使用生物顯微鏡時(shí)應注意的事項
⒈取放時(shí)動(dòng)作一定要輕,切忌震動(dòng)和暴力,否則會(huì )造成光軸偏斜而影響觀(guān)察,而且光學(xué)玻璃也容易損壞。
⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷,安裝物鏡時(shí)要特別小心,即先向左方倒轉一小段,凹凸雙方吻合后再向右方旋轉,不要轉的太緊,輕輕捻到頭,再稍緊即可。
⒊鏡檢標本應嚴格按照操作程序進(jìn)行,觀(guān)察時(shí)要從低倍鏡開(kāi)始,看清標本后再轉用高倍鏡、油鏡。
⒋使用油鏡時(shí)一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后,應立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈,否則干后不易擦去,以致?lián)p傷鏡頭和標本。但應注意二甲苯用量不可過(guò)多,否則,物鏡中的樹(shù)膠溶解,透鏡歪斜甚至脫落,蓋玻片移動(dòng)甚至連同標本一起融掉。
⒌使用時(shí)不可用手摸光學(xué)玻璃部分,如需擦拭應嚴格按照光學(xué)部件擦拭辦法。
⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過(guò)厚或過(guò)薄。標準的蓋玻片為0.17±0.02毫米,載玻片為1.1±0.04毫米。過(guò)厚或過(guò)薄將會(huì )影響顯微鏡成像及觀(guān)察。
1.低倍鏡的使用方法
(1)取鏡和放置:顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中,用時(shí)從柜中取出,右手緊握鏡臂,左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗臺上,鏡座后端距桌邊1-2寸為宜,便于坐著(zhù)操作。
(2)對光:用拇指和中指移動(dòng)旋轉器(切忌手持物鏡移動(dòng)),使低倍鏡對準鏡臺的通光孔(當轉動(dòng)聽(tīng)到碰叩聲時(shí),說(shuō)明物鏡光軸已對準鏡筒中心)。打開(kāi)光圈,上升集光器,并將反光鏡轉向光源,以左眼在目鏡上觀(guān)察(右眼睜開(kāi)),同時(shí)調節反光鏡方向,直到視野內的光線(xiàn)均勻明亮為止。
(3)放置玻片標本:取一玻片標本放在鏡臺上,一定使有蓋玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器彈簧夾夾住,然后旋轉推片器螺旋,將所要觀(guān)察的部位調到通光孔的正中。
(4)調節焦距:以左手按逆時(shí)針?lè )较蜣D動(dòng)粗調節器,使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處,應注意在上升鏡臺時(shí),切勿在目鏡上觀(guān)察。一定要從右側看著(zhù)鏡臺上升,以免上升過(guò)多,造成鏡頭或標本片的損壞。然后,兩眼同時(shí)睜開(kāi),用左眼在目鏡上觀(guān)察,左手順時(shí)針?lè )较蚓徛D動(dòng)粗調節器,使鏡臺緩慢下降,直到視野中出現清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心,可調節推片器將其調到中心(注意移動(dòng)玻片的方向與視野物象移動(dòng)的方向是相反的)。如果視野內的亮度不合適,可通過(guò)升降集光器的位置或開(kāi)閉光圈的大小來(lái)調節,如果在調節焦距時(shí),鏡臺下降已超過(guò)工作距離(>5.40mm)而未見(jiàn)到物象,說(shuō)明此次操作失敗,則應重新操作,切不可心急而盲目地上升鏡臺。
2.高倍鏡的使用方法
(1)選好目標:一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀(guān)察的部位調到中心,同時(shí)把物象調節到最清晰的程度,才能進(jìn)行高倍鏡的觀(guān)察。
(2)轉動(dòng)轉換器,調換上高倍鏡頭,轉換高倍鏡時(shí)轉動(dòng)速度要慢,并從側面進(jìn)行觀(guān)察(防止高倍鏡頭碰撞玻片),如高倍鏡頭碰到玻片,說(shuō)明低倍鏡的焦距沒(méi)有調好,應重新操作。
(3)調節焦距:轉換好高倍鏡后,用左眼在目鏡上觀(guān)察,此時(shí)一般能見(jiàn)到一個(gè)不太清楚的物象,可將細調節器的螺旋逆時(shí)針移動(dòng)約0.5-1圈,即可獲得清晰的物象(切勿用粗調節器!)
如果視野的亮度不合適,可用集光器和光圈加以調節,如果需要更換玻片標本時(shí),必須順時(shí)針(切勿轉錯方向)轉動(dòng)粗調節器使鏡臺下降,方可取下玻片標本。
3.生物顯微鏡油鏡的使用方法
(1)在使用油鏡之前,必須先經(jīng)低、高倍鏡觀(guān)察,然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。
(2)將集光器上升到最高位置,光圈開(kāi)到最大。
(3)轉動(dòng)轉換器,使高倍鏡頭離開(kāi)通光孔,在需觀(guān)察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢轉動(dòng)油鏡,在轉換油鏡時(shí),從側面水平注視鏡頭與玻片的距離,使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。
(4)用左眼觀(guān)察目鏡,并慢慢轉動(dòng)細調節器至物象清晰為止。
如果不出現物象或者目標不理想要重找,在加油區之外重找時(shí)應按:低倍→高倍→油鏡程序。在加油區內重找應按:低倍→油鏡程序,不得經(jīng)高倍鏡,以免油沾污鏡頭。
(5)油鏡使用完畢,先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標本上的香柏油擦去,然后再用干擦鏡紙擦干凈。
(一) 顯微鏡的構造及各部名稱(chēng) 關(guān)于顯微鏡的結構與使用方法已于生物學(xué)和組織胚胎學(xué)課程中學(xué)過(guò),在寄生蟲(chóng)學(xué)的學(xué)習中,要求進(jìn)一步熟練使用。
顯微鏡的構造及各部名稱(chēng)見(jiàn)圖1。 (二) 顯微鏡的使用 利用自然光源鏡檢時(shí),最好用朝北的光源,不宜3采用直射陽(yáng)光;利用人工光源時(shí),宜用日光燈的光源。
鏡檢時(shí)身體要正對實(shí)習臺,采取端正的姿態(tài),兩眼自然張開(kāi),左眼觀(guān)察標本,右眼觀(guān)察記錄及繪圖,同時(shí)左手調節焦距,使物象清晰并移動(dòng)標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時(shí)載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時(shí),液體或油易流出,既損壞了標本,又污染載物臺,也影響檢查結果。 圖1 顯微鏡 鏡檢時(shí)應將標本按一定方向移動(dòng)視野,直至整個(gè)標本觀(guān)察完畢,以便不漏檢,不重復。
顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉換及光線(xiàn)的調節。觀(guān)察寄生蟲(chóng)標本時(shí),光線(xiàn)調節甚為重要。
因為所觀(guān)察的標本如蟲(chóng)卵、包囊等,均為自然光狀態(tài)的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無(wú)色透明,而低倍、高倍接物鏡轉換較多,故須隨著(zhù)鏡檢時(shí)對不同標本和要求,需要隨時(shí)調節焦距和光線(xiàn),這樣才能使觀(guān)察的物象清晰。在一般情況下,染色標本光線(xiàn)宜強,無(wú)色或未染色標本光線(xiàn)宜弱;低倍鏡觀(guān)察光線(xiàn)宜弱,高倍鏡觀(guān)察光線(xiàn)宜強。
1. 對光: (1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線(xiàn)。 (2)撥動(dòng)反光鏡,調節至視野最亮無(wú)陰影。
反光鏡有平、凹兩面,光源強時(shí)用平面,較暗時(shí)用凹面,需要強光時(shí),將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時(shí),將聚光器降低,或光圈適當縮小。 (3)將待觀(guān)察的標本置載物臺上,轉動(dòng)粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。
于轉動(dòng)粗調節器的同時(shí),須俯身在鏡旁仔細觀(guān)察接物鏡與標本之間的距離。 (4)左眼于接目鏡觀(guān)察,同時(shí)左手轉動(dòng)粗調節,使鏡筒徐徐上升以調節焦距,使視野內的物象看到上時(shí)即停,再調微調節器,至標本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線(xiàn)的調節: 顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉換盤(pán)孔中。觀(guān)察標本時(shí),先使用低倍接物鏡,此時(shí),視野較大,標本較易查出,但放大倍數較小(一般放大100倍),較小的物體不易觀(guān)察其結構。
高倍接物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍),能觀(guān)察微小的物體或結構。 寄生蟲(chóng)的蠕蟲(chóng)卵,微絲蚴,原蟲(chóng)的滋養體及包囊,昆蟲(chóng)的幼蟲(chóng),均使用低、高倍鏡。
組織細胞內的原蟲(chóng),則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀(guān)察,如在低倍鏡下不能準確鑒定所見(jiàn)的物體或其內部構造時(shí),則轉高倍鏡觀(guān)察。
使用油鏡觀(guān)察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀(guān)察。 3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別: (1)標明放大倍數10*,40*,100*,或10/0.25,40/0.65,100/1.30。
(2)低倍鏡最短,高倍鏡較長(cháng),油鏡最長(cháng)。 (3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。
(4)油鏡頭上常刻有黑色環(huán)圈,或“油”字。 4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法: (1)光線(xiàn)對好后,移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀(guān)察的標本。
(2)如標本的體積較大,不能清楚查見(jiàn)其構造因而不能確認時(shí),則將標本移至視野中央,再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方。 (3)旋轉微調節器至物象清晰為止。
(4)調節聚光器及光圈,使視野內的物象達到最清晰的程度。 5. 油鏡的使用方法: (1)原理:使用油鏡觀(guān)察時(shí),需加香柏油,因為油鏡需要進(jìn)入鏡頭的光線(xiàn)多,但油鏡的透氣孔最小,這樣進(jìn)入的光線(xiàn)就少,物體不易看清楚。
同時(shí)又因自玻片透過(guò)的光線(xiàn),由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光,因此射入鏡頭的光線(xiàn)就更少,物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油,加于標本與玻片之間,使光線(xiàn)不通過(guò)空氣,這樣射入鏡頭的光線(xiàn)就較多,物象就看得清楚(圖2)。
(2)油鏡的使用: a.將光線(xiàn)調至最強程度(聚光器提高,光圈全部開(kāi)放)。 b.轉動(dòng)粗調節器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過(guò)多,不要涂開(kāi))于接物鏡正下方標本上。
c.轉動(dòng)接物鏡轉換盤(pán),使油鏡頭于鏡筒下方。 d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀(guān)察下,轉動(dòng)粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內,輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉動(dòng)粗調節器,使油鏡頭徐徐上升至見(jiàn)到標本的物象為止。 f.轉動(dòng)微調節器,使視野物象達到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器,并轉動(dòng)微調節器以觀(guān)察標本。 h.標本觀(guān)察完畢后,轉動(dòng)粗調節器將鏡筒升起,取下標本玻片。
立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。 6. 注意事項: (1)使用顯微鏡之前,應熟悉顯微鏡的各部名稱(chēng)及使用方法,特別應掌握識別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲(chóng)學(xué)實(shí)習中所觀(guān)察的標本,大多數為無(wú)色和顏色較淺,因此必須注意光線(xiàn)的調節。 (3)新鮮標本觀(guān)察時(shí),須加蓋玻片,以免標本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時(shí)可使標本表面勻平,光線(xiàn)得以集中,有利于觀(guān)察。
(三) 顯微鏡的保養 圖3 加用蓋玻片后,標本表面勻平,光線(xiàn)得以集中,便于檢查示意圖1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時(shí),右手緊握鏡臂,左手穩托鏡座,輕輕取出。不要只用一只手提取,以防顯微鏡墜落,然后輕輕放在實(shí)習臺上或裝 入木箱內。
2.顯微鏡放到實(shí)習臺上時(shí),先放鏡座。
應注意事項: ①保護好顯微鏡的鏡頭; ②旋轉粗準焦螺旋不要用力過(guò)猛; ③載物臺要保持清潔; ④使用低倍鏡觀(guān)察; ⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片; ⑥如何移動(dòng)玻片來(lái)選擇較好的觀(guān)察部位; ⑦如何區分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。
詳細步驟: 關(guān)鍵是對光和觀(guān)察 轉動(dòng)轉換器使低倍物鏡對準通光孔; 轉動(dòng)遮光器使最大的光圈對準通光孔, 再注視目鏡 手調節反光嘗矗佰匪脂睹拌色飽姬鏡 使視野呈雪白色 把標本放上去 轉動(dòng)粗準焦螺旋使鏡筒下降 然后就邊注視顯微鏡視野內 邊調粗準焦螺旋 直到視野出現物象 再微調細準焦螺旋 使物象更清晰!。
1、條件許可情況下,建議試驗室應具備三防條件:防震、防潮、防塵;電源:220V±10%,50HZ;溫度:0°C—40°C。
2、亮度調整切忌忽大忽小,也不要過(guò)亮,影響燈泡的使用壽命,同時(shí)也有損視力。
3、所有(功能)切換,動(dòng)作要輕,要到位。
4、關(guān)機時(shí)要將亮度調到最小。
5、調焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣,以免劃傷物鏡。
6、當載物臺墊片圓孔中心的位置遠離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡,以免劃傷物鏡。
7、非專(zhuān)業(yè)人員不要調整照明系統(燈絲位置燈),以免影響成像質(zhì)量。
8、更換鹵素燈時(shí)要注意高溫,以免灼傷;注意不要用手直接接觸鹵素燈的玻璃體。
9、關(guān)機不使用時(shí),將物鏡通過(guò)調焦機構調整到最低狀態(tài)。
10、關(guān)機不使用時(shí),不要立即該蓋防塵罩,待冷卻后再蓋,注意防火。
顯微鏡使用時(shí)的注意事項
1.取送方法要正確。因為反光鏡是通過(guò)鏡柄插放在鏡臂下面的,目鏡是插放在鏡筒上端的,所以,它們很容易滑落而損壞。取送顯微鏡時(shí)一定要右手握住鏡臂,左手托住鏡座,在任何情況下都不準用一只手提著(zhù)顯微鏡。另外,也不準許學(xué)生取下反光鏡和目鏡亂照亂摸。
2.鏡頭的保護。目鏡和物鏡平時(shí)放在顯微鏡箱內的專(zhuān)用的盒內。上實(shí)驗課期間,為了防止落上灰塵,要制作專(zhuān)用的塑料袋或布袋,課間時(shí)要隨時(shí)罩好。鏡頭臟了,只能用專(zhuān)用的擦鏡紙擦拭,擦時(shí)要順著(zhù)一個(gè)方向擦。如果擦拭不凈,最好蘸一點(diǎn)二甲苯繼續擦。注意,決不能把鏡頭放到二甲苯中浸泡,這樣會(huì )使鏡頭開(kāi)膠,鏡片脫落。
3.粗、細準焦螺旋的使用和防止鏡筒下滑。一般地說(shuō),粗、細準焦螺旋各轉動(dòng)一周,可以使鏡筒分別移動(dòng)10 mm和0.1 mm。要使鏡筒下降時(shí),一定要用眼睛直接看著(zhù)物鏡,使鏡筒緩緩下降。否則,很容易砸壞物鏡和玻片標本。
顯微鏡使用時(shí)間過(guò)長(cháng),鏡筒容易出現下滑現象。如果情況不太嚴重,教師可以進(jìn)行如下簡(jiǎn)易維修:老式顯微鏡鏡臂的上端有兩個(gè)控制鏡筒松緊的螺絲,只要順時(shí)針擰動(dòng)螺絲,鏡筒就擰緊了;對于國產(chǎn)的新式顯微鏡,鏡筒的松緊是通過(guò)兩個(gè)粗準焦螺旋來(lái)調節的。左手握緊左側粗準焦螺旋,右手順時(shí)針?lè )较驍Q緊粗準焦螺旋,鏡筒就擰緊了。如果情況嚴重,要及時(shí)送到修理部門(mén)維修。
4.轉換器的使用。轉動(dòng)轉換器時(shí),不要用手指扳著(zhù)物鏡。這樣時(shí)間長(cháng)了,容易使物鏡鏡頭松動(dòng),改變焦距,影響觀(guān)察的清晰度。正確的方法是手指握準轉換器的邊緣進(jìn)行轉動(dòng)。
5.制作目鏡上的指示針。在演示或考察學(xué)生觀(guān)察效果時(shí),最好用帶有指示針的目鏡。簡(jiǎn)易的做法是:輕輕拆開(kāi)目鏡,將一根短頭發(fā)的一端用膠水粘在目鏡內里的邊緣,另一端指向目鏡圓心的附近。觀(guān)察時(shí),輕輕地轉動(dòng)目鏡,指示針就能夠指出視野內的不同部位。
應注意事項:①保護好顯微鏡的鏡頭;②旋轉粗準焦螺旋不要用力過(guò)猛;③載物臺要保持清潔;④使用低倍鏡觀(guān)察;⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片;⑥如何移動(dòng)玻片來(lái)選擇較好的觀(guān)察部位;⑦如何區分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。
詳細步驟:關(guān)鍵是對光和觀(guān)察轉動(dòng)轉換器使低倍物鏡對準通光孔;轉動(dòng)遮光器使最大的光圈對準通光孔,再注視目鏡 手調節反光鏡 使視野呈雪白色把標本放上去 轉動(dòng)粗準焦螺旋使鏡筒下降然后就邊注視顯微鏡視野內 邊調粗準焦螺旋直到視野出現物象 再微調細準焦螺旋 使物象更清晰!。
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