酰胺膜表面發(fā)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續(xù)過程，就能導(dǎo)致分離物質(zhì)達(dá)到分離目的。 常用的層析分析方法，登錄生物幫看看。
/zt/focus/ 生物熱點(diǎn)研究，生物學(xué)熱點(diǎn)問題。
3.色譜法有哪四種常見的方法
高效液相色譜法處理，以指示的 ①的高壓力：更大的阻力，流動(dòng)的液體通過高壓迅速通過該柱通過柱的流動(dòng)相，液體載體。
②高效：分離效率高。選擇一個(gè)固定相和流動(dòng)相，以便達(dá)到最佳的分離效果，并且是工業(yè)精餾塔和氣相色譜分離性能高出許多倍。
③高靈敏度：紫外檢測器可達(dá)0.01ng，μL級(jí)的注射量。的 ④由高性能液相色譜法分析，特別是高沸點(diǎn)的分離和分析，大分子，強(qiáng)極性，熱穩(wěn)定性差的化合物，可用于廣泛的應(yīng)用范圍：70%以上的有機(jī)化合物的，示出的優(yōu)點(diǎn)。
⑤分析速度快，載液的流速快：速度更快，更經(jīng)典的液相色譜通常在15至30分鐘的樣品分析，部分樣品甚至在五分鐘內(nèi)完成，一般不超過1小時(shí)。 此外，高效液相層析柱可？？反復(fù)使用，和樣品不被破壞，易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜法相比，有自己的長處和優(yōu)勢互補(bǔ)。
的缺點(diǎn)的高性能液相色譜法“列效果。從噴射器到檢測器上，在除了比支柱死空間（噴射器，柱接頭，連接管和檢測器單元等）的任何其他的類型，如果流動(dòng)相流量的變化在任何要被分離和滯留的物質(zhì)的擴(kuò)散會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)大的峰，柱效降低顯著高性能液相色譜檢測器的靈敏度是小于在氣相色譜儀中。
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4.氣相色譜定量分析方法有哪些
氣相色譜定量檢測一般就兩種，一個(gè)是外標(biāo)法，一個(gè)是內(nèi)標(biāo)法，對(duì)于沒有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的，就只能靠面積歸一法粗略定量。
外標(biāo)和內(nèi)標(biāo)百度上有很多介紹，這里跟你講一下對(duì)于沒有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的中間體該怎么通過氣相色譜定量。
1.首先，要通過重結(jié)晶、過柱子、吸附等等方法先獲得盡可能純的產(chǎn)物；
2.然后烘干至恒重，注意要把結(jié)晶水也烘掉；
3.烘干以后，根據(jù)產(chǎn)物合成、純化過程投加的各種物料，用氣相色譜測殘留溶劑，盡可能測全、測準(zhǔn)；
4.測煅燒殘?jiān)?00℃在馬弗爐里燒半個(gè)小時(shí)以上，測一下煅燒殘?jiān)?，這些可能是夾雜在產(chǎn)物中的無機(jī)鹽；
5.測水分，用溶劑把產(chǎn)物溶解掉，用微量水分測定方法測定產(chǎn)物中的水分，注意要扣除溶劑的空白值；
6.氣相色譜檢測產(chǎn)物：先通過調(diào)節(jié)分流比、汽化溫度、柱溫等，確認(rèn)產(chǎn)物峰上沒有毛刺或者坎肩峰；調(diào)檢測條件，選一個(gè)峰形最好的條件，面積歸一法定量；
7.計(jì)算：先扣除前面檢測出來的殘留溶劑、煅燒殘?jiān)退值暮?，再乘以面積歸一法的面積百分含量。
這樣相對(duì)來說是比較準(zhǔn)的定量方法了，面積百分含量越高的且其他殘留越低的，定量越準(zhǔn)。
