學(xué)員對象:各大醫院、研究中心、實(shí)驗室從事動(dòng)物實(shí)驗的科研人員、工作人員、管理人員等。
課程收益:實(shí)驗動(dòng)物相關(guān)實(shí)驗室既涵蓋了一般實(shí)驗室的生物安全要求,同時(shí)也使得實(shí)驗室生物安全變得更加復雜和多變,人員要求更加嚴格,生物安全事件也相對較多。因此,本課程將重點(diǎn)介紹一些動(dòng)物實(shí)驗相關(guān)實(shí)驗室的生物安全知識。
課程內容: 【內訓課程編號】N101077 【培訓對象】各大醫院、研究中心、實(shí)驗室從事動(dòng)物實(shí)驗的科研人員、工作人員、管理人員等。【培訓背景】 實(shí)驗動(dòng)物相關(guān)實(shí)驗室既涵蓋了一般實(shí)驗室的生物安全要求,同時(shí)也使得實(shí)驗室生物安全變得更加復雜和多變,人員要求更加嚴格,生物安全事件也相對較多。
因此,本課程將重點(diǎn)介紹一些動(dòng)物實(shí)驗相關(guān)實(shí)驗室的生物安全知識。【培訓大綱】 一、你有實(shí)驗室生物安全意識嗎? ●實(shí)驗室生物安全是每個(gè)實(shí)驗室人員應該高度重視的問(wèn)題,實(shí)驗的每個(gè)環(huán)節都會(huì )有潛在風(fēng)險。
大家并沒(méi)有嚴格、專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗室風(fēng)險識別和風(fēng)險控制的意識和技能,實(shí)驗室環(huán)境也沒(méi)能形成安全、清潔的文化氛圍,每天都會(huì )有許許多多程度不同的生物安全隱患和風(fēng)險。 ●動(dòng)物存在哪些危害,怎樣防護等等問(wèn)題,都需要我們認真思考,至少先要有良好的安全意識,然后形成實(shí)驗室安全操作規范,通常國際上稱(chēng)為SOP,大家在實(shí)驗之前,應該了解清楚,才能及時(shí)應用。
二、你做好動(dòng)物實(shí)驗的準備了么?在動(dòng)手之前,你認真思考了以下問(wèn)題嗎?1、你真的了解實(shí)驗動(dòng)物么? ●實(shí)驗動(dòng)物具有兩大特點(diǎn):一是為人類(lèi)需要改變自己,似像非像原種動(dòng)物,成為“病態(tài)異類(lèi)”;二是由于遺傳改變,原有抵抗病原的能力呈現不同程度下降,對病原譜系發(fā)生改變,更易得病。 ●實(shí)驗動(dòng)物、分泌物、排泄物、樣品、器官、尸體等控制、操作不當會(huì )變成病原污染的擴大器,造成大范圍傳播,因此,了解實(shí)驗動(dòng)物特性,就知道了動(dòng)物實(shí)驗首先要做好思想準備,防備于未然。
2、你具備動(dòng)物實(shí)驗能力嗎? ●動(dòng)物實(shí)驗的能力,包括動(dòng)物飼養能力、對動(dòng)物認知能力、操作能力、信息采集能力、分析能力、關(guān)護能力和生物安全防護能力。具備了這些能力,才能完成良好的動(dòng)物實(shí)驗,同時(shí)保證實(shí)驗中的生物安全。
●動(dòng)物源人獸共患病,如出血熱、結核病、狂犬病、菌痢、寄生蟲(chóng)等疾病更是直接威脅我們健康。實(shí)驗既要了解病原的危害,也要了解動(dòng)物感染后的危害,和可能的生物安全風(fēng)險,操作中要提高能力,降低風(fēng)險。
●動(dòng)物活體檢測、外科手術(shù)、活體采樣、解剖取材等技能更是要求人員能夠熟練掌握。必須經(jīng)過(guò)嚴格培訓,才能實(shí)際應用。
能力,是安全的保證。3、你知道動(dòng)物實(shí)驗要經(jīng)過(guò)審查批準么? ●動(dòng)物實(shí)驗方案審查的內容應該包括: 實(shí)驗人員是否符合操作要求;設施設備是否符合動(dòng)物要求;飼料、墊料、飲水是否符合動(dòng)物要求;動(dòng)物運輸是否符合要求;實(shí)驗方案是否符合動(dòng)物福利要求;動(dòng)物處置是否符合倫理規范;動(dòng)物處死是否符合安樂(lè )死原則;動(dòng)物尸體處理是否符合環(huán)保要求等等方面。
這些方面,都要有生物安全作為保障。動(dòng)物實(shí)驗福利、倫理、生物安全審查中應注意的問(wèn)題非常多,主要人員培訓情況; ●動(dòng)物實(shí)驗人員必須經(jīng)過(guò)操作培訓,包括:動(dòng)物基本知識、動(dòng)物操作、麻醉方法、手術(shù)方法、給藥方法、取材方法、解剖方法、生物安全防護等各種操作,最好持有專(zhuān)業(yè)培訓證書(shū)。
三、你具備動(dòng)物實(shí)驗生物安全防護能力嗎?1、你了解動(dòng)物實(shí)驗可能的生物危害嗎? ●動(dòng)物實(shí)驗可能帶來(lái)的危害主要有:一是動(dòng)物咬傷、抓傷等直接危害;二是動(dòng)物攜帶人獸共患病病原,在操作過(guò)程中通過(guò)空氣、分泌物、直接接觸等途徑感染人類(lèi);三是人類(lèi)高致病性病原感染動(dòng)物實(shí)驗,從動(dòng)物或環(huán)境再感染人。 ●最常見(jiàn)的情況是,實(shí)驗動(dòng)物沒(méi)有良好的設施、設備作保障,動(dòng)物污染后處理不當,造成環(huán)境、動(dòng)物、人員的生物危害。
2、你能識別造成動(dòng)物生物安全風(fēng)險的行為嗎? ●實(shí)驗室活動(dòng),包括動(dòng)物實(shí)驗的每個(gè)環(huán)節都會(huì )存在風(fēng)險。動(dòng)物實(shí)驗操作中除了我們熟悉的“3R”外,還有一個(gè)最重要的R,就是responsibility,是指責任、責任心。
關(guān)護動(dòng)物,使動(dòng)物處于相對安靜狀態(tài),減少動(dòng)物煩躁不安、過(guò)激行為、減少物質(zhì)釋放(如大動(dòng)物激惹后呼吸增加、激烈活動(dòng)時(shí)揚塵),均可降低產(chǎn)生風(fēng)險。 ●需要識別的動(dòng)物相關(guān)風(fēng)險(10項)3、你知道生物安全管理、風(fēng)險評估和風(fēng)險控制嗎? ●生物安全風(fēng)險評估和風(fēng)險控制通俗地講就是要了解實(shí)驗可能的各種風(fēng)險,萬(wàn)一出現了風(fēng)險,馬上采取相應的應對控制手段。
●管理:國家法規、條例、標準等。國家有專(zhuān)門(mén)的要求,病原按危害程度被分為1-4類(lèi),1-2類(lèi)稱(chēng)為高致病性病原。
所有病原都應該在1-4級不同等級生物安全實(shí)驗室中進(jìn)行,并且事先做好生物安全風(fēng)險評估和風(fēng)險控制,嚴格操作,以確保安全。應根據危害程度分類(lèi),對特定的病原微生物采取相應級別的生物安全防護水平,減少人員暴露的危險和使環(huán)境污染降到最低限度。
●動(dòng)物實(shí)驗涉及的所有方面,包括動(dòng)物、病原、試劑、操作等都應預先知道,并識別可能的危害。根據危害程度,提出風(fēng)險評估,采取風(fēng)險控制措施,是生物安全的核心工作。
●動(dòng)物的風(fēng)險評估應包括:動(dòng)物等級、大小、特性、飼養、操。
1. 一級生物安全防護實(shí)驗室
實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對健康成年人已知無(wú)致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗室等。
2. 二級生物安全防護實(shí)驗室
實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。
3. 三級生物安全防護實(shí)驗室
實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于主要通過(guò)呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預防傳染的疫苗。
艾滋病病毒的研究(血清學(xué)實(shí)驗除外)應在三級生物安全防護實(shí)驗室中進(jìn)行。
4. 四級生物安全防護實(shí)驗室
實(shí)驗室結構和設施、安全操作規程、安全設備適用于對人體具有高度的危險性,通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,尚無(wú)有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。與上述情況類(lèi)似的不明微生物,也必須在四級生物安全防護實(shí)驗室中進(jìn)行。待有充分數據后再決定此種微生物或毒素應在四級還是在較低級別的實(shí)驗室中處理。
實(shí)驗脊椎動(dòng)物生物安全防護實(shí)驗室,其適用微生物范圍與同級的一般生物安全防護實(shí)驗室相同。
生物安全是指現代生物技術(shù)的研究,開(kāi)發(fā)應用以及轉基因生物的跨境轉移可能會(huì )對生物的多樣性,生態(tài)環(huán)境和人體健康產(chǎn)生潛在的不利影響。
特別是各類(lèi)轉基因或生物體,釋放到環(huán)境中可能對生物多樣性構成潛在的風(fēng)險與威脅。轉基因生物可能對生物多樣性,生態(tài)環(huán)境和人體健康產(chǎn)生以下幾點(diǎn)影響,第一是轉基因生物對目標生物的影響。
第二增加目標害蟲(chóng)的抗性。第三是轉基因生物體的抗逆性狀將會(huì )變成超伋雜草,從而影響威脅其他生物的正常生長(cháng)和生存。
第四是對生物多樣性,現代環(huán)境的影響,破壞原有的自然生態(tài)平衡,導致生物多樣性的喪失和野生近緣種的遺傳多樣性。第五是對人體健康的威脅和影響。
《實(shí)驗室生物安全手冊》過(guò)去一直把重點(diǎn)放在傳統的實(shí)驗室生物安全指導上。
手冊強調的是微生物操作技術(shù)規范的應用;適當的防護設備;正確的實(shí)驗室設計、操作和維護;以及如何通過(guò)行政管理來(lái)減少工作人員受傷或患病的危險。在按照這些推薦意見(jiàn)執行時(shí),對環(huán)境以及周?chē)^大范圍社區所造成的危險也可降到最低。
目前必須通過(guò)引入實(shí)驗室生物安全保障措施來(lái)豐富上述實(shí)現生物安全的傳統方法。最近全球發(fā)生的一系列事件強調有必要保護實(shí)驗室以及實(shí)驗室內的材料,以免可能因故意行為而危害人類(lèi)、家畜、農業(yè)或環(huán)境。
在確定一個(gè)單位的實(shí)驗室生物安全保障的需要之前,必須首先理解“實(shí)驗室生物安全(laboratory biosafety)”和“實(shí)驗室生物安全保障(laboratory biosecurity)”之間的差異。 “實(shí)驗室生物安全”一詞用來(lái)描述那些用以防止發(fā)生病原體或毒素無(wú)意中暴露及意外釋放的防護原則、技術(shù)以及實(shí)踐。
“實(shí)驗室生物安全保障”則是指單位和個(gè)人為防止病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉移或有意釋放而采取的安全措施。 有效的生物安全規范是實(shí)驗室生物安全保障活動(dòng)的根本。
通過(guò)危險度評估工作(作為實(shí)驗室所在機構生物安全方案中的一個(gè)組成部分來(lái)實(shí)施),可以收集關(guān)于所使用生物體的類(lèi)型、它們的物理位置、需要接觸這些生物體的人員以及負責這些生物體人員的身份等信息。這些信息可以用于評估一個(gè)單位是否擁有這樣的生物材料,而這些生物材料對于那些企圖不當使用它們的人具有誘惑力。
應建立國家標準來(lái)明確國家和各單位在防止標本、病原體和毒素被濫用方面應負的責任。 每個(gè)單位都必須根據本單位的需要、實(shí)驗室工作的類(lèi)型以及本地的情況等來(lái)制定和實(shí)施特定的實(shí)驗室生物安全保障規劃。
因此,實(shí)驗室生物安全保障活動(dòng)應能代表所在單位的不同需求,必要時(shí)應由科技主管、研究負責人、生物安全官員、實(shí)驗室的科研人員、后勤保障人員、管理人員、信息技術(shù)人員以及執法機構和安全機構的人員來(lái)參與。 實(shí)驗室生物安全保障措施應以對病原體和毒素負責任的綜合方案為基礎,其中應包括對病原體和毒素的貯存位置、進(jìn)出人員資料、使用記錄、設施內及設施間進(jìn)行內部或外部運送的記錄文件以及對材料進(jìn)行任何滅活和∕或丟棄等情況的最新調查結果。
同樣地,應制定一個(gè)單位的實(shí)驗室生物安全保障方案來(lái)鑒別、報告、調查并糾正實(shí)驗室生物安全保障工作中的違規情況,包括調查結果中不符合規定的地方。應明確規定公共衛生和安全保障管理部門(mén)在發(fā)生違反安全保障事件時(shí)的介入程度、作用和責任。
與實(shí)驗室生物安全培訓不同,所有人員都應進(jìn)行實(shí)驗室生物安全保障培訓。通過(guò)培訓可以幫助工作人員理解保護這些材料的必要性以及有關(guān)生物安全保障措施的原理,培訓內容應包括復習有關(guān)國家標準和各單位的特殊規定。
在培訓過(guò)程中,還應說(shuō)明在發(fā)生違反安全保障的事件時(shí)相關(guān)人員具有哪些安全保障的作用和責任。 對于所有有權接觸敏感材料的人員,考察他們在專(zhuān)業(yè)和道德方面是否勝任危險性病原體的工作,這也是有效的實(shí)驗室生物安全保障活動(dòng)的一個(gè)中心內容。
總之,安全保障預防應該像無(wú)菌操作技術(shù)和其他微生物安全操作技術(shù)一樣,成為實(shí)驗室常規工作的一部分。實(shí)驗室安全保障措施不應阻礙對參比材料、臨床和流行病學(xué)標本以及臨床或公共衛生調查中所需資料的有效共享。
職能部門(mén)的安全保障管理不應過(guò)度干涉科研人員的日常活動(dòng),也不應干擾其研究工作。對重要的研究和臨床材料的合法使用必須得到保護。
評估人員的可靠性、進(jìn)行專(zhuān)門(mén)的安全保障培訓以及針對病原體制訂嚴格的保護措施等都是促進(jìn)實(shí)驗室生物安全保障的有效方法。所有這些努力必須通過(guò)對危險性和威脅的定期評估,以及對相關(guān)措施的定期檢查及更新來(lái)加以維持。
檢查這些措施的執行情況,檢查對有關(guān)規則、責任和糾正措施的解釋是否清楚,這些都應該是實(shí)驗室生物安全保障規劃以及實(shí)驗室生物安全保障國家標準所必不可少的內容。
第二節 生物安全二級(BSL-2)實(shí)驗室防護屏障 根據所操作的生物因子的危害程度和采取的防護措施,相關(guān)防護屏障要符合相應生物安全級別的要求。
生物安全二級水平(BSL-2)實(shí)驗室: 一、警示標識 1、實(shí)驗室的建筑物入口、實(shí)驗室入口、實(shí)驗室操作間,儀器設備等都粘貼相應的警示標識,列明該實(shí)驗室內各種潛在危險。 2、生物危害標識:標志底色為黃色,文字為黑色 生物危險二級 非工作人員禁止入內 3、化學(xué)品危險標識 根據實(shí)驗室現有危險化學(xué)品的危險特性和狀態(tài),做以下標識:爆炸品、易燃氣體、易燃液體、易燃固體、有毒品、腐蝕品、致癌致畸品。
二、物理防護屏障 實(shí)驗室生物安全必須配備初級物理防護屏障,它包括各級生物安全設備和個(gè)人防護裝備(初級防護屏障)。實(shí)驗室的設施結構和通風(fēng)設計構成次級物理防護屏障(次級防護屏障)。
能產(chǎn)生傳染物外溢、濺出和氣溶膠的操作,包括離心、研磨、攪拌、強力震蕩混合、超聲波破碎、打開(kāi)裝有傳染性材料的容器、動(dòng)物鼻腔注射、收取感染動(dòng)物和孵化卵的組織等,都要使用Ⅱ級生物安全柜和物理防護設備。三、設施和設備1、實(shí)驗室設施(次級防護屏障)在建筑中,實(shí)驗室與一般區域隔離。
1.1 建筑結構和平面布局 建筑物抗震能力八級,防鼠、防蟲(chóng)、防盜。建筑物內實(shí)驗室安裝有門(mén)禁系統,禁止無(wú)關(guān)人員進(jìn)入。
實(shí)驗室門(mén)口處設有柜子,將個(gè)人服裝與實(shí)驗服分開(kāi)放置。實(shí)驗室有安全通道和緊急出口,有明顯標識。
1.2 密閉性和內表面 實(shí)驗室的墻壁、天花板和地面的表面光滑、易清潔、不積塵、不滲水、不凝集蒸汽、耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地表面平整,防滑。
工作臺面易于清潔,防水,耐熱、有機溶劑、酸、堿和常用消毒劑的損害和腐蝕。實(shí)驗室內所有的門(mén)可關(guān)閉;實(shí)驗室出口有在黑暗中可明確辨認的標識。
1.3 空調 每個(gè)實(shí)驗室都安裝有空調。 1.4 照明適合于室內一切活動(dòng)。
1.5 可靠的電力供應。冰箱配置有備用電源。
2、安全設備(初級防護屏障) 2.1 防護服裝 2.2 防護手套 2.3 生物安全柜 感染性材料的操作,如細菌分離、組織培養、雞胚接種、動(dòng)物體液的收取等,都應在Ⅱ級生物安全柜內進(jìn)行。生物安全柜每12個(gè)月由生產(chǎn)廠(chǎng)家負責全面檢測一次,每次使用生物安全柜時(shí),應注意觀(guān)察其運行是否正常,并填寫(xiě)使用記錄。
2.4 高壓滅菌器 高壓滅菌是最為常用的殺死微生物的物理手段,所用的培養物和廢棄物在處理前都要用高壓蒸汽滅菌器消毒。 2.5 急救箱 實(shí)驗室必須配備急救箱。
急救箱內至少應包括:消毒劑、消毒藥棉、一次性橡膠手套、無(wú)菌創(chuàng )傷敷料/紗布、膠布、繃帶、鑷子、剪刀等。 2.6 消防器材 實(shí)驗室應配置適用的消防器材,如滅火器。
2.7 洗眼裝置 實(shí)驗室工作區配置洗眼裝置。 四、個(gè)人防護裝備的總體要求 實(shí)驗室所用的任何個(gè)人防護裝備應符合國家有關(guān)標準的要求。
在生物危害評估的基礎上,按不同級別的防護要求選擇適當的個(gè)人防護裝備,并制定有相應程序控制個(gè)人防護裝備的選擇、使用和維護等。1、實(shí)驗室防護服 實(shí)驗室應確保足夠的防護服可供使用。
防護服要及時(shí)消毒、清洗。當具有潛在危險的物質(zhì)極有可能濺到工作人員時(shí),塑料圍裙或防液體的長(cháng)罩服,如必要,還應穿戴其它的個(gè)人防護裝備,如手套、防護鏡、面具、頭部面部保護罩等。
連體防護服穿戴時(shí),注意先穿褲子,后穿上衣。實(shí)驗完后,先脫上衣,后脫褲子,脫衣時(shí)抓住上衣衣邊往上拉,從頭部鉆出。
污染的防護服應進(jìn)行無(wú)害化處理。 2、手套 手套應在實(shí)驗室工作時(shí)可供使用,以防生物危險、化學(xué)品、輻射污染,冷和熱,產(chǎn)品污染,刺傷、擦傷和動(dòng)物抓咬傷等。
手套應按所從事操作的性質(zhì)符合舒服、合適、靈活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求,并應對所涉及的危險提供足夠的防護。戴手套時(shí),應保證所戴手套無(wú)漏損、手要干燥;在撕破、損壞或懷疑內部受污染時(shí)更換手套。
脫手套之前先用消毒液消毒手套,然后一手捏住另一手的手套掌部往外拉,使污染的部分包在里面。使用后的手套應進(jìn)行無(wú)害化處理。
3、鞋 實(shí)驗用鞋應舒適,鞋底防滑。 4、口罩 選擇合適的口罩,戴之前,應檢查是否破損和清潔。
穿戴時(shí),須用手捏下鼻部,使其緊貼皮膚,以防漏氣。 5、帽子 操作感染性材料時(shí),必須佩帶帽子。
6、眼鏡 必要時(shí),操作應戴防護眼鏡。
中文名稱(chēng):生物安全 英文名稱(chēng):biological safety;bio-safety 定義1:安全轉移、處理和使用那些利用現代生物技術(shù)而獲得的遺傳修飾生物體,避免其對生物多樣性和人類(lèi)健康可能產(chǎn)生的潛在影響。
應用學(xué)科:生態(tài)學(xué)(一級學(xué)科);保護生態(tài)學(xué)(二級學(xué)科) 定義2:狹義指現代生物技術(shù)的研究、開(kāi)發(fā)、應用以及轉基因生物的跨國越境轉移可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類(lèi)健康產(chǎn)生潛在的不利影響。廣義指與生物有關(guān)的各種因素對社會(huì )、經(jīng)濟、人類(lèi)健康及生態(tài)系統所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險。
應用學(xué)科:資源科技(一級學(xué)科);資源生態(tài)學(xué)(二級學(xué)科)意義 雖然有眾多爭議,基因工程的發(fā)展仍然日新月異,在有些國家,基因工程農產(chǎn)品已經(jīng)上市,我國也很快會(huì )有基因工程農產(chǎn)品上市。應該說(shuō),只要完善基因工程操作和適當的法律法規,就能把基因工程的危險降至最小(如果有的話(huà)),更好地為人類(lèi)造福。
基層畜牧獸醫工作人員經(jīng)常與豬、牛、羊、禽等各類(lèi)畜禽接觸;從事的工作是畜禽疫病的預防診斷治療、重大動(dòng)物疫病監 測、疫情處置、畜禽及其產(chǎn)品檢疫;與各類(lèi)微生物特別是病原微 生物零距離接觸更是經(jīng)常的事情,工作的特殊性使他們成為易感 染的高危人群。
生物安全防護措施不當,不但嚴重威脅、危害他 們的生命健康安全,而且會(huì )成為各類(lèi)微生物的傳播途徑,或者由 污染變成為新的傳染源,甚至成為一些細菌、病毒基因復制和重 組的載體,從而產(chǎn)生新的生物種類(lèi),如甲型HINl流感病毒。因 此,抓好基層防疫人員的生物安全防護具有十分重大的現實(shí)意義 和作用。
生物安全防護指的是在實(shí)驗室環(huán)境下處理和保存感染性物質(zhì)的過(guò)程中所采用的一系列的防護措施,主要包括實(shí)驗室防護設施、個(gè)人防護裝備、物品管理體系、相關(guān)儀器設備等生物安全是指避免危險生物因子造成實(shí)驗室人員傷害,或避免危險生物因子污染環(huán)境,危害公眾的綜合措施.目前國內各級醫院實(shí)驗室對生物安全防護都相當重視,并制定相關(guān)的規章制度,來(lái)預防和控制自身感染.生物安全至關(guān)重要,生物安全實(shí)驗室建設更是重中之重.在我們的醫學(xué)院校里,并沒(méi)有得到教師和學(xué)生的高度重視,這樣做的后果是很?chē)乐氐?因為我們在實(shí)驗課上所接觸的標本都是臨床上具有傳染性的患者標本或者是具有活性的臨床致病菌,如果我們忽視對學(xué)生的生物安全教育以及個(gè)人防護認識,就會(huì )很容易造成實(shí)驗室感染事件的發(fā)生.因此,加強對醫學(xué)檢驗專(zhuān)業(yè)學(xué)生實(shí)驗室生物安全防護的教育是及其重要的。
聲明:本網(wǎng)站尊重并保護知識產(chǎn)權,根據《信息網(wǎng)絡(luò )傳播權保護條例》,如果我們轉載的作品侵犯了您的權利,請在一個(gè)月內通知我們,我們會(huì )及時(shí)刪除。
蜀ICP備2020033479號-4 Copyright ? 2016 學(xué)習?shū)B(niǎo). 頁(yè)面生成時(shí)間:3.358秒